Nature新成果:ddPCR技术助力定量miRNA
来自Bio-Rad公司,Fred Hutchinson癌症研究中心等处的研究人员发表了题为“Absolute quantification by droplet digital PCR versus analog real-time PCR”的文章,证明了液滴数字PCR( Droplet Digital PCR,ddPCR)技术能用于不同情况下,准确,可重复性的血浆和血清microRNA(miRNA)量化检测,这将为miRNA及其它核酸用于循环生物标志物的应用铺垫了道路。 这一研究成果公布在9月1日的Nature Methods杂志上,文章的第一作者,Fred Hutchinson癌症研究中心人类生物学部Muneesh Tewari博士表示,“在循环系统miRNA诊断领域,液滴数字PCR(ddPCR)能帮助我们进行生物标记物研究,直接比较同一实验室跨天多次试验,甚至不同实验室之间的检测结果。” miR......阅读全文
Nature新成果:ddPCR技术助力定量miRNA
来自Bio-Rad公司,Fred Hutchinson癌症研究中心等处的研究人员发表了题为“Absolute quantification by droplet digital PCR versus analog real-time PCR”的文章,证明了液滴数字PCR( Droplet D
预防癌症新手段:微滴式数字PCR(ddPCR)技术
“预防就是治疗”--《众病之王:癌症传》 战胜癌症,早期预防、早期发现是关键。癌症患者如果在晚期被发现,90%的患者都会死亡,而肿瘤在早期发现,5年的存活率是90%。早期发现恶变细胞踪迹,可以通过干预手段,提高自身免疫力,也可以完整切除,结合化疗,治疗疾病。 微滴式数字PCR(Droplet
miRNA-mimics-miRNA-inhibitor
miRNA mimics 是模拟生物体 内源的miRNAs,运用化学合成的方法合成,能增强内源性miRNA的功能。miRNA inhibitor 是化学修饰的专门针对细胞中特异的靶miRNA的抑制剂。近年来人工合成的miRNA(artificial miRNA,amiRNA)已经成功应用于沉默预期靶
qpcr和ddpcr基因检测的区别
QPCR的英文全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System。即实时荧光定量核酸扩增检测系统,也叫实时定量基因扩增荧光检测系统,简称QPCR。基因扩增热循环仪+荧光仪+终点定量试剂,构成PCR-DNA终点法定量检测(End-point quantitat
检测血液中miRNA的简便技术
癌变肿瘤会脱落一些微小的指示遗传分子,称为microRNAs。最近,密歇根大学的研究人员开发出一种有效的方法,能在血液中检测到它们。相关研究结果发表在六月二十二日的《Nature Biotechnology》。 研究人员称,他们这种方法可通过一种廉价的血液测试,同时对多种类型的癌症进行筛选——
miRNA海绵—长效抑制miRNA
miRNA海绵随着研究的深入,已知miRNA的数量与日俱增,目前Sanger miRBase数据库中收录的人miRNA已达721条。不过,大部分miRNA的功能仍是未知数。在基因功能研究中,最有效的方法是阻止特定基因的功能,然后了解其后果。miRNA同样如此。然而,相比之下,miRNA的功能研究要困
miRNA海绵—长效抑制miRNA
随着研究的深入,已知miRNA的数量与日俱增,目前Sanger miRBase数据库中收录的人miRNA已达721条。不过,大部分miRNA的功能仍是未知数。在基因功能研究中,最有效的方法是阻止特定基因的功能,然后了解其后果。miRNA同样如此。然而,相比之下,miRNA的功能研究要困难得多。为什么
数字PCR新应用:基于S1PFGEddPCR技术的质粒介导耐药基...
病原细菌产生耐药性,能够降低细菌感染后的药物治疗效果,并增加细菌感染和传播的风险,是造成食品安全问题和健康威胁的重要因素。细菌耐药性可分为固有耐药(intrinsic resistance)和获得性耐药(acquired resistance)两种。在获得性耐药中,携带耐药基因的质粒可导至耐
检测循环肿瘤细胞中miRNA的新技术
越来越多的证据表明,循环肿瘤细胞(CTC)中的micrornA具有诊断和预后的潜力。然而,检测却并非易事。近日,西班牙的研究人员在《Science Reports》上介绍了一种方法,能利用原位杂交检测这种小的非编码RNA。 CTC是从原发性肿瘤脱落,然后进入循环系统的一种细胞。它们到达其他的
miRNA研究
一、miRNA研究的基本问题和研究方法二、miRNA研究的综合解决方案1. miRNA微阵列芯片服务Agilent miRNA 芯片(21.0) Affymetrix miRNA 4.0 芯片2. miRNA测序服务 miRNA-seq文库构建流程 miRNA测序数据分析流程3. miRNA R
BioRad推出ddPCR突变筛查试剂盒
癌症标志物的检测让我们能够对肿瘤的存在、发展及预后作出判断。然而,在野生型DNA的背景下,癌症相关突变往往因为浓度低,而逃过检测。这时,你需要灵敏而特异的检测技术,比如数字PCR。 Bio-Rad也了解到这一需求,于近日推出了五种突变筛查试剂盒 – Droplet Digital™
miRNA克隆实验
在细胞中表达的 RNA 除了我们所熟悉的 mRNA 以外,还有大量不编码蛋白质的非编码 RNA(noncoding RNA,ncRNA),非编码 RNA 在细胞中起着非常重要的作用,如 rRNA 和 tRNA 维持着基因的表达,还有一部分则起着调控基因表达的作用。本实验来源「RNA 实验指导手册」主
miRNA--克隆实验
实验方法原理 在细胞中表达的 RNA 除了我们所熟悉的 mRNA 以外,还有大量不编码蛋白质的非编码 RNA(noncoding RNA,ncRNA),非编码 RNA 在细胞中起着非常重要的作用,如 rRNA 和 tRNA 维持着基因的表达,还有一部分则起着调控基因表达的作用。实验材料 寡核
miRNA克隆实验
实验方法原理 在细胞中表达的 RNA 除了我们所熟悉的 mRNA 以外,还有大量不编码蛋白质的非编码 RNA(noncoding RNA,ncRNA),非编码 RNA 在细胞中起着非常重要的作用,如 rRNA 和 tRNA 维持着基因
Nature发布miRNA重要发现:脂肪细胞的miRNA信号
脂肪细胞并不简单,Joslin糖尿病中心的科学家发现这种细胞并不只是静静的待在我们身体中,而且能释放出激素和其它信号蛋白,影响多种组织,其中一种竟然是miRNA。利用脂肪细胞研发基因治疗方法,也许能用于治疗肝脏或其它器官的代谢疾病,还有癌症等。 这一研究成果公布在2月15日的Nature杂志上
Science-Reports:检测循环肿瘤细胞中miRNA的新技术
越来越多的证据表明,循环肿瘤细胞(CTC)中的micrornA具有诊断和预后的潜力。然而,检测却并非易事。近日,西班牙的研究人员在 Science Reports上介绍了一种方法,能利用原位杂交检测这种小的非编码RNA。 CTC是从原发性肿瘤脱落,然后进入循环系统的一种细胞。它们到达
数字PCR发展历程
传统的荧光定量PCR,经过多年的发展,已是很成熟的实验方案了。其中,最常用的是Taqman法和SYBR Green法。而在这二种方法当中,Taqman法又以其特异性高、定量精确,得到广大用户的认可。但是Taqman法PCR,它还是一个相对定量的办法。它测的是一个Ct值,也就是PCR到第几个循
mirna-pcr电泳多久
一般是根据PCR产物大小和所用电压来决定时间的吧一般溴酚蓝跑到胶的1/3处就可以了。电压大,就时间短,第一次跑,还是在边上观察着点吧,分子小,时间不长的。
miRNA的qPCR检测
测序技术的引入促使miRNA研究领域进入快速发展阶段,然而qPCR仍是验证测序数据的重要标准。本文将为您介绍使用qPCR进行miRNA分析的基本要点,希望能帮助新人快速入门。什么是miRNA?miRNA是一类小的非编码RNA,能够与RNA诱导沉默复合物(RISC)结合,通过作用于mRNA,进而介导转
MicroRNA(miRNA)的概念
MicroRNA(miRNA):是含有茎环结构的miRNA前体,经过Dicer加工之后的一类非编码的小RNA分子(~21-23个核苷酸)。MiRNA,以及miRISCs(RNA-蛋白质复合物)在动物和植物中广泛表达。因之具有破坏目标特异性基因的转录产物或者诱导翻译抑制的功能,miRNA被认为在调控发
如何设计miRNA-mimics
miRNA mimic能模拟细胞中内源性成熟miRNA的高水平表达,以增强内源性miRNA的调控作用,是miRNA功能研究的一大利器。miRNA mimic是一种简单高效的miRNA研究工具,只需用转染试剂包裹即可转染进入细胞,无需构建载体的繁琐操作,无需病毒防护方面的担忧,用转染对照即可观察其转染
上海生科院利用STTM技术发现水稻miRNA的新功能
5月1日,《美国科学院院刊》(PNAS)杂志在线发表了中国科学院上海生命科学研究院植物逆境生物学研究中心朱健康研究组题为Short tandem target mimic rice lines uncover functions of miRNAs in regulating importan
您是否知道伯乐生命医学DDPCR即微滴式数字PCR
伯乐生命医学DDPCR即微滴式数字PCR的优点 PCR就是聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction)的简称,是一种分子生物学技术,可以用来放大特定的DNA片段,可以看作是生物体外的特殊DNA复制。 伯乐生命医学DDPCR即微滴式数字PCR的优点: 最精
miRNA-qPCR-Detection-Primer-Set(miRNA检测试剂盒)实验说明
一、概述1、介绍microRNA(miRNA)是一类有大约22 个核苷酸组成的非编码小分子RNA,其广泛存在于真核生物中。miRNA 在个体发育的不同时期及不同组织中有不同的表达模式,都表明了其在发育和分化中起有重大的调控作用。迄今为此,对miRNA 的检测方法主要有Northern B
miRNA-qPCR-Detection-Primer-Set(miRNA检测试剂盒)实验说明
一、概述 1、介绍 microRNA(miRNA)是一类有大约22 个核苷酸组成的非编码小分子RNA,其广泛存在于真核生物中。miRNA 在个体发育的不同时期及不同组织中有不同的表达模式,都表明了其在发育和分化中起有重大的调控作用。迄今为此,对miRNA 的检测方法主要有Northe
micro-RNA(miRNA)综述2
miRNA的作用方式最早被发现的两个miRNAs――lin-4 and let-7被认为是通过不完全互补结合到目标靶mRNA3'非编码区端,以一种未知方式诱发蛋白质翻译抑制,进而抑制蛋白质合成,阻断mRNA的翻译。多个果蝇miRNAs也被发现和他们的目标靶mRNAs的3'非编码区
micro-RNA(miRNA)综述3
未来要解决的问题miRNAs在多个物种中广泛被发现,而且在进化上高度保守。这些“小玩意儿”留给我们一大堆谜团:miRNA的确切功能是什么?它的目标靶是什么?作用机制是什么?也许需要对植物或者线虫的基因组进行miRNAs突变株的筛选,在果蝇中可以用targeted- disruption缺失miR
micro-RNA(miRNA)综述1
RNA一度被认为仅仅是DNA和蛋白质之间的“过渡”,但越来越多的证据清楚的表明,RNA在生命的进程中扮演的角色远比RNA我们早前设想的更为重要。RNA干扰(RNA interference)的发现使得人们对RNA调控基因表达的功能有了全新的认识,更因为可以简化替代基因敲除而成为研究基因功能的
miRNA研究之RNA标记
RNA标记RNA标记是将标记物(如放射性同位素、荧光素或酶)共价地连接到RNA,通过检测标记物,进而实现对RNA鉴别和检测的目的。RNA标记在分子探针领域应用广泛,在疾病诊断方面也很有前景。 理想的RNA标记方法应符合以下要求:1. 操作简单,灵敏度高2. 不影响碱基配对的特异性3. 不影响R
Isolation-of-microRNA-(miRNA)
实验概要 This protocol utilizes the powerful guanidine isothiocyanate–phenol:chloroform extraction method which allows the rapid isolation of t