单克隆抗体成功预防移植后器官排斥

美国杜克大学健康中心的研究人员报告说,在接受肾移植的灵长类动物身上进行测试时,一种人造抗体成功地防止了器官排斥。这一发现为新型单克隆抗体在人体临床试验取得进展扫清了道路。该研究30日在线发表在《科学·转化医学》杂志上。 研究人员称,目前预防器官排斥的药物总体上效果不错,但它们有很多副作用,如抑制免疫系统,使患者面临感染和器官损伤的风险,而且许多疗法会导致糖尿病和高血压等非免疫并发症。 研究人员此次重点研究了单克隆抗体AT-1501。它的设计目的是最大限度地减少血栓形成的风险。在接受过肾移植的灵长类动物研究中,AT-1501可防止排斥反应,且无需额外的免疫抑制药物,证实了其免疫抑制潜力。 在接受胰岛移植的动物中,单独使用AT-1501并不能实现一致的排斥反应控制,但与现有的免疫抑制剂联合使用却有效。胰岛移植中的联合疗法导致胰岛移植物均匀存活,而不会出现体重减轻及通常会出现的感染。 研究数据支持AT-1501作为一种安全......阅读全文

粪便移植,移植了什么?

  由美国凡德比特大学研究人员发表的论文《粪便移植,移植了什么》表明弄清楚粪便中的微生物种类及非微生物成分,或对粪便移植至关重要。研究发现粪便中含有细菌,病毒,真菌,古生菌,原生生物及食物代谢物。  人们很少会去考虑自己粪便中都含有些什么。但弄清楚粪便成分对粪便移植至关重要。粪便移植,顾名思义就是将

单克隆抗体

·         Tips and hints for the storage of antibodies (Synaptic Systems)·         Purification of IgG Using Protein A- or Protein G-Agarose(KPL)·    

外周血干细胞移植的移植问题

  1、收集的外周血干细胞可能混杂有肿瘤细胞;  2、移植物中存在大量T细胞,可能诱发严重GVHD ;  3、初步的结果表明,PBSCT急性GVHD的发生率与骨髓移植相似,但慢性GVHD为Allo—BMT的2-3倍;  4、重组细胞因子作为动员剂对供者的安全有待于观察。

外周血干细胞移植的移植优点

  费用低,效益好  造血及免疫功能恢复快,移植的费用/效益之比优于BMT。  不管是自体还是异体PBSCT,移植后的植活时间 (白细胞>1.0x109/L,中性粒细胞>0.5x109/L和血小板>20×109/L) 大都在2周左右,比BMT至少提早1周;如果在移植后加用G-CSF或GM-CSF,则

单克隆抗体培养—含有单克隆抗体的腹水制备

实验步骤材 料(带 V 项 目 见 附 录 1)裸 鼠 , 6〜8 周龄,无 特 殊 病 原(SPF),或者是同基因型宿主(注射小鼠-小鼠杂交瘤时)姥 鲛 焼(Pristane, 2,6,10,14-四甲基十五焼; Aldrich 公司提供)杂 交 瘤(单 元 1.3)添 加 10 mmol/L H

简述自体干细胞移植的移植流程

  首先,确认病人的外周血中没有引起疾病复发的细胞如白血病细胞、骨髓瘤细胞、淋巴瘤细胞等;  其次,对病人进行造血干细胞的动员,可以应用化疗加或不加集落刺激因子(G-CSF和或GM-CSF),动员造血干细胞到外周血来;  第三,对病人进行外周血干细胞的单采,并对之进行保存;  第四,对病人进行预处理

自体干细胞移植的移植步骤介绍

  自体干细胞移植主要分为两步,即自体干细胞的采集和干细胞的移植。  在临床上根据自体干细胞采集的方法不同分为骨髓干细胞移植和外周血干细胞移植。前者先在无菌条件下采集患者自体骨髓350~500ml,通过分离、纯化等过程,制成含有足够数量干细胞的细胞悬液;后者是给患者注射4-5天粒系集落刺激因子,以动

单克隆抗体技术

实验概要显微镜下观察血片或骨髓片,找出异常细胞。实验原理B淋巴细胞能够产生抗体,但在体外不能进行无限分裂;而骨髓瘤细胞可以在体外无限传代,但不能产生抗体。将这两种细胞融合后,用一特殊选择培养基(HAT)阻断正常细胞或自体融合细胞的DNA合成通路,而杂交瘤细胞可利用补救通路合成DNA得以生存,且既能产

单克隆抗体技术

实验原理  B淋巴细胞能够产生抗体,但在体外不能进行无限分裂;而骨髓瘤细胞可以在体外无限传代,但不能产生抗体。将这两种细胞融合后,用一特殊选择培养 基(HAT)阻断正常细胞或自体融合细胞的DNA合成通路,而杂交瘤细胞可利用补救通路合成DNA得以生存,且既能产生抗体,又能无限增殖,并以此生产抗

单克隆抗体技术

实验概要显微镜下观察血片或骨髓片,找出异常细胞。实验原理B淋巴细胞能够产生抗体,但在体外不能进行无限分裂;而骨髓瘤细胞可以在体外无限传代,但不能产生抗体。将这两种细胞融合后,用一特殊选择培养基(HAT)阻断正常细胞或自体融合细胞的DNA合成通路,而杂交瘤细胞可利用补救通路合成DNA得以生存,且既能产

单克隆抗体的纯化实验——单克隆抗体的纯化实验

1~5 ml/min 的速度上样于蛋白A-Sepharose柱,用Tris缓冲液洗柱子直至所有的未结合的蛋白都被洗脱,采用A280监测。 3.  依次用2~3倍柱床体积的柠檬酸缓冲液、乙酸缓冲液液以及甘氨酸·Cl缓冲液连续洗脱结合蛋白,洗脱下的蛋白直接接入装有中和缓冲液的管中,中和缓冲液的体积应为所

关于外周血干细胞移植的移植问题介绍

  1、收集的外周血干细胞可能混杂有肿瘤细胞;  2、移植物中存在大量T细胞,可能诱发严重GVHD ;  3、初步的结果表明,PBSCT急性GVHD的发生率与骨髓移植相似,但慢性GVHD为Allo—BMT的2-3倍;  4、重组细胞因子作为动员剂对供者的安全有待于观察。

定期移植法

定期移植法亦称传代培养保藏法,包括斜面培养、穿刺培养、液体培养等。是指将菌种接种于适宜的培养基中,最适条件下培养,待生长充分后,于4~6℃进行保存并间隔一定时间进行移植培养的菌种保藏方法。操作步骤如下: 1 培养基制备  器皿准备    培养基制备过程中所用的一些玻璃器皿,如三角瓶、试管、培养皿、烧

移植的分类

移植的分类是临床医学检验技士/技师/主管技师考试复习需要了解的检验基础知识,医学|教育网搜集整理了相关内容与考生分享,希望给予大家帮助! 移植的类型多种多样,可以从不同角度进行分类。例如根据移植物性质可分成生命器官移植和支架组织移植;根据植入部位可分成原位移植和异位移植。但免疫学分类主要是根据移植

定期移植法

定期移植法亦称传代培养保藏法,包括斜面培养、穿刺培养、液体培养等。是指将菌种接种于适宜的培养基中,最适条件下培养,待生长充分后,于4~6℃进行保存并间隔一定时间进行移植培养的菌种保藏方法。操作步骤如下: 1 培养基制备 器皿准备    培养基制备过程中所用的一些玻璃器皿,如三角瓶、试管、培养皿、烧

移植的类型

根据移植物的来源不同,将移植分为4种类型:(1)自体移植 自体移植是将自体的组织移植到自体的另一部位,此种移植若无感染都能成功。(2)同系移植 同系移植是遗传基因型完全相同或基本相同的个体间的移植。例如同卵双生之间的移植,或纯系动物间的移植。此种移植一般也都可成功。(3)同种(异体)移植 此种移植是

单克隆抗体的优点

(1)杂交瘤可以在体外“永久”地存活并传代,只要不发生细胞株的基因突变,就可以不断地生产高特异性、高均一性的抗体。(2)可以用相对不纯的抗原,获得大量高度特异的、均一的抗体。(3)由于可能得到“无限量”的均一性抗体,所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法,如IRMA和ELISA等。(4)由于单克

单克隆抗体技术简介

一种免疫学技术,将产生抗体的单个B淋巴细胞同骨髓肿瘤细胞进行细胞融合, 获得既能产生抗体, 又能无限增殖的杂种细胞,并以此生产抗体。是仅由一种类型的细胞制造出来的抗体,对应于多克隆抗体、多株抗体——由多种类型的细胞制造出来的一种抗体。

单克隆抗体制备

1. 免疫动物:三只Balb/c小鼠 2. 佐剂:首先用完全弗氏佐剂(CFA),后用不完全弗氏佐剂(IFA)。 3. 免疫原:蛋白或KLH偶联多肽。每次免疫使用50-100µg免疫原。 4. 免疫:用PBS稀释免疫原,然后与相应的佐剂1:1混合。抗原和佐剂完全混合形成稳定的乳剂,将该乳剂在小鼠双

单克隆抗体的定义

单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。通常采用杂交瘤技术来制备,杂交瘤(hybridoma)抗体技术是在细胞融合技术的基础上,将具有分泌特异性抗体能力的致敏B细胞和具有无限繁殖能力的骨髓瘤细胞融合为B细胞杂交瘤。用具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群,可制备针

单克隆抗体的概述

  单克隆抗体是由单一B细胞克隆产生的高度均一、仅针对某一特定抗原表位的抗体。[1]  它通常采用杂交瘤技术来制备,将具备这种特性的单个杂交瘤细胞培养成细胞群,从根本上解决了在抗体制备中长期存在的特异性和可重复性问题,可直接用于疾病的诊断、预防、治疗以及免疫机制的研究。

单克隆抗体的制备

实验方法原理使用聚二乙醇(PEG ) 将抗原免疫过的小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞(P3. 653 )进行融合。用 HAT 选择性培养基筛选杂合的克隆株(杂交瘤细胞)。融合后 10~14 天用 ELISA 对上清液进行筛査(ELISA 筛査方法必须在融合前就已掌握),然后对理想的杂交瘤细胞加以扩增、冷冻和

单克隆抗体的优点

  (1)杂交瘤可以在体外“永久”地存活并传代,只要不发生细胞株的基因突变,就可以不断地生产高特异性、高均一性的抗体。  (2)可以用相对不纯的抗原,获得大量高度特异的、均一的抗体。  (3)由于可能得到“无限量”的均一性抗体,所以适用于以标记抗体为特点的免疫学分析方法,如IRMA和ELISA等。 

单克隆抗体的简介

  1975年分子生物学家G.J.F.克勒和C.米尔斯坦在自然杂交技术的基础上,创建立杂交瘤技术,他们把可在体外培养和大量增殖的小鼠骨髓瘤细胞与经抗原免疫后的纯系小鼠B细胞融合,成为杂交细胞系,既具有瘤细胞易于在体外无限增殖的特性,又具有抗体形成细胞的合成和分泌特异性抗体的特点。将这种杂交瘤作单个细

什么是单克隆抗体

 (1)单克隆抗体的基本概念 抗体是由B淋巴细胞分化形成的浆细胞合成、分泌的。每一个B淋巴细胞在成熟的过程中通过随机重排只产生识别一个抗原的抗原受体基因。动物脾脏有上百万种不同的B淋巴细胞系,重排后具有不同基因不同的B淋巴细胞合成不同的抗体。当机体受抗原刺激时,抗原分子上的许多决定簇分别激活各个具有

单克隆抗体的定义

由单一克隆B细胞针对单一抗原表位产生的均一性的高特异性的抗体称为单克隆抗体。

单克隆抗体的概念

解决多克隆抗体特异性不高的理想方法是制备识别单一表位特异性的抗体。如果能获得仅针对单一表位的浆细胞克隆,并使其在体外扩增分泌抗体,就有可能获得单一表位特异性的抗体。然而,浆细胞在体外的寿命较短,难以培养。为克服这一缺点,Kohler和Milstein将可产生特异性抗体但短寿的B细胞与不产生抗体但长寿

单克隆抗体的制备

实验方法原理 使用聚二乙醇(PEG ) 将抗原免疫过的小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞(P3. 653 )进行融合。用 HAT 选择性培养基筛选杂合的克隆株(杂交瘤细胞)。融合后 10~14 天用 ELISA 对上清液进行筛査(ELISA 筛査方法必须在融合前就已掌握),然后对理想的杂交瘤细胞加

单克隆抗体的纯化

实验方法原理 葡萄球菌蛋白 A 可以结合数种哺乳类动物的免疫球蛋白。蛋白质 A-琼脂糖介质可以结合部分 IgM、大部分 IgGl 及几乎所有的 IgG2a、IgG2b 和 IgG3 MAb。实验材料 腹水(单克隆抗体)试剂、试剂盒 蛋白 A-琼脂糖 CL-4BTr1s 缓冲液 pH 8.6柠檬酸盐缓

单克隆抗体的制备

            实验方法原理 使用聚二乙醇(PEG ) 将抗原免疫过的小鼠的脾细胞与骨髓瘤细胞(P3. 653 )进行融合。用 HAT 选择性培养基筛选杂合的克隆株(杂交瘤细胞)。融合后 10~14 天用 ELISA 对上清液进行筛査(ELISA 筛