CHL(仓鼠肺细胞)培养教程

细胞名称:CHL(仓鼠肺细胞) 细胞别称:Chinese Hamster Lung 细胞货号:SNL-009 生长特性:贴壁 培养条件:DMEM+10%FBS+1%P/S 培养环境:空气,95%;二氧化碳(CO2),5%;37℃ 细胞简介:CHL细胞来源于1日龄雌性中国仓鼠肺组织,细胞自发永生,广泛应用于化学物质诱导的染色体畸变检测。 CHL细胞培养注意事项 该细胞贴壁比较弱,该细胞消化时间偏短,注意控制消化时间。 注意控制细胞密度,密度过高和过低都会影响细胞状态。密度过低时,细胞生长速度减慢;长时间高密度培养将导致细胞受损。建议细胞生长至80%密度时传代。 细胞密度过高时及时传代,避免培养基变黄导致细胞脱落或者状态变差。 细胞生长较快,注意每天观察培养基颜色及细胞密度,及时换液或传代。 传代时细胞容易聚集成团,注意尽量吹散细胞。......阅读全文

HPLC基础知识教程(十四)

  V.HPLC应用  一、样品测定  1.流动相比例调整:由于我国药品标准中没有规定柱的长度及填料的粒度,因此每次新开检新品种时几乎都须调整流动相(按经验,主峰一般应调至保留时间为6~15分钟为宜)。所以建议第一次检验时请少配流动相,以免浪费。弱电解质的流动相其重现性更不容易达到,请注意充分平衡柱

HPLC基础知识教程(十)

  一、基质(担体)  HPLC填料可以是陶瓷性质的无机物基质,也可以是有机聚合物基质。无机物基质主要是硅胶和氧化铝。无机物基质刚性大,在溶剂中不容易膨胀。有机聚合物基质主要有交联苯乙烯-二乙烯苯、聚甲基丙烯酸酯。有机聚合物基质刚性小、易压缩,溶剂或溶质容易渗入有机基质中,导致填料颗粒膨胀,结果减少

HPLC基础知识教程(十三)

  3.流动相的pH值  采用反相色谱法分离弱酸(3≤pKa≤7)或弱碱(7≤pKa≤8)样品时,通过调节流动相的pH值,以抑制样品组分的解离,增加组分在固定相上的保留,并改善峰形的技术称为反相离子抑制技术。对于弱酸,流动相的pH值越小,组分的k值越大,当pH值远远小于弱酸的pKa值时,弱酸主要以分

液氮罐使用解说教程

在您拿到液氮罐之后,请注意以下注意事项,1,液氮罐使用之前,应先充满几升液氮用于冷却,待冷却成功之后,再行充满,直接充满的话,液氮罐内温度太高,里面存在大量液氮汽化之后形成的氮气,造成液氮没有完全充满。2,在您充满液氮罐之后,第一个礼拜内,应该每天用液氮尺,检查一下液氮罐内液氮剩余量,防止液氮罐因物

HPLC基础知识教程(四)

  III.HPLC系统  HPLC系统一般由输液泵、进样器、色谱柱、检测器、数据记录及处理装置等组成。其中输液泵、色谱柱、检测器是关键部件。有的仪器还有梯度洗脱装置、在线脱气机、自动进样器、预柱或保护柱、柱温控制器等,现代HPLC仪还有微机控制系统,进行自动化仪器控制和数据处理。制备型HPLC仪还

HPLC基础知识教程(九)

  5)、池体积:除制备色谱外,大多数HPLC检测器的池体积都小于10µ;l。在使用细管径柱时,池体积应减少到1~2µ;l甚至更低,不然检测系统带来的峰扩张问题就会很严重。而且这时池体、检测器与色谱柱的连接、接头等都要精心设计,否则会严重影响柱效和灵敏度。  3.紫外检测器(ul

HPLC基础知识教程(一)

  I.概论  一、液相色谱理论发展简况  色谱法的分离原理是:溶于流动相(mobilephase)中的各组分经过固定相时,由于与固定相(stationaryphase)发生作用(吸附、分配、离子吸引、排阻、亲和)的大小、强弱不同,在固定相中滞留时间不同,从而先后从固定相中流出。又称为色层法、层析法

HPLC基础知识教程(五)

   2.泵的使用和维护注意事项  为了延长泵的使用寿命和维持其输液的稳定性,必须按照下列注意事项进行操作:  ①、防止任何固体微粒进入泵体,因为尘埃或其它任何杂质微粒都会磨损柱塞、密封环、缸体和单向阀,因此应预先除去流动相中的任何固体微粒。流动相最好在玻璃容器内蒸馏,而常用的方法是滤过,可采用Mi

生物信息学教程

Sequence - Evolution - FunctionComputational Approaches in Comparative GenomicsbyEugene V. KooninNational Center for Biotechnology Information, Bethes

HPLC基础知识教程(六)

  1.柱的构造  色谱柱由柱管、压帽、卡套(密封环)、筛板(滤片)、接头、螺丝等组成。柱管多用不锈钢制成,压力不高于70kg/cm2时,也可采用厚壁玻璃或石英管,管内壁要求有很高的光洁度。为提高柱效,减小管壁效应,不锈钢柱内壁多经过抛光。也有人在不锈钢柱内壁涂敷氟塑料以提高内壁的光洁度,其效果与抛

HPLC基础知识教程(二)

  II.基本概念和理论  一、基本概念和术语  1.色谱图和峰参数  色谱图(chromatogram)——样品流经色谱柱和检测器,所得到的信号-时间曲线,又称色谱流出曲线(elutionprofile)。  基线(baseline)——经流动相冲洗,柱与流动相达到平衡后,检测器测出一段时间的流出

HPLC基础知识教程(三)

  4.相平衡参数  分配系数(distributioncoefficient,K)——在一定温度下,化合物在两相间达到分配平衡时,在固定相与流动相中的浓度之比。K=。  分配系数与组分、流动相和固定相的热力学性质有关,也与温度、压力有关。在不同的色谱分离机制中,K有不同的概念:吸附色谱法为吸附系数

使用NCBI设计引物的教程

引物设计是PCR实验的关键步骤之一。正确的引物设计能有效提高实验的成功率。NCBI提供了一些强大的工具来辅助引物设计,本文将详细介绍如何使用NCBI工具设计引物。一、了解NCBI标记类别在NCBI中,常见的标记符号通常以两个字母开头,后接一组数字。这些符号表示不同类型的序列,对于选择正确的模板序列至

关于肺组织细胞增多症的肺功能检查介绍

  肺朗格汉斯组织细胞增生症的肺功能改变与肺病变受累范围有关,可以是阻塞性、限制性和混合性通气功能障碍。有10%~15%的患者肺功能是正常的,尽管胸部X线表现已发现异常。较为常见的改变是肺活量(VC)降低而残气量(RV)增加,因此肺总量是正常的,而RV/TLC比值是增加的,这种肺功能改变与患者肺囊性

吸烟能改变肺细胞引发癌症

   吸烟会导致肺细胞的表观遗传变化,从而使人们患上癌症。现在,研究人员观察到了这些变化是如何随着时间的推移而发生的。  近日,刊登在《癌细胞》杂志上的美国约翰斯·霍普金斯大学医学院的调查报告表明,将培养皿中健康的肺细胞暴露于香烟烟雾冷凝液中10至15个月——相当于人吸烟20至30年,积累的表观遗传

肺巨噬细胞的分布和功能

肺巨噬细胞(pulmonarymacrophage)由单核细胞分化而来,广泛分布在肺间质内,在细支气管以下的管道周围和肺泡隔内较多。有的巨噬细胞游走入肺泡腔内,称肺泡巨噬细胞(alveolarmacrophage)。肺巨噬细胞的吞噬、免疫和分泌作用都十分活跃,有重要防御功能。

简述肺巨噬细胞的基本作用

  吸入空气中的尘粒、细菌等异物进入肺泡和肺间质,多被巨噬细胞吞噬清除,故细胞胞质内常见尘粒、次级溶酶体及吞噬体等。胞质内含大量尘粒的肺巨噬细胞又称尘细胞(dust cell)。肺巨噬细胞还可吞噬衰老的红细胞,在心力衰竭患者出现肺瘀血时,大量红细胞从毛细血管溢出,被巨噬细胞吞噬,胞质内含许多血红蛋白

常见细胞系细胞培养基使用选择建议

选择培养基没有一定的标准,有几点建议可供参考: (1)建立某种细胞株所用的培养基应该是培养这种细胞首选的培养基。可以查阅参考文献,或在购买细胞株时咨询。 (2)其它实验室惯用的培养基不妨一试,许多培养基可以适合多种细胞。 (3)根据细胞株的特点、实验的需要来选择培养基。如小鼠细胞株

细胞培养培养基

  绝大多数培养基是建立在平衡盐溶液(BSS)基础上,添加了氨基酸、维生素和其它与血清中浓度相似的营养物质。最广泛应用的培养基是Eearle`s MEM 的混合物,其中含有13种必须氨基酸、8种维生素。而Ham`s F12 也包括非必须氨基酸,维生素的范围亦很广,另外常规含有无机盐和代谢添加剂(例如

哺乳动物细胞基因突变试验

  哺乳动物体外培养细胞的基因正向突变试验常用的测试系统有小鼠淋巴瘤L5178Y细胞,中国仓鼠肺V79细胞和卵巢CHO细胞的三个基因位点的突变,即次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)、胸苷激酶(TK)及Na+/K+ATP酶(OUA)位点。HGRPT和Na+/K+ATP酶位点突变可用于上述三种细胞,O

细胞培养——细胞保藏

Working Cell Bank (Contributed by Nanci Donacki)Provides detailed protocol for establishing a working cell bank    Master Cell Bank (Contributed by Na

细胞培养

细胞培养是一种常用的实验室技术,其中原核或真核细胞在受控条件下生长。大规模哺乳动物细胞培养被广泛用于生物技术中,特别是用于生产疫苗,蛋白质,酶,抗体和激素。细胞培养还用于许多研究**域,特别是在制药**域,其中将细胞用作研究许多疾病(例如癌症或心脏病)的模型。细胞用于靶标鉴定和验证,基于细胞的测定法

关于致突变试验—哺乳动物细胞基因突变试验的介绍

  哺乳动物细胞基因突变试验—哺乳动物体外培养细胞的基因正向突变试验常用的测试系统有小鼠淋巴瘤L5178Y细胞,中国仓鼠肺V79细胞和卵巢CHO细胞的三个基因位点的突变,即次黄嘌呤磷酸核糖转移酶(HGPRT)、胸苷激酶(TK)及Na+/K+ATP酶(OUA)位点。HGRPT和Na+/K+ATP酶位点

仓鼠铁蛋白(FE)ELISA试剂盒操作步骤

仓鼠铁蛋白(FE)ELISA试剂盒操作步骤标准品的加样:设置标准品孔和样本孔,标准品孔各加不同浓度的标准品50μL。加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加

全球唯一基因工程仓鼠平台落户石家庄

  基因工程是生物工程的一个重要分支,它和细胞工程、酶工程、蛋白质工程和微生物工程共同组成了生物工程。所谓基因工程(genetic engineering)是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术。是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内,使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作。  近日,

全球唯一基因工程仓鼠平台落户石家庄

  基因工程是生物工程的一个重要分支,它和细胞工程、酶工程、蛋白质工程和微生物工程共同组成了生物工程。所谓基因工程(genetic engineering)是在分子水平上对基因进行操作的复杂技术。是将外源基因通过体外重组后导入受体细胞内,使这个基因能在受体细胞内复制、转录、翻译表达的操作。  近日,

巨噬细胞培养常用细胞培养器皿介绍

常用细胞培养器皿有培养瓶、培养板、培养皿等。常准备量是使用量的三倍。器皿应选择透明度好,无毒,利于细胞粘附和生长的材料,常用一次性聚苯乙烯材料制品或中性硬度玻璃制品。常用的器皿有下面几种。巨噬细胞1、液体储存瓶:用于储存各种配制好的培养液、血清等液体,常用规格有500ml、250ml、100ml等几

特殊细胞培养实验_单细胞分离培养法

实验方法原理从理论上说各种培养细胞都可用以进行克隆培养。但实际上,初代培养细胞和有限细胞系(二倍体细胞)比较困难。无限细胞系、转化细胞系和肿瘤细胞等则比较容易。其原因是,当体内任何细胞被置于体外培养后,对培养环境都有一个适应过程。期间细胞对营养液具有同化作用,即从培养液中摄取营养的同时,也向培养液排

小鼠肝细胞培养实验——细胞培养技术

实验方法原理直接从生物体内获取组织细胞进行的首次培养称为原代细胞培养。原代培养是建立各种细胞系的第一步,是从事培养工作的人员应熟悉和掌握的最基本的技术。根据培养方法不同分为组织块培养法和单层细胞培养法。实验材料小鼠试剂、试剂盒DMEMDMEM胰酶PBS仪器、耗材饭盒纱布小剪子小镊子大镊子大烧杯平皿研

细胞培养细胞培养的具体步骤

一、细胞复苏将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移入15ml离心管中,加入10ml预热的DMEM完全培养基,轻轻吹匀,离心,2000rpmX2min,弃上清液。加入10ml DMEM培养基清洗,弃上清液。加入10ml DMEM完全培养基,轻轻吹打,接种于10cm盘中,在含5