基因克隆中的三大基本指的是什么
三大基本要素是：目的基因、载体、受体细胞，其实还有一点，一般不常说，那就是工具酶。......阅读全文
特异正常基因的分离与克隆技术介绍
特异正常基因的分离与克隆：应用重组DNA和分子克隆技术结合基因定位研究成果，已有不少基因并将会有更多人类基因被分离和克隆，这是基因治疗的前提，在当代分子生物技术条件下，一般来说，只要有基因探针和准确的基因定位，任何基因都可被克隆。除此，如今既可人工合成DNA探针，还可用DNA合成仪在体外人工合成基因
植物所在玉米耐旱基因克隆研究中取得进展
玉米是我国最重要的粮食作物之一，其生产常常受到干旱等自然灾害的威胁，在干旱严重的年份或区域甚至面临绝收的危险。发掘控制玉米耐旱性的遗传位点、克隆玉米耐旱基因、揭示其生物学功能的分子机理，具有重要的研究价值和应用价值。中国科学院植物研究所秦峰研究组利用全球不同地区的玉米材料组成的自然变异群体，运用
克隆化酵母DNA的操作实验——基因置换技术
实验材料酵母实验步骤一、整合性破坏1. 将基因的内部片段亚克隆到YIP载体。2. 在此内部片段中将质粒线性化。3. 继续整合性转化步骤3（见基本方案1）。二、基因破坏一步法1. 将合适的选择性基因亚克隆到目的基因上，必要时，可在亚克隆的同时引入一个缺失。2. 采用合适的限制性位点，从步骤1
中国成功培育世界首例基因编辑克隆犬
据中国之声《央广新闻》报道，北京一家生物科技公司7月5日对外宣布，该公司成功培育出我国首例体细胞克隆犬“龙龙”，这是世界首例基因编辑的克隆犬。说到“克隆”这个词，很多人会想到世界上第一例运用这项技术培育出的动物——克隆羊“多莉”，它标志着生物体通过体细胞进行无性繁殖的克隆技术，成为现实。 这之
成功克隆PKD第一个致病基因
近日，来自复旦大学、福建医科大学与中国科学院上海神经科学研究所的研究人员应用先进的全外显子测序技术，在8个家族性发作性运动诱发性运动障碍（简称为PKD）家系中，发现PRRT2基因上存在3种截短突变，并通过多层次验证，结合PRRT2基因表达及蛋白定位研究，最终成功克隆了家族性PKD的第一个致病基因
基因克隆：高效感受态细胞制作（一）
方法一A液：1M，MnCl2：B液：1M，HEPES，pH=6.2-6.8，用无菌水配，配后不需灭菌；C液 称取CaCl2 0.10g，KCl 1.18g，全部转入细口试剂瓶，然后加入46ml三蒸水，轻轻振荡使所有组分充分溶解。将瓶塞盖上并用牛皮纸、棉线包扎，然后放入灭菌锅121℃高压灭菌备用。取1
基因克隆(gene－clone)的几种常用方法介绍2
其基本原理是：用一个在种源上相近的基因组将靶基因组中所有共同的基因掩盖起来,而只暴露出特异的基因,在整个反应中只有特异基因能被扩增。其操作程序为:(1)用同一限制性内切酶(一般用Bam HI,Bgl II或Hind III)同时处理靶基因组和掩盖基因组DNA，其中掩盖基因组DNA的量至少要2
我国科学家克隆出抗大豆锈病基因
科技日报武汉4月21日电 (记者吴纯新 通讯员张惠雯 郝青南)21日，中国农业科学院油料作物研究所宣布一项重要成果。该所科研人员历经近30年努力，在国际上首次从大豆中克隆出抗大豆锈病基因，破解了抗大豆锈病基因匮乏的世界性难题。目前，该基因的相关知识产权已申请多国发明专利，相关成果在国际期刊《自然·通
血清学选克隆新抗原或新基因
实验材料 血清试剂、试剂盒 E.coli phagelysateTBSTNZY agar plates MgSO4IPGTTBSBCIP-NBTSM bufferchloroformLB培养基仪器、耗材 nitrocellulose membranes滤纸恒温培养箱-80℃低温储藏箱分光光度计低温离
我国科学家成功克隆水稻白叶枯病“克星”基因
近日，我国科学家成功克隆水稻白叶枯病的“克星”——持久抗病基因Xa7。通过揭示Xa7高抗、广谱、持久、耐热特性的新抗病分子机制，为水稻白叶枯病的长效防控奠定了基础。 白叶枯病是我国水稻生产中的“三大病害”之一，严重影响水稻产量和品质。资料显示，20世纪80年代以前，白叶枯病常导致水稻减产20
基因克隆：高效感受态细胞制作（二）
4、培养后的OD值。其实这并一个非常重要的参数，只是当OD值大到一定的程度后，菌体要保持对数生长已经不太可能，因此很多指导方法上强调OD不得大于0.6，0.8等等。同时，OD值大时菌体总量大，因而感受态绝对数量要大一点，因而需要在OD值的两方面影响中找一个平衡点。5、培养基中的各种离子。经验证明，当
猪克隆胚胎发育关键候选基因被找到
近日，中国农业科学院北京畜牧兽医研究所动物基因工程与种质创新团队研究发现与猪体细胞克隆胚胎初次分裂时间相关的关键候选基因，为提高猪克隆胚胎的发育效率、解析体细胞克隆机制提供了理论基础。相关研究成果在线发表在《基因》上。 该团队研究员牟玉莲介绍，猪体细胞克隆技术是目前唯一可以通过体细胞遗传物质
基因克隆中的三大基本指的是什么
三大基本要素是：目的基因、载体、受体细胞，其实还有一点，一般不常说，那就是工具酶。
新研究克隆出提高玉米蛋白含量关键基因
巫永睿（中）团队在三亚南繁的试验田里。受访者供图■本报记者 张双虎 ■黄辛 有测算表明，普通玉米蛋白含量每提高1个百分点，相当于中国每年可以少进口近800万吨大豆。而科学家在最新的研究中，已成功将玉米蛋白含量提高了4个百分点。 11月17日，《自然》发表中科院分子植物科学卓越创
我国科学家克隆出抗大豆锈病基因
21日，中国农业科学院油料作物研究所宣布一项重要成果。该所科研人员历经近30年努力，在国际上首次从大豆中克隆出抗大豆锈病基因，破解了抗大豆锈病基因匮乏的世界性难题。 目前，该基因的相关知识产权已申请多国发明专利，相关成果在国际期刊《自然·通讯》发表。 作为大豆最主要病害的大豆锈病，其防治一直
血清学筛选克隆新抗原/新基因（二）
19. 第一轮筛选得到阳性克隆需要进行第二轮筛选以去除假阳性并获得阳性单克隆噬菌体。过程如第一轮筛选，只不过用直径90mm 平板；具体过程见步骤4，这时所加入的噬菌体溶液是第一轮筛选得到的噬菌体上清（见步骤18），在用前要滴定好噬菌体的滴度，噬菌斑的数量以可区分出单个克隆，同时密度不能太稀为
血清学选克隆新抗原或新基因
实验材料血清试剂、试剂盒E.coli phagelysateTBSTNZY agar platesMgSO4IPGTTBSBCIP-NBTSM bufferchloroformLB培养基仪器、耗材nitrocellulose membranes滤纸恒温培养箱-80℃低温储藏箱分光光度计低温离心机恒温
基因克隆(gene－clone)的几种常用方法介绍1
基因(gene)是遗传物质的最基本单位,也是所有生命活动的基础。不论要揭示某个基因的功能,还是要改变某个基因的功能,都必须首先将所要研究的基因克隆出来。特定基因的克隆是整个基因工程或分子生物学的起点。本文就基因克隆的几种常用方法介绍如下。1 根据已知序列克隆基因对已知序列的基因克隆是基因克隆方法中最
血清学筛选克隆新抗原/新基因（一）
一、E.coli/phage 裂解液预吸附血清 1. 将E.coli /phage lysate 以1:10-20 稀释在TBST 溶液中。 2. 将4 张82mm 的nitrocellulose membranes（NC）浸入稀释后的E.coli/ phagelysate 中，室温下水平摇动30
首个突破－我国克隆玉米单向杂交不亲和基因
记者从中国科学院遗传与发育生物学研究所获悉，该所陈化榜研究组与周奕华研究组及薛勇彪研究组合作，在玉米单向杂交不和基因研究领域取得突破，首次克隆了控制玉米单向杂交不亲和现象的基因ZmGa1P，并对其不亲和机理进行了探究。该成果于2018年9月10日在Nature Communications杂志
依托高通量测序技术－400多个水稻基因转基因克隆工作完成
我国的水稻研究已进入了一个全新的领域，目前华大基因农能平台已经完成400多个水稻基因的转基因克隆工作，依托华大基因强大的高通量测序技术，今后将进一步加快水稻转基因育种研究工作。这是记者在6月29日结束的“水稻基因组学与农业应用研讨会”上获悉的消息。 作为世界上最早种植水稻的国家，水稻
油菜种子含油量调控基因首次被克隆
日前，《分子植物》（Molecular Plant）在线发表了中国农业科学院油料作物研究所王汉中院士团队最新成果。该团队在国际上首次成功克隆了农作物种子性状的第一个细胞质调控基因orf188，并揭示了该基因调控油菜种子高含油量的作用机制。该成果为油菜高含油量育种提供了新途径，为育种过程中杂交母本
分子克隆技术在基因治疗方面的应用
通过遗传工程看到癌细胞具有逆转为正常细胞的可能性，例如SV40病毒引起的小鼠肿瘤细胞，在温度高时可逆转为正常细胞。为治疗半乳糖血症，用带有大肠杆菌乳糖操纵子的λ噬菌体去感染半乳糖血症患者的离体培养细胞，发现这种细胞的半乳糖苷酶达到了正常水平，并确实能代谢半乳糖。
我国首例荧光转基因克隆猪产下荧光猪崽
新华网哈尔滨1月8日电(记者 李建平)记者从东北农业大学获悉，中国首例绿色荧光蛋白转基因克隆猪日前成功产下2头具有绿色荧光遗传特征的小猪。 1月7日，两头刚出生的“荧光猪崽”在紫外光源激发下发出绿色荧光。 有关专家称，这次试验的成功标志着中国通过体细胞核移植技术生产转基因猪已经发展成熟。
华南农大克隆出水稻新温敏核不育基因
记者9月17日从华南农业大学获悉，该校亚热带农业生物资源保护与利用国家重点实验室庄楚雄课题组继克隆到培矮64S温敏不育基因后，近日又克隆出一个新的水稻温敏核不育基因。相关成果发表于《自然—通讯》杂志。 利用温敏不育系培育的两系杂交水稻免除了保持系，在不同的温度条件下既可作为不
江苏成功诞生α乳白蛋白转基因克隆奶山羊
记者9月2日从江苏省农业科学院畜牧研究所获悉，该所目前已陆续诞生多只转人α-乳白蛋白基因的克隆奶山羊，标志着江苏在相关技术领域迈入国内先进行列。 据动物遗传资源与草食家畜育种项目组负责人曹少先博士介绍，转基因克隆奶山羊的诞生经历了基因克隆、载体构建、细胞转染、体细胞核移植及胚胎移植等
湖北农科院用CRISPR制备基因敲除克隆猪
来自湖北省农科院畜牧兽医研究所、河南科技大学和中科院水生生物研究所的研究人员，用CRISPR/Cas9系统和Cre/LoxP，敲除了猪初生细胞中肌生成抑制蛋白（MSTN）的一个等位基因，制备了无选择标记的MSTN基因敲除克隆猪。相关研究结果发表在8月17日的《Scientific Reports
油菜种子含油量调控基因首次被克隆
1月28日，《分子植物（Molecular Plant）》在线发表了中国农业科学院油料作物研究所王汉中院士团队最新成果。该团队在国际上首次成功克隆了农作物种子性状的第一个细胞质调控基因orf188，并揭示了该基因调控油菜种子高含油量的作用机制。该成果为油菜高含油量育种提供了新途径，为育种过程中
昆明植物所建立全新植物基因链接与克隆系统
随着高通量测序技术的普及与基因组信息爆炸式的增长，解析基因与基因组孕藏的功能信息成为我们了解生命密码的必需步骤。功能基因研究是破解基因组信息这部天书的重要手段之一，而功能基因的研究离不开载体的构建与转基因方法。传统的载体构建耗时耗力，伴随着烦琐的酶切与连接手段，成功地构建一个用于植物转化的载体往
鹌鹑PIWI基因的克隆及其结合小RNA的鉴定
PIWI 蛋白能通过与多种内源非编码小RNA结合在表观水平和转录后水平调控基因的表达。然而在家禽中，PIWI蛋白的生物学功能及其结合小RNA的作用机制尚不清楚。扬州大学动物科学与技术学院陈国宏教授课题组对该作用机理进行了研究*，研究成果发表在2012年12月刊的PLoS ONE上。PIWI 基因