关于基本培养基的基本内容介绍
基本培养基：仅能满足微生物野生型菌株生长需要的培养基，称为基本培养基（minimal medium,MM），有时用符号“[ － ]”来表示。不同微生物的基本培养基是不同的，基本培养基又称无机盐培养基。 一、基本培养基的配方： 蒸馏水1L 葡萄糖 0.5% 硝酸铵 1.0 g/L 磷酸二氢钾 0.5g/L 磷酸氢二钠 1.5g/L 氯化钠 1.0g/L 七水硫酸镁 0.2g/L （最后放） 调PH 7.2 二、基本培养基的注意事项：在基本培养基中加入抗生素，野生型菌株被杀死，营养缺陷型不能在基本培养基中生长而被保留下来。......阅读全文
毕赤酵母表达（pichia－pastoris－expression－）实验手册（4）
三．主要试验环节的操作3.1 酵母菌株的分离纯化接种GS115于5ml YPD液体培养基，30℃，200rpm振荡过夜，涂布 YPD平板，30℃培养48 小时，用 YNB基本培养基和含His的补充培养基作点种分离纯化，挑选在补充培养基生上生长而在基本培养基上不生长的单菌落划YPD平板，4℃保存。3.
光照培养箱深入研究小麦籽粒形成
小麦籽粒建成是个复杂的生理过程,涉及源库的功能与互助,并且受内源激素的控制。为明确蔗糖对穗粒数的实际调节作用,需要通过光照培养箱改变碳物质向麦穗的供应来观察穗粒数的变化。然而在田间条件下,研究蔗糖对穗粒数的调节作用是很困难的,因为不能有效控制蔗糖向麦穗的供给。 取回植株后,去掉叶片,保留旗叶和各叶片
尿液标本接种实验
实验方法原理尿路感染是一种比较常见的疾病，是大量微生物在尿道生长繁殖而引起的炎性病变，尤其在妇女及儿童中更为常见，临床上常采用尿细菌培养鉴定及药敏检测的方式对尿路感染进行诊断，但治疗时间长，不利于患者及时接受治疗。而尿液细菌直接涂片镜检的检测时间短且简单可行，得出结果迅速准确，根据菌体形态、染色等对
自然光照培养箱的制作和脱毒苗的应用
为充分利用每个地区优越的气候资源，加速马铃薯脱毒试管苗培养和降低成本而修建的34m2自然光照培养箱，根据不同季节，开关不同数量玻璃窗进行人工调节，不需要安装价高耗能的空调，室温即可满足脱毒试管苗生长之需.从培样温度不同阶段的控制。同时也不需要智能光照培养箱类似的实验室精密培养箱的应用。
酵母人工染色体标记基因的介绍
在 YAC载体中最常用的是 pYAC4 。由于酵母的染色体是线状的,因此其在工作状态也是线状的。但是,为了方便制备YAC载体, YAC 载体以环状的方式存在,并增加了普通大肠杆菌质粒载体的复制元件和选择标记,以便保存和增殖。 1、复制元件 YAC 载体的复制元件是其核心组成成分,其在酵母中复
按成分划分的三种培养基的定义,特点和用途
1、基础培养基：在一定条件下含有某类微生物生长繁殖所需的基本营养物质的培养基，也称为基本培养基。2、加富培养基：在普通培养基（如肉汤蛋白胨培养基）中加入某些特殊营养物质制成的一类营养丰富的培养基。用来培养营养要求比较苛刻的异养型微生物。这些特殊营养物质包括血液、血清、酵母浸膏、动植物组织液等。根据待
病毒包装技术2——慢病毒生产及使用操作手册
锐赛小课堂0625-107 一、实验流程 制备慢病毒表达质粒及其辅助载体，四个质粒共转染293T细胞，转染后6h更换为完全培养基，培养48和72h后，分别收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液，病毒上清液通过超离心浓缩病毒。 二、实验材料 慢病毒载体包装系统为四质粒系统， 组成为
病毒包装技术——慢病毒生产及使用操作手册
一、实验流程制备慢病毒表达质粒及其辅助载体，四个质粒共转染293T细胞，转染后6h更换为完全培养基，培养48和72h后，分别收集富含慢病毒颗粒的细胞上清液，病毒上清液通过超离心浓缩病毒。二、实验材料慢病毒载体包装系统为四质粒系统， 组成为Gag/pol、vsvg、rev及pLenti-X-EGFP表
微生物突变的主要类型
为适应不断变化的外界环境，微生物的各种性状都可能发生突变。按突变体的表型特征不同，可将突变分为以下几种主要类型：形态突变型当外界环境条件改变时，微生物的形态很容易受其影响而发生突变。如炭疽杆菌在正常培养基中生长时，菌体粗大，两端平截或凹陷，排列似竹节状，但在含有低浓度青霉素的培养基中生长时，可发生形
关于人工染色体克隆载体的介绍
人工染色体克隆载体实际上是一种穿梭克隆载体,含有质粒克隆载体所必备的第一受体(大肠杆菌)源质粒复制起始位点,还含有第二受体(如酵母菌)染色体DNA着丝点、端粒和复制起始位点的序列,以及合适的选择标记基因。这样的克隆载体在第一受体细胞内可以按质粒复制形式进行高拷贝复制,在体外与目的DNA片段重组后
细菌的接合作用实验
实验方法原理 本实验采用的供体菌是大肠杆菌野生型 Hfr 菌株，对链霉素呈敏感性（Str3），受体菌为大肠杆菌营养块陷型突变体 （Thr-Leu-Thi-），需要苏氨酸，亮氨酸和硫胺素，对链霉索呈抗性 （Str3）。短期接合配对以后，在含有链霉素和硫胺素的基本培养基上只能分离到苏氨酸和亮
农杆菌介导的植物遗传转化
实验概要以烟草叶片为材料，与对数生长期的带有外源基因的农杆菌共培养，遗传转化烟草叶片，筛选抗性再生植株。掌握共培养过程关键技术环节及转基因植株的筛选。主要试剂70%乙醇0.1% HgCl2无菌水卡那霉素(kan)羧苄青霉素(Cb)培养基：LB培养基100ml；MS 盐溶液(pH 7.0)100ml，
蛋白质印记技术(Westernblotting－technique)
一、 概 述 原理 Western-blotting印记是将蛋白质经分离后从凝胶转移到固相支持物上，然后用特异性的抗体进行检测。 二、 材料和方法 (一) 材料 1． 质粒 pW425t+SO7 2. 宿主菌菌株 E.coli X51，-86℃保存 3. 培养基 LB基本
农杆菌介导的植物遗传转化
农杆菌介导的植物 遗传转化 【目的】：学习和掌握共培养过程关键技术环节及转基因植株的筛选。 【要求】：以烟草叶片为材料，与对数生长期的带有外源基因的农杆菌共培养，遗传转化烟草叶片，筛选抗性再生植株。 【内容】：1、烟草无菌苗的准备 2、带有外源基因农杆菌的培养 3、烟草叶片与对
细菌接合与基因定位———中断杂交
实验方法原理 在大肠杆菌细胞内,F因子与染色体DNA之间的交换可使F因子插入到宿主细胞的染色体DNA中。带有一个整合F因子的细胞称为高频重组(Hfr)细胞。不同的Hfr菌株中F因子的整合的位置不尽相同。在Hfr细菌和F-接合中,Hfr细胞染色体可以进入F-细胞,发生重组。Hfr细菌中染色体的转移从F
农杆菌介导的植物遗传转化
农杆菌介导的植物遗传转化 【目的】：学习和掌握共培养过程关键技术环节及转基因植株的筛选。 【要求】：以烟草叶片为材料，与对数生长期的带有外源基因的农杆菌共培养，遗传转化烟草叶片，筛选抗性再生植株。 【内容】：1、烟草无菌苗的准备 2、带有外源基因农杆菌的培养
秋海棠组培快繁
一、植物竹节秋海棠（B.President－carnot）二、材料类别 叶片、叶柄、茎段三、培养条件以MS为基本培养基。诱导愈伤组织培养基：（1）MS＋BA3——5mg／L（单位下同）＋NAA0.1——0．5。丛生芽增殖培养基。（2）MS＋BA1．0＋NAA0.1。（3）MS十BA0.5十NAA0.
根癌农杆菌介导的植物转化－叶盘转化法
一、原理以根癌农杆菌介导的遗传转化是目前最有效的途径之一。根癌农杆菌对植物释放的化学物质产生趋化反应，向植物受伤组织集中。经共培养后，受伤部位的化学诱导物透过农杆菌的细胞膜使Ti质粒上的Vir基因活化。Vir基因产物使Ti质粒上的T－DNA进入植物细胞，并整合到植物核基因组中。插入在T－DNA左右边
细菌接合与基因定位———中断杂交
实验方法原理在大肠杆菌细胞内,F因子与染色体DNA之间的交换可使F因子插入到宿主细胞的染色体DNA中。带有一个整合F因子的细胞称为高频重组(Hfr)细胞。不同的Hfr菌株中F因子的整合的位置不尽相同。在Hfr细菌和F-接合中,Hfr细胞染色体可以进入F-细胞,发生重组。Hfr细菌中染色体的转移从F因
制备体外剪接反应用HeLa细胞核和胞质S100提取物实验
实验方法原理 胞核提取物可以用于前体 mRNA 的剪接，S100 提取物中虽然包括许多剪接因子，但它不具有剪接活性，因为它只含有剪接所必需的部分 SR 蛋白，不过该提取物中补充一种或多种 SR 蛋白后就可以进行有效的剪接。
用噬菌粒载体制备单链DNA
实验方法原理 噬菌粒巧妙地组合了质粒和丝状噬菌体的特征。除了基本特征外，这些质粒通常是高拷贝数的，并带有一个修饰后的丝状噬菌体的主要基因间区。这个区域 ( 野生型为 508 bp)不表达蛋白，但含有全部的顺式作用序列，该作用是病毒 DNA 合成起始和结束及噬菌体颗粒的形态发生必不可少的。实验材料
用噬菌粒载体制备单链DNA
实验方法原理 噬菌粒巧妙地组合了质粒和丝状噬菌体的特征。除了基本特征外，这些质粒通常是高拷贝数的，并带有一个修饰后的丝状噬菌体的主要基因间区。这个区域 ( 野生型为 508 bp)不表达蛋白，但含有全部的顺式作用序列，该作用是病毒 DNA
制备体外剪接反应用HeLa细胞核和胞质S100提取物实验
实验方法原理 胞核提取物可以用于前体 mRNA 的剪接，S100 提取物中虽然包括许多剪接因子，但它不具有剪接活性，因为它只含有剪接所必需的部分 SR 蛋白，不过该提取物中补充一种或多种 SR 蛋白后就可以进行有效的剪接。实验材料 HeLa 细胞试剂、试剂盒 DTT苯甲基磺酰氟PBS缓冲液仪器、耗材
微生物实验培养基配制方法
1.牛肉膏蛋白胨培养基（用于细菌培养） 牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，水1000mL，pH7.4～7.6。 2.高氏1号培养基(用于放线菌培养) 可溶性淀粉20g，KNO31g，NaCl 0.5g，K2HPO4•3H2O 0.5g，MgSO4•7H2O0.5g，FeSO4•7H
常用的微生物培养基及配制方法
1.牛肉膏蛋白胨培养基（用于细菌培养） 牛肉膏3g，蛋白胨10g，NaCl 5g，水1000mL，pH7.4～7.6。 2.高氏1号培养基(用于放线菌培养) 可溶性淀粉20g，KNO3 1g，NaCl 0.5g，K2HPO4•3H2O 0.5g，MgSO4•7H2O0.5g，FeSO4•7
细胞凋亡小体和梯状DNA的观察(2)
四、实验程序 1． 取样 1）直接撕取洋葱内表皮和刮取人口腔上皮细胞 2）烟草悬浮细胞的培养 烟草(Nicotiana tabacum)悬浮细胞在改良的MS液体培养基（内含MS基本培养基, KH2PO4 200 mg/L，2，4-D 1 ml/L，Gly 1.8 mg/L，VB1
双杂交和其他双成分系统实验（一）
实验材料 载体和酵母菌试剂、试剂盒 缓冲液和溶液SDS 凝胶上样缓冲液SDS 聚丙烯酰胺凝胶核酸和寡核苷酸抗体培养基仪器、耗材 专用设备实验步骤 第一阶段 诱饵-LexA 融合蛋白的鉴定材料缓冲液和溶液将贮存液稀释到适当浓度。2XSDS 凝胶上样缓冲液100 mmol/L Tris-Cl(pH6.
合成细胞培养基相关知识
合成培养基是根据天然培养基的成分，用化学物质模拟合成、人工设计、配制的培养基。它有一定的配方，是一种理想的培养基。目前合成培养基多达10多余种，有的培养基仍在不断进行改良。早期组织培养是利用天然培养基，目前合成培养基已经成为一种标准化的商品，从最初的基本培养基发展到无血清培养基、无蛋白培养基，并且还
制备体外剪接反应用HeLa细胞核和胞质S100提取物实验
胞核提取物可以用于前体 mRNA 的剪接，S100 提取物中虽然包括许多剪接因子，但它不具有剪接活性，因为它只含有剪接所必需的部分 SR 蛋白，不过该提取物中补充一种或多种 SR 蛋白后就可以进行有效的剪接。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编：郑晓飞。实验方法原理胞核提取物可以用于前体 mRNA
用噬菌粒载体制备单链DNA
噬菌粒巧妙地组合了质粒和丝状噬菌体的特征。除了基本特征外，这些质粒通常是高拷贝数的，并带有一个修饰后的丝状噬菌体的主要基因间区。这个区域 ( 野生型为 508 bp)不表达蛋白，但含有全部的顺式作用序列，该作用是病毒 DNA 合成起始和结束及噬菌体颗粒的形态发生必不可少的。本实验来源「分子克隆实验指