目前国内饲用酶分析测定的技术问题
(1)酶活力定义混乱除了淀粉酶、糖化酶、蛋白酶、脂肪酶之外,其他酶种的活力检测方法目前为止还没有国家标准或行业通用标准。绝大多数企业的酶活定义都是本企业制定的,各企业的定义不同,单位酶活的含义也不同,有的可以相差200倍。(2)酶反应温度和pH值 由于定义不同,规定的适宜的反应温度和pH值也不同最终也就影响了测定结果。(3)不注意酶作用底物的选择 目前采用的酶分析方法,都是通过测定由酶分解产生的小分子产物来计算样品的酶活性。由于各企业选用的酶作用底物不同,底物中低聚合小分子含量也不同。聚合度低的小分子容易被降解,在底物过量的情况下,酶真正的作用底物并不是大分子多聚物,而是低聚糖(或多肽),造成较大差异。影响了结果的准确性。......阅读全文
脂肪酶特异折叠酶的作用
目前研究最为广泛的是脂肪酶特异折叠酶(lipase specific foldase,LIFs),此类酶多存在于革兰氏阴性菌中辅助相应的脂肪酶进行二级结构的折叠,通过降低折叠过程中的能障与构象改变为靶蛋白的正确折叠提供必要的空间立体信息而帮助其活性构象的形成。研究证明,脂肪酶在无LIFs存在下可进行
酶免疫技术抗体的酶标记方法
用于酶免疫技术的酶须具有下列特性:有高度的活性和敏感性;在室温下稳定;反应产物易于显现;能商品化生产。目前酶免疫技术检测中常用的酶为辣根过氧化物酶(horseradish peroxidase,HRP)和碱性磷酸酶(AP),其次还有葡萄糖氧化酶、β-半乳糖苷酶、溶菌酶和苹果酸脱氢酶等。由于辣根过氧化
乳酸脱氢酶同工酶测定
乳酸脱氢酶同工酶的测定方法有电泳法、离子交换柱层析法、免疫法、抑制法和酶切法
关于凝结酶实验的凝结酶介绍
血浆凝结酶是能使含有肝素等抗凝剂的人或兔血浆发生凝固的酶类物质,致病株大多数能产生,是鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标。传统豆腐加工一般采用盐类凝固剂和酸凝固剂,很少使用酶凝固剂。但盐类凝固剂和酸凝固剂制得的产品存在一些问题,例如用盐卤制作的豆腐具有极佳的风味,但是豆腐持水性差,而且产品放置时间
酶的酶活和质量如何评判
NSP(木聚糖,β-葡聚糖,纤维素)的检测方法有三类:1,染色底物显色法,适用于测定饲料中的酶活,主要是内切酶活,楼主介绍的,中国鲜为人知;2,DNS还原糖显色法,适用于测定酶制剂产品中的酶活,外切酶活和内切酶活的混合结果,外切酶活站多数,中国常用;3.黏度法,适宜评估可溶性NSP酶的效果,中国不常
链酶蛋白酶的配制方法
自消化可消除DNA酶和RNA酶的污染,经自消化的链酶蛋白酶的配制方法如下:把该酶的粉末溶解于10mmol./l Tris?HCl(pH7.5)、10mmol/l NaCl中,配成20mg/ml浓度,于37℃温育1h。经消化的链霉蛋白酶分装成小份放在密封试管中,保存-20℃。
单胺氧化酶同工酶介绍
单胺氧化酶同工酶是一种细胞外酶,以磷酸吡哆醛为辅酶。多分布在肝、肾等组织的线粒体中,其分布肝>心>肾>脑>肺>骨骼肌,血小板和胎盘中也含有MAO,其同工酶有三种,电泳时从阳极到阴极分别是MAO-Ⅰ、MAO-Ⅱ和MAO-Ⅲ,有两个亚单位MAO-A和MAO-B。
生物酶学基础固定化酶
在合成工艺性化过程中,固定化酶在可操作性和经济性两方面都具备巨大的优势。 除了使用方便,固定化酶拥有分离简单和可重复使用两大最主要的优点。反应完毕可以通过过滤等常规手段与产品分离,大大降低产品的下游处理成本,而且可以高效应用于各种类型的反应器,实现生产连续化和自动化,提升反应效率。另外,固定化酶的可
植酸酶的酶学性质介绍
和其他酶类一样,植酸酶活力受温度、环境pH、激活剂、抑制剂、作用时间、底物及产物浓度等多种因素的影响。根据最适pH值的不同,Oh等(2004)将植酸酶(磷酸酯酶)分为两个亚类:酸性植酸酶和碱性植酸酶。饲料工业中常用的是酸性植酸酶(也称作组氨酸酸性植酸酶)。这种植酸酶催化活性较强,有最适的酸性pH值(
人ATP酶(ATPase)酶联免疫分析
人ATP酶(ATPase)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定人血清,血浆及相关液体样本中ATP酶(ATPase)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人ATP酶(ATPase)水平。用纯化的人ATP酶(ATPase)抗体包被微孔板,
可以DNA结合的酶聚合酶
聚合酶:聚合酶是从核苷三磷酸合成多核苷酸链的酶。它们通过向链上存在的先前核苷酸的3'-OH添加核苷酸起作用。因此,所有聚合酶都以5' - 3'方向起作用。DNA复制需要DNA依赖的DNA聚合酶,实现DNA序列的完美拷贝。有些DNA聚合酶具有校对功能,能够检测含氮碱基之间的错配
胰蛋白酶及其系列酶制备
酶是细胞产生的以蛋白质为主要成分的生物催化剂,与化学催化剂相比较,具有作用条件温和、反应专一性强、反应副产物少等优点,因而广泛应用于医药、化工、食品、日化、农业、饲料、环保等领域,应用种类及用量均逐年递增。例如蛋白酶,应用于医药工业中,作为生化药物促进食物蛋白质消化;应用在食品工业中,水解蛋白质成肤
植酸酶的酶学性质研究
植酸酶是催化植酸及其盐类水解成肌醇和磷酸的一类酶的总称[1]。添加植酸酶能够显著提高植物性饲料中磷的利用率,减少饲料中无机磷的添加量以及动物粪便中无机磷的排出,降低植酸磷的抗营养作用,促进动物生长发育,减轻环境的磷污染,提高畜牧生产和生态效益[2]。随着饲料工业的发展,植酸酶作为一种新型的饲料添加剂
生物酶学基础凝固酶简介
凝固酶是实验室鉴定葡萄球菌致病性的重要试验。致病性葡萄球菌可产生两种凝固酶,一种是与细胞壁结合的凝聚因子,称结合凝固酶,它直接作用于血浆中纤维蛋白质,使发生沉淀,保卫与细菌外面而凝聚成块;另一种凝固酶是分泌至菌体外,成为游离凝固酶,它能使凝血酶原变成凝血酶类产物,使纤维蛋白原变为纤维蛋白,从而使血浆
异淀粉酶的酶学特性
微生物来源的异淀粉酶为诱导型胞外酶。酵母、细菌和某些放线菌均能产生异淀粉酶,但不同来源的异淀粉酶对于底物作用的专一性有所不同,对于各种不同聚合度的支链淀粉具有不同的分解能力。酶作用的最适温度和最适pH环境及金属离子对酶的影响都有差异。一般而言,酵母异淀粉酶最适pH为6~6.8,最适温度为20~25℃
固定化酶固定化酶与水溶性酶相比的优缺点
优点:①固定化酶可重复使用,使酶的使用效率提高、使用成本降低。②固定化酶极易与反应体系分离,简化了提纯工艺,而且产品收率高、质量好。③在多数情况下,酶经固定化后稳定性得到提高。④固定化酶的催化反应过程更易控制。⑤固定化酶具有一定的机械强度,可以用搅拌或装柱的方式作用于底物溶液,便于酶催化反应的连续化
酶免疫技术中酶和酶作用底物是怎么样的呢?
酶和酶作用底物 (一)酶的要求: 一个酶蛋白分子每分钟可催化10 3 ~10 4 个底物分子转变成有色产物。用于标记的酶应符合: 1.酶的活性要强,催化反应的转化率高,纯度高。 2.酶催化底物后产生的产物易于判断或测量,方法简单易行、敏感和重复性好。 3.作用专一性强 ,酶活性不受样品
双酶切反应酶活性分析及双酶切建议缓冲液
同步双酶切是一种省时省力的常用方法。选择能让两种酶同时作用的最佳缓冲液是非常重要的一步。NEB每一种酶都随酶提供相应的最佳 NEBuffer,以保证100%的酶活性。NEBuffer的组成及内切酶在不同缓冲液中的活性见《内切酶在不同缓冲液里的活性表》及每支酶的说明书。能在最大程度上保证两种酶活性
可以DNA结合的酶DNA连接酶
DNA连接酶:是能够使用来自ATP或NAD的化学能将先前切割或断裂的DNA链聚集在一起的酶。连接酶在DNA滞后链复制中特别重要,因为它们将冈崎碎片组合成DNA链。连接酶在DNA修复和基因重组中也发挥重要作用。
酶与酶技术的开发与应用
现代研究表明,酶与酶技术与环境保护的关系十分密切。表现在三个方面。第一,在产品加工过程中用酶来替代化学品(为生物过程代替化学过程反应温和)可以降低生产活动中的污染水平,有利于实现工艺过程生态化或无废生产,真正实现清洁生产的目标;第二,酶作为生物催化剂,只对产品内容起作用,使产品在过程中产生的污染大大
有关固定化酶技术酶的定向介绍
1、共价固定法 选择性地利用酶分子表面远离活性位点的特定稀有基团(如巯基) 进行反应,使该基团与载体上另一基团共价交联来固定酶蛋白,使其活性中心朝向溶液方向,以达到控制其空间取向的目的。 2、氨基酸置换法 利用基因定点突变技术在蛋白质分子表面合适位置置换一个氨基酸分子,通过该氨基酸残基特殊
蛋白酶的按酶的来源分类
按酶的来源可以分为动物蛋白酶、植物蛋白酶、微生物蛋白酶。
免疫酶技术中常用的酶底物系统
各种免疫酶技术,最终都是以某种显色反应而揭示待测物质来进行定性和定量分析。不同酶要选择相应的底物,见下表。免疫酶技术中常用的酶-底物系统酶底物显色反应测定波长/nm辣根过氧化物酶二氨基联苯胺深褐色沉淀5-氨基水杨酸棕色449邻苯二胺橘红色492/460邻联甲苯胺蓝色4254-硝基酚磷酸黄色400碱性
环保用酶与酶技术的研究方向
环保用酶与酶技术是国内研究之前沿领域,是一项系统的研究工程。本项目技术开发、主要运用目前国内成熟的酶发酵工艺和提炼工艺生物下游技术。生产低成本、高活性环保用酶和酶固定化载体材料的选取以及酶反应器的生产开发。 本项目开发的重点在于酶与酶技术应用于废水处理的产品开发,将多种适用与废水处理的酶富集于反应器
木瓜蛋白酶的酶活测定
一、基本原理 木瓜蛋白酶能使N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯(底物)水解而释出N-苯甲酰-L-精氨酸,其释出量可用氢氧化钠液滴定,以此确定酶活力。 酶活单位 在25℃下,每分钟内能催化分解1umol底物的酶量,称为1单位。 二、试液制备 1、底物溶液:准确称取N-苯甲酰-L-精氨酸乙酯盐酸盐
有关固定化酶技术酶的定向介绍
1、共价固定法 选择性地利用酶分子表面远离活性位点的特定稀有基团(如巯基) 进行反应,使该基团与载体上另一基团共价交联来固定酶蛋白,使其活性中心朝向溶液方向,以达到控制其空间取向的目的。 2、氨基酸置换法 利用基因定点突变技术在蛋白质分子表面合适位置置换一个氨基酸分子,通过该氨基酸残基特殊
腺苷三磷酸酶(ATP酶)的简介
ATP是三磷酸腺苷的英文缩写符号,它是各种活细胞内普遍存在的一种高能磷酸化合物。高能磷酸化合物是指水解时释放的能量在20.92kJ/mol(千焦每摩尔)以上的磷酸化合物,ATP水解时释放的能量高达30.54kJ/mol。ATP的分子式可以简写成A-P~P~P。简式中的A代表腺苷,P代表磷酸基团,
精氨酸酶的酶活性单位定义
酶活性单位定义:在pH值9.5,37℃、1min内转换1.0μmol L-精氨酸成为L-鸟氨酸和尿素的酶量为一个活力单位。在有尿素循环(urea cycle)的人和哺乳动物体内才存在精氨酸酶,它的作用是体内尿素从精氨酸上水解下来,并生成L-鸟氨酸,这反应通常发生在肝脏细胞的胞液中。
生物酶学基础蛋白酶简介
水解蛋白质肽键的一类酶的总称。按其水解多肽的方式,可以将其分为内肽酶和外肽酶两类。内肽酶将蛋白质分子内部切断,形成分子量较小的月示和胨。外肽酶从蛋白质分子的游离氨基或羧基的末端逐个将肽键水解,而游离出氨基酸,前者为氨基肽酶后者为羧基肽酶。按其活性中心和最适pH值,又可将蛋白酶分为丝氨酸蛋白酶、巯基蛋