HPLC、GC、IR、UV什么意思
HPLC，即高效液相色谱法，是以液体为流动相，采用高压输液系统，将具有不同极性的单一溶剂或不同比例的混合溶剂、缓冲液等流动相泵入装有固定相的色谱柱，在柱内各成分被分离后，进入检测器进行检测，从而实现对试样的分析。GC，即气相色谱，可分为气固色谱和气液色谱。气固色谱，流动相是气体，固定相是固体物质；气液色谱，流动相是气体，固定相是液体。IR，即红外线，电磁波波长介于微波与可见光之间，在1mm到760纳米之间。可分为三部分，即近红外线，波长为(0.75-1)～(2.5-3)μm之间；中红外线，波长为(2.5-3)～(25-40)μm之间；远红外线，波长为(25-40)～l500μm 之间。UV，即紫外线，电磁波波长为10～400纳米，可以分为UVA（紫外线A，波长320～400纳米，长波）、UVB（波长280～320纳米，中波）、UVC（波长100～280纳米，短波）3种。......阅读全文
HPLC与FPLC的异同
FPLC全称为快速蛋白液相色谱（Fast protein liquid chromatography），其原理与GX液相色谱理论类似，是由经典的液体柱层析引入气相色谱理论，并且对相体进行了改革，配用高压输液泵，采用高灵敏检测器、梯度洗脱装置、自动收集装置和微机等发展起来的现代液相色谱。 近些年
HPLC的故障及处理
(一) 保留时间变化 1.柱温变化 柱恒温。 2.等度与梯度间未能充分平衡 至少用10倍柱体积的流动相平衡柱。 3.缓冲液容量不够 用>25mmol/L的缓冲液。 4.柱污染 每天冲洗柱。 5.柱内条件变化 稳定进样条件，调节流动相。 6.柱快达到寿命 采用保护柱。 (二) 保留时间缩短 1.流速增
Waters－HPLC故障排除指南
Waters公司的，HPLC故障排除指南1. Column Life-Time 2. Variable Retention Times 3. Drifting Retention Times 4. Column-to-Column and Batch-to-Batch Reprodu
水质对HPLC的影响
高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）是一种有效可靠的技术，目前已成为许多实验室研究的重要工具。HPLC最常见的一个问题就是溶剂中的污染物对分析结果的影响。1、颗粒颗粒可以损坏泵和注射器。颗粒也可以堵塞色谱柱并且熔化它，这会导致回
HPLC直接液体导入接口
直接液体导入接口（DLI）是将HPLC的流动相沿着进样杆流动，然后通过一个直径为3-5μm的针孔，使液体射入质谱计的CI离子源中。仅仅大约10-50μl/min的液流，就如小液滴流一样可进入离子源（是传统HPLC流量的1%-5%），否则质谱计的泵系统将被损伤。当它通过一个加热的去溶剂区域时，溶剂蒸发
HPLC基础知识（七）
V．HPLC应用一、样品测定1．流动相比例调整：由于我国药品标准中没有规定柱的长度及填料的粒度，因此每次新开检新品种时几乎都须调整流动相（按经验，主峰一般应调至保留时间为6~15分钟为宜）。所以建议第一次检验时请少配流动相，以免浪费。弱电解质的流动相其重现性更不容易达到，请注意充分平衡柱。2．样品配
纯水对于HPLC的影响
纯水对于HPLC的影响液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）是一种有效可靠的技术，目前已成为许多实验室研究的重要工具。HPLCzui常见的一个问题就是溶剂中的污染物对分析结果的影响。颗粒颗粒可以损坏泵和注射器。颗粒也可以堵塞色谱柱并且
HPLC如何计算样品含量
你是用什么样的定量方法呢？如果面积归一化法的话就直接用你的待检峰面积除上你的样品所有峰面积和再乘100就是你的样品中待检成分的百分比浓度了。如果是内标或外标法应该要进标准溶液
HPLC基础知识（三）
3．柱外效应速率理论研究的是柱内峰展宽因素，实际在柱外还存在引起峰展宽的因素，即柱外效应（色谱峰在柱外死空间里的扩展效应）。色谱峰展宽的总方差等于各方差之和，即： σ2＝σ2柱内＋σ2柱外＋σ2其它柱外效应主要由低劣的进样技术、从进样点到检测池之间除柱子本身以外的所有死体积所引起。为了减少柱外
HPLC的故障及处理
（一) 保留时间变化1.柱温变化 柱恒温2.等度与梯度间未能充分平衡 至少用10倍柱体积的流动相平衡柱3.缓冲液容量不够 用>25mmol/L的缓冲液4.柱污染 每天冲洗柱5.柱内条件变化 稳定进样条件,调节流动相6.柱快达到寿命 采用保护柱(二) 保留时间缩
HPLC良好的连接方略
毛细管对高效液相色谱分离的影响 若高效液相色谱 (HPLC) 系统采用了不适当的连接方式或者应用不正确的毛细管，均可能导致均可能导致不良的峰扩宽，色谱柱的最佳分离效率就更无从谈起。甚至还可能发生使用的柱子越细，其洗脱峰的扩宽反而越大的情况。本文将详细介绍毛细管对高效液相色谱分离的影响，
水质对HPLC的影响
水质对HPLC的影响有机物超纯水中的有机物可能影响色谱峰的分离度和积分、可能导致鬼峰、还可能改变固定相的选测性以及影响色谱基线。离子离子浓度的改变会影响分离结果，部分能吸收UV的离子会对峰产生影响。某些有腐蚀性离子的还会降低高压输液泵等配件的使用寿命。胶体胶体会不可逆的吸附在固定相上面，影响柱的分离
HPLC方法开法哪些事！
开发方法或方法验证时最重要的一步就是流动相的选择和比例的调整。我想大家肯定都遇到过分离度不好或峰形不好的情况，大部分原因就是流动相没调好，那到底该怎么调，怎么选择呢？看完下文可能你就知道答案了。 01、由强到弱 一般先用90%的乙腈(或甲醇)/水(或缓冲溶液)进行试验，这样可以很快地得到分离
HPLC基础知识（四）
4．柱的使用和维护注意事项 色谱柱的正确使用和维护十分重要，稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。在色谱操作过程中，需要注意下列问题，以维护色谱柱。① 避免压力和温度的急剧变化及任何机械震动。温度的突然变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充状况；柱压的突然升高或降低也会冲动柱内
如何提高HPLC柱效？
要提高液相色谱的效率可从以下几方面入手。 以下介绍了几种国际上流行的测量和计算柱效值的方法。 1、提高液相色谱柱柱效的方法要提高液相色谱的效率可从以下几方面入手。 （1）降低移动相的流速,但会使分析时间延长。 （2）减少固定相的量,但色谱柱中样品的负载量也随之减小。 （3）减小固定相的颗粒度,但不能
HPLC的故障及处理
(一) 保留时间变化1.柱温变化 柱恒温。2.等度与梯度间未能充分平衡 至少用10倍柱体积的流动相平衡柱。3.缓冲液容量不够 用>25mmol/L的缓冲液。4.柱污染 每天冲洗柱。5.柱内条件变化 稳定进样条件，调节流动相。6.柱快达到寿命 采用保护柱。(二) 保留时间缩短1.流速增加 检查泵，重新
HPLC保留时间限制多少？
HPLC只是分离的手段，如果保留时间太短，说明被分离物质在固定相上面的保留较差，就有可能与不保留的杂质混在一起而干扰待测物的测定，当然，这只是在使用UV、ELSD等特异性不是很强的检测器时的常见情况，但是如果使用荧光、质谱等特异性较强的检测器时，这种干扰会被大大降低或者排除。保留时间与使用的液相色谱
HPLC－故障及排除方法
详细说明: 诊状 可能的原因 解 决 方 法 一 保留时间变化 1.柱温变化 柱恒温 2.等度与梯度间未能充分平衡 至少用10倍柱体积的流动相平衡柱 3.缓冲液容量不够 用>25mmol/L的缓冲液 4.柱污染 每天冲洗柱 5.柱内条件变化 稳定进样条件,调节流动相 6.柱快达到寿命 采
HPLC基础知识（六）
三、流动相1．流动相的性质要求 一个理想的液相色谱流动相溶剂应具有低粘度、与检测器兼容性好、易于得到纯品和低毒性等特征。 选好填料（固定相）后，强溶剂使溶质在填料表面的吸附减少，相应的容量因子k降低；而较弱的溶剂使溶质在填料表面吸附增加，相应的容量因子k升高。因此，k值是流动相组成的函数
HPLC基础知识（五）
4．与检测器有关的故障及其排除1）流动池内有气泡 如果有气泡连续不断地通过流动池，将使噪音增大，如果气泡较大，则会在基线上出现许多线状“峰”，这是由于系统内有气泡，需要对流动相进行充分的除气，检查整个色谱系统是否漏气，再加大流量驱除系统内的气泡。如果气泡停留在流动池内，也可能使噪音增大，可采
HPLC基础知识（一）
鉴于HPLC应用在药品分析中越来越多，因此每一个药品分析人员应该掌握并应用HPLC。I．概论 一、液相色谱理论发展简况色谱法的分离原理是：溶于流动相(mobile phase)中的各组分经过固定相时，由于与固定相(stationaryphase)发生作用（吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和
什么是HPLCUV
高效液相色谱HPLC紫外检测器UV用紫外检测器的高效液相色谱
水质对HPLC的影响
高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography \ HPLC）是一种有效可靠的技术，目前已成为许多实验室研究的重要工具。HPLC最常见的一个问题就是溶剂中的污染物对分析结果的影响。颗粒颗粒可以损坏泵和注射器。颗粒也可以堵塞色谱柱并且熔化它，这会导致回压增
HPLC基础知识（二）
3．离子交换色谱法 固定相是离子交换树脂，常用苯乙烯与二乙烯交联形成的聚合物骨架，在表面未端芳环上接上羧基、磺酸基（称阳离子交换树脂）或季氨基（阴离子交换树脂）。被分离组分在色谱柱上分离原理是树脂上可电离离子与流动相中具有相同电荷的离子及被测组分的离子进行可逆交换，根据各离子与离子交换基团具有不同的
HPLC－故障及排除方法
诊状 可能的原因 解 决 方 法 （ 一 ） 保留时间变化 1. 柱温变化柱恒温2. 等度与梯度间未能充分平衡至少用 10 倍柱体积的流动相平衡柱3. 缓冲液容量不够用 >25mmol/L 的缓冲液4. 柱污染每天冲洗柱5. 柱内条件变化稳定进样条件 , 调节流动相6. 柱快达到寿命采用保护柱（ 二
HPLC流动相如何选择
对于一般的反相柱，用甲醇/水或乙腈/水作流动相。甲醇/水作流动相时，如果得到的色谱图出的峰分的不完全，可以加大水的比例。如果出得峰太靠后而分离效果又不错，可加大甲醇的比例，可使峰出的早一些。对于一些难分离的物质，要选用乙腈/水作流动相。由于高效液相色谱中流动相是液体，它对组分有亲和力，并参与固定相对
纯水对于HPLC的影响
高效液相色谱法（High Performance Liquid Chromatography HPLC）是一种有效可靠的技术，目前已成为许多实验室研究的重要工具。HPLC最常见的一个问题就是溶剂中的污染物对分析结果的影响。颗粒颗粒可以损坏泵和注射器。颗粒也可以堵塞色谱柱并且熔化它，这会导致回压增大
基于温度梯度的HPLC分析——温度梯度淋洗的HPLC方法
在近年来所开发的一系列液相色谱方法中，温度梯度淋洗方法有着独特的应用，尤其是在要求以纯水为流动相的色谱分析中。本文介绍了如何将已存在保留时间的模型发展成为温度梯度淋洗的HPLC方法。 在高效液相色谱（HPLC）的方法开发中，原则上都是采用反复试验法来建立的，实验室用户根据自己的经验来改变一
HPLC部分问题解答
1、除了流速外，还有哪些因素能引起压力改变? 改变流动相组成和温度;改变柱长、柱内径和填料粒度;柱突然阻塞压力升高(正常情况下其它条件不变柱压都是逐渐升高的)。2、什么是强溶剂、弱溶剂? 改变流动相的组成或溶剂溶剂强度就可以改变峰容量因子和保留时间。在一定条件下，减少保留时间或缩短分析时间的
HPLC中冲洗柱子的方法
如果样品中有盐的话，最好还是用（水：乙腈= 9：1）先冲洗一下，如果柱子里盐不冲洗干净的话，再用小极性的流动相冲柱子时，盐就会析出，影响色谱柱寿命。要是没有盐的话，就无所谓了，用甲醇 乙腈冲洗都行，冲洗到什么程度，主要看柱压是否已经回落，稳定下来了。尽可能将色谱柱贮存于100%有机溶剂（乙腈最好）中