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膜蛋白受体激酶对渗透胁迫信号转导起关键作用

干旱及盐碱等引起的渗透胁迫是限制农作物生长速度与产量的关键因素之一。目前,植物细胞如何感知外界环境的渗透变化并做出适应性响应的早期机制尚不清楚。 谷子(Setaria italica)起源于我国黄河流域,是最早被驯化和栽培的作物之一。谷子及其野生种青狗尾草因基因组小、易于转化、生育期短且繁殖系数高,正在快速成为禾本科C4作物遗传研究的模式植物。中国科学院遗传与发育生物学研究所农业资源研究中心赵美丞研究组以谷子为模式研究体系,揭示了DPY1在感知渗透势变化及信号转导中具有关键作用,为该领域研究提供了重要信息。 前期研究在谷子中克隆了一个膜蛋白受体激酶DPY1。研究在利用LC-MS/MS筛选DPY1的互作蛋白时发现SnRK2激酶家族成员SAPK6及其上游特异的B4家族RAF20激酶是DPY1的互作蛋白(而DPY1在体外不能直接磷酸化二者),暗示了DPY1参与了渗透胁迫信号;激酶实验表明渗透胁迫/干旱可以显著增加DPY1的磷酸......阅读全文

我科学家发现谷子 “刹车”基因调控叶片直立的分子机制

  8月18日,《美国科学院院刊(PNAS)》在线发表了中国农业科学院作物科学研究所联合国内多家单位完成的成果。该成果阐释了谷子的 DPY1 作为油菜素内酯信号的“刹车”基因调控叶片披垂与直立的分子机制,为禾本科作物株型研究提供了新思路。   据国家谷子高粱产业技术体系首席科学家、作科所刁现民研究

渗透细胞蛋白磷酸化实验

基本方案 带分析 备择方案1 制备用于SDS-PAGE的天然细胞样品 备择方案2 制备用于等电聚焦的天然细胞样品             实验方法原理 检测出目标

渗透细胞蛋白磷酸化实验

实验方法原理 检测出目标蛋白是磷蛋白后,可将这个蛋白质的磷酸化过程在无细胞系统或天然细胞系统中进行研究。大多数蛋白激酶除了在细胞内还可在胞外进行许多底物的磷酸化。天然细胞的渗透化处理为得到满意结果提供了一个有效的实验方法,通过使用一些不同的试剂可以使细胞处于短暂的渗透状态。这个过程使反应发生在细胞内

渗透细胞蛋白磷酸化实验——带分析

本实验讨论用三磷酸核苷在可渗透细胞和分离的细胞组分体外标记蛋白的策略。这类实验在大多数情况下还是以 [γ-32P] ATP 作为外源性磷酸供体。尽管在特殊情况下[γ-32P] GTP 也能被用于蛋白质标记。实验方法原理检测出目标蛋白是磷蛋白后,可将这个蛋白质的磷酸化过程在无细胞系统或天然细胞系统中进

磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶1抗体的鉴定步骤

磷酸化丝裂原活化蛋白激酶激酶1抗体的鉴定:1)抗体的效价鉴定:不管是用于诊断还是用于治疗,制备抗体的目的都是要求较高效价。不同的抗原制备的抗体,要求的效价不一。鉴定效价的方法很多,包括有试管凝集反应,琼脂扩散试验,酶联免疫吸附试验等。常用的抗原所制备的抗体一般都有约成的鉴定效价的方法,以资比较。如制

蛋白质磷酸化的蛋白磷酸激酶的纯化与活性分析

  蛋白磷酸激酶是能催化磷酸基团从磷酸供体转移到受体蛋白的酶,通常ATP的γ位磷酸(或其它三磷酸核苷)为供体。国际生物化学联合会根据受体氨基酸的特异性,将蛋白激酶分为以下几类:  ①以蛋白乙醇基作为受体的磷酸转移酶称为蛋白丝氨酸或苏氨酸激酶;  ②以苯基为磷酸受体的磷酸转移酶称为蛋白酪氨酸激酶;  

大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)酶联免疫分析

本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定大鼠血清,血浆,细胞上清及相关液体样本中磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)水平。用纯化的大鼠磷酸化蛋白激酶C(P-PKC)抗体包被微孔板,制成固相抗体,往包被

人磷酸化蛋白激酶C(phos-PKC)ELISA试剂盒

人磷酸化蛋白激酶C(phos-PKC)ELISA试剂盒 (用于血清、血浆、细胞培养上清液和其它生物体液内)原理本实验采用双抗体夹心 ABC-ELISA法。用抗人 phos-PKC 单抗包被于酶标板上,标准品和样品中的 phos-PKC与单抗结合,加入生物素化的抗人phos-PKC,形成免疫复合物连接

光合磷酸化的化学渗透学说

  关于光合磷酸化的机理有多种学说,如中间产物学说、变构学说、化学渗透学说等,其中被广泛接受的是化学渗透学说。  化学渗透学说(chemiosmotic theory)由英国的米切尔(Mitchell,1961)提出,该学说假设能量转换和偶联机构具有以下特点:  ①由磷脂和蛋白多肽构成的膜对离子和质

磷酸化酶激酶的基本信息

中文名称磷酸化酶激酶英文名称phosphorylase kinase定  义编号:EC 2.7.1.38。催化磷酸化酶的两种变构形式(磷酸化酶a及b)转换的酶。在ATP存在下,催化无活性的磷酸化酶b的磷酸化,使成为有活性的磷酸化酶a。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)

磷酸化酶激酶的基本信息

中文名称磷酸化酶激酶英文名称phosphorylase kinase定  义编号:EC 2.7.1.38。催化磷酸化酶的两种变构形式(磷酸化酶a及b)转换的酶。在ATP存在下,催化无活性的磷酸化酶b的磷酸化,使成为有活性的磷酸化酶a。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)

运用肽库筛选磷酸化激酶motif方法

Screening Kinase Phosphorylation Motifs Using Peptide LibrariesIsaac A. Manke and Michael B. YaffeCenter for Cancer Research, Massachusetts Institute

粗蛋白测定仪参与杂交谷子粗蛋白含量分析

蛋白质含量是谷子营养品质的主要构成成分之一,在谷子品质育种方面,人们希望借助粗蛋白测定仪来提高谷子的蛋白质含量。谷子的蛋白质是一种比较优质的植物蛋白质,不仅氨基酸含量较高,而且氨基酸的组成也比较合理,人体必需氨基酸含量比其他主要粮食作物都高。而且谷子具有营养全面平衡、易消化等优点,是孕妇、儿童和病人

渗透细胞蛋白磷酸化实验—— 制备用于SDS-PAGE的天然细胞

实验材料待标记的培养细胞预热研究用细胞(传代细胞或被分离的原代细胞)试剂、试剂盒2 × SDS-PAGE 样品缓冲液细胞培养液细胞外缓冲液有渗透性的37℃缓冲液链球菌溶血素 O 工作溶液ATP 储存溶液[γ-32P] ATP研究用药理试剂受体激动剂2 × 冰裂解缓冲液蛋白抑制剂储存溶液仪器、耗材4℃

渗透细胞蛋白磷酸化实验—— 制备用于等电聚焦的天然细胞

实验材料待标记的培养细胞预热研究用细胞(传代细胞或被分离的原代细胞)试剂、试剂盒4℃ 双向-PAGE裂解缓冲液双向-PAGE样品缓冲液细胞培养液细胞外缓冲液有渗透性的37℃缓冲液链球菌溶血素 O 工作溶液ATP 储存溶液[γ-32P] ATP研究用药理试剂受体激动剂仪器、耗材浴式超声仪干冰 乙醇浴冻

我国学者揭示RAFs和SnRK2s介导植物渗透胁迫早期应答过程

  1月30日,国际学术期刊《自然-通讯》(Nature Communications)在线发表中国科学院分子植物科学卓越创新中心上海植物逆境生物学研究中心王鹏程和朱健康研究组合作的研究论文“A RAF-SnRK2 kinase cascade mediates early osmotic stre

山羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶ELISA试剂盒使用注意说明

山羊磷酸化腺苷酸活化蛋白激酶ELISA试剂盒使用注意说明: 1.由于现有条件及科学技术水平尚不能对所有供货商提供的所有原料进行全面的鉴定与分析,本产品可能存在一定的质量技术风险。 2.终的实验结果与试剂的有效性、实验者的相关操作以及当时的实验环境密切相关,请务必准备充足的标本备份。 3.不同批次的

蛋白激酶激酶的基本信息

中文名称蛋白激酶激酶英文名称protein kinase kinase定  义催化蛋白激酶磷酸化的酶。生物体中往往通过这种磷酸化调节蛋白激酶的活性,在信号转导途径中起重要作用。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)

蛋白激酶激酶的基本信息

中文名称蛋白激酶激酶英文名称protein kinase kinase定  义催化蛋白激酶磷酸化的酶。生物体中往往通过这种磷酸化调节蛋白激酶的活性,在信号转导途径中起重要作用。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)

蛋白质磷酸化

Tyrosine Kinase Assay Using Synthetic Peptides (T. Miller)Small synthetic peptide substrates are especially well suited for applications such as assay

磷酸化蛋白鉴定实验

实验材料测序级膜蛋白酶试剂、试剂盒二硫苏糖醇碘代乙酰胺乙酸溶液甲酸乙酰氯仪器、耗材螯合琼脂糖凝胶层析介质实验步骤这里所述的方法概括为下列几个步骤:胰蛋白酶水解消化膜和可溶性组分中的蛋白质(见 24. 3.1 );固相金属螯合亲和层析(IMAC) 富集磷酸肽(见 24. 3. 2 );用串联质谱对磷酸

磷酸化蛋白鉴定实验

实验材料测序级膜蛋白酶                                                          试剂、试剂盒二硫苏糖醇                                                                  碘代乙酰

磷酸化蛋白鉴定实验

实验材料 测序级膜蛋白酶试剂、试剂盒 二硫苏糖醇碘代乙酰胺乙酸溶液甲酸乙酰氯仪器、耗材 螯合琼脂糖凝胶层析介质实验步骤 这里所述的方法概括为下列几个步骤:胰蛋白酶水解消化膜和可溶性组分中的蛋白质(见 24. 3.1 );固相金属螯合亲和层析(IMAC) 富集磷酸肽(见 24. 3. 2 );用串

用蛋白质底物进行蛋白质激酶分析实验——酪蛋白激酶

试剂、试剂盒酪蛋白激酶分析缓冲液β-酪蛋白β-酪蛋白储存液实验步骤1. 在置于冰上的离心管内配制含下列成分的 20 μl 反应混合物:5X 酪蛋白激酶分析缓冲液                            4 μl  β-酪蛋白                               

蛋白激酶的分布

蛋白激酶在细胞内的分布遍及核、线粒体、微粒体和胞液。一般分为3大类。①底物专一的蛋白激酶:如磷酸化酶激酶,丙酮酸脱氢酶激酶等。②依赖于环核苷酸的蛋白激酶:如环腺苷酸(cAMP)蛋白激酶,环鸟苷酸(cGMP)蛋白激酶。③其他蛋白激酶:如组蛋白激酶等。cAMP蛋白激酶以活化型和非活化型两种形式存在于生物

蛋白激酶的分类

已发现的蛋白激酶约有400多种,分子内都存在一个同源的由约270氨基酸残基构成的催化结构区。在细胞信号传导、细胞周期调控等系统中,蛋白激酶形成了纵横交错的网络。这类酶催化从ATP转移出磷酸并共价结合到特定蛋白质分子中某些丝氨酸、苏氨酸或酪氨酸残基的羟基上,从而改变蛋白质、酶的构象和活性。蛋白质磷酸化

光合磷酸化化学渗透学说的实验证据

  ①阶段光合磷酸化实验  指光合磷酸化可以相对分成照光阶段和暗阶段来进行,照光不向叶绿体悬浮液中加磷酸化底物,而断光时再加入底物能形成ATP的实验。1962年,中国的沈允钢等人,用此实验探测到光合磷酸化高能态(Z*)的存在。1963年贾格道夫(Jagendorf)等也观察到了光合磷酸化高能态的存在

磷酸化蛋白指的是什么

买能够区分磷酸化构型和未磷酸化构型的两种不同抗体没有听过磷酸化因子的概念。你说的两种都是蛋白质,都是细胞分子信号通路中的重要元素。JAK是一种磷酸激酶,可以将STAT磷酸化。没有听说过JAK自身被磷酸化。所以需要区分是否磷酸化的只有STAT。

磷酸化蛋白检测小妙招

蛋白质磷酸化是一种非常重要且广泛存在于原核生物和真核生物中的翻译后修饰调控方式,参与细胞的增殖、发育、分化、凋亡,细胞骨架调控、神经活动、肌肉收缩、新陈代谢及肿瘤发生等,对许多生物的细胞功能起着生物“开/关”作用。蛋白质磷酸化指由蛋白质激酶催化的把ATP的磷酸基转移到底物蛋白质氨基酸残基(丝氨酸、苏

促分裂原活化的蛋白激酶激酶激酶的基本信息

中文名称促分裂原活化的蛋白激酶激酶激酶英文名称mitogen-activated protein kinase kinase kinase;MAPKKK定  义受体外促分裂信号(包括生长因子、细胞因子、细胞应急)等的刺激而激活的一类丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶。包括Raf、MEKK1~4等。此酶被GTP结