miRNA的qPCR检测

测序技术的引入促使miRNA研究领域进入快速发展阶段,然而qPCR仍是验证测序数据的重要标准。本文将为您介绍使用qPCR进行miRNA分析的基本要点,希望能帮助新人快速入门。什么是miRNA?miRNA是一类小的非编码RNA,能够与RNA诱导沉默复合物(RISC)结合,通过作用于mRNA,进而介导转录后基因表达。通常情况下,miRNA-RICS复合物能够通过阻断靶标miRNA的翻译或促使其降解,从而起到抑制mRNA表达的作用。多数miRNA长度约为18‒22个核苷酸,在样本中的总RNA量中仅占很小的一部分。通常认为总RNA中miRNA的量大约为0.01%(1)。经过多年研究,一些mRNA与其相应miRNA之间的调控作用已经取得了较多的数据积累。miRNA参与的生物过程包括分化、发育、信号转导和宿主感染应答。此外,多项研究结果表明,miRNA表达失调是癌症等疾病的病因,或是某些疾病的指标。循环miRNA表达与疾病有关,并且血清和血......阅读全文

miRNA的qPCR检测

测序技术的引入促使miRNA研究领域进入快速发展阶段,然而qPCR仍是验证测序数据的重要标准。本文将为您介绍使用qPCR进行miRNA分析的基本要点,希望能帮助新人快速入门。什么是miRNA?miRNA是一类小的非编码RNA,能够与RNA诱导沉默复合物(RISC)结合,通过作用于mRNA,进而介导转

miRNA-qPCR-Detection-Primer-Set(miRNA检测试剂盒)实验说明

  一、概述   1、介绍   microRNA(miRNA)是一类有大约22 个核苷酸组成的非编码小分子RNA,其广泛存在于真核生物中。miRNA 在个体发育的不同时期及不同组织中有不同的表达模式,都表明了其在发育和分化中起有重大的调控作用。迄今为此,对miRNA 的检测方法主要有Northe

miRNA-qPCR-Detection-Primer-Set(miRNA检测试剂盒)实验说明

一、概述1、介绍microRNA(miRNA)是一类有大约22 个核苷酸组成的非编码小分子RNA,其广泛存在于真核生物中。miRNA 在个体发育的不同时期及不同组织中有不同的表达模式,都表明了其在发育和分化中起有重大的调控作用。迄今为此,对miRNA 的检测方法主要有Northern B

GEN:miRNA检测行业热度不减

  MicroRNAs (miRNAs)是一种存在于真核生物的内源性非编码小RNA,具有抑制靶向mRNA转录、翻译或者剪切靶向mRNA并促使其降解的功能。它会组装进入沉默复合体(RISC),识别并与靶向mRNA互补配对,从而降解或者阻止mRNA翻译。  miRNAs负责调控多种生理过程,包括细胞周期

疾病检测新指标miRNA(二)

杨医师等人在另一个研究中,分析小鼠在遭受革兰氏阳性菌感染后,血液中miRNA表达谱的变化(Hsieh CH et al., 2013)。枯草杆菌(Bacillus_subtilis)、粪链球菌(Streptococcus faecalis)、金黄色葡萄球菌(Staphylococcus au

疾病检测新指标miRNA(一)

microRNA(miRNA)是真核生物中广泛存在的一种由 non-coding 区域转录的小片段 RNA,长度仅有 19~25 个核苷酸。根据 miRBase 数据库,在所有物种发现的 miRNAs,至今已超过 2 万个。miRNA 透过与标的 mRNA 的特异性结合,经由 post-tr

qpcr原理及流程

一、QPCR原理“qpcr原理是一种在DNA扩增反应中,以荧光化学物质测每次聚合酶链式反应(PCR)循环后产物总量的方法;应用于对PCR进程进行实时检测。检测方法:加尾法和颈环法miRNA很短,用mRNA的反转录方法无法得到足以定量的cDNA。所以,miRNA的反转要求将miRNA序列进行延长,目前

qpcr和ddpcr基因检测的区别

QPCR的英文全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System。即实时荧光定量核酸扩增检测系统,也叫实时定量基因扩增荧光检测系统,简称QPCR。基因扩增热循环仪+荧光仪+终点定量试剂,构成PCR-DNA终点法定量检测(End-point quantitat

miRNA-mimics-miRNA-inhibitor

miRNA mimics 是模拟生物体 内源的miRNAs,运用化学合成的方法合成,能增强内源性miRNA的功能。miRNA inhibitor 是化学修饰的专门针对细胞中特异的靶miRNA的抑制剂。近年来人工合成的miRNA(artificial miRNA,amiRNA)已经成功应用于沉默预期靶

miRNA加尾逆转录后QPCR的溶解曲线的杂峰多怎么办

溶解曲线有多个峰值就说明有非特异性扩增。可以升高退火温度,或者更换引物

Nature新成果:ddPCR技术助力定量miRNA

  来自Bio-Rad公司,Fred Hutchinson癌症研究中心等处的研究人员发表了题为“Absolute quantification by droplet digital PCR versus analog real-time PCR”的文章,证明了液滴数字PCR( Droplet D

检测血液中miRNA的简便技术

  癌变肿瘤会脱落一些微小的指示遗传分子,称为microRNAs。最近,密歇根大学的研究人员开发出一种有效的方法,能在血液中检测到它们。相关研究结果发表在六月二十二日的《Nature Biotechnology》。  研究人员称,他们这种方法可通过一种廉价的血液测试,同时对多种类型的癌症进行筛选——

miRNA海绵—长效抑制miRNA

随着研究的深入,已知miRNA的数量与日俱增,目前Sanger miRBase数据库中收录的人miRNA已达721条。不过,大部分miRNA的功能仍是未知数。在基因功能研究中,最有效的方法是阻止特定基因的功能,然后了解其后果。miRNA同样如此。然而,相比之下,miRNA的功能研究要困难得多。为什么

miRNA海绵—长效抑制miRNA

miRNA海绵随着研究的深入,已知miRNA的数量与日俱增,目前Sanger miRBase数据库中收录的人miRNA已达721条。不过,大部分miRNA的功能仍是未知数。在基因功能研究中,最有效的方法是阻止特定基因的功能,然后了解其后果。miRNA同样如此。然而,相比之下,miRNA的功能研究要困

植物miRNA及piRNA的逆转录

miRNA在植物的发育、抗病、和应激反应中发挥着重要作用。一般认为,这些小的非编码RNA通过靶向mRNA剪切,在后转录水平调节植物的基因表达。这些基因表达中的靶向变化由数百个成熟miRNA的差异表达所调控,每个成熟miRNA结合在靶mRNA的特定序列上。因此,对植物的成熟miRNA调控和表达进行分析

miRNA检测的三种方法

MicroRNA (miRNA)是一种机体内源性表达的单链小分子RNA,位于基因组非编码区,本身不具有开放阅读框(open reading frame,ORF),具有高度保守性,时序性和组织特异性。miRNA广泛存在于各种真核细胞中,不编码任何蛋白质,长度仅为20~24nt。成熟的miRNA 5′端

miRNA检测的三种方法

MicroRNA  (miRNA)是一种机体内源性表达的单链小分子RNA,位于基因组非编码区,本身不具有开放阅读框(open reading frame,ORF),具有高度保守性,时序性和组织特异性。miRNA广泛存在于各种真核细胞中,不编码任何蛋白质,长度仅为20~24nt。成熟的miRN

小分子RNA(miRNA)简介

一、什么是小分子RNA( MicroRNA)?    MicroRNA (miRNA) 是一类长度约为20-24个核苷酸长度的具有调控功能的非编码RNA。 miRNA 主要参与基因转录后水平的调控。这些miRNA基因首先在细胞核内转录成原始miRNA转录本(primary transcrip

RealTime-ready自由定制您的qPCR-检测方法

RealTime ready qPCR 分析方法是罗氏诊断公司应用科学部于2010年最新推出的即用型qPCR定制检测方法,可快速灵敏地一次性定量6-384个基因的表达情况。您可于免费的RealTime ready 在线配置工具上,自由选择人类相关靶基因并进行定制型多孔检测板的配置。除了通

Cell-Reports:外泌体miRNA如何影响细胞通讯?

  2013年,美国、德国3位科学家凭借他们所发现的细胞囊泡运输的调节机制,荣获2013年诺贝尔生理学或医学奖。外泌体(exosomes)作为人体内一类重要囊泡,也开始受到越来越多的关注。科学家们已发现,外泌体会参与到免疫应答、凋亡、血管生成、炎症反应、凝结等重要的生物过程中,细胞会通过分泌外泌体,

miRNA与癌症:了解它们之间的关联

  在肿瘤发生的经典模型中,癌症通过慢慢积累突变、放任细胞增长而发生。许多这样的突变影响关键的调控蛋白,如原癌基因和抑癌基因。不过,非编码RNA基因的突变也同样有害,尤其是microRNA。  microRNA(miRNA)是一类22个核苷酸的调控转录本。它们与mRNA靶点相结合,或抑制其翻译,或诱

miRNA研究

一、miRNA研究的基本问题和研究方法二、miRNA研究的综合解决方案1. miRNA微阵列芯片服务Agilent miRNA 芯片(21.0) Affymetrix miRNA 4.0 芯片2. miRNA测序服务  miRNA-seq文库构建流程  miRNA测序数据分析流程3. miRNA R

中国农大:鸡MDV诱导型淋巴瘤的miRNA分析

  马立克氏病(Marek’s Disease, MD)是鸡的一种淋巴组织增生性肿瘤病,其特征为外周神经淋巴样细胞浸润和增大,引起肢(翅)麻痹,以及性腺、虹膜、各种脏器、肌肉和皮肤肿瘤病灶。MD 是一种世界性疾病,目前是危害养鸡业健康发展的三大主要疫病之一,引起鸡群较高的发病率和死亡率。同时

检测循环肿瘤细胞中miRNA的新技术

   越来越多的证据表明,循环肿瘤细胞(CTC)中的micrornA具有诊断和预后的潜力。然而,检测却并非易事。近日,西班牙的研究人员在《Science Reports》上介绍了一种方法,能利用原位杂交检测这种小的非编码RNA。  CTC是从原发性肿瘤脱落,然后进入循环系统的一种细胞。它们到达其他的

Nacia数字PCR在基因表达分析中的应用

华盛顿大学医学院儿科和加利福尼亚大学圣地亚哥分校医学院儿科的研究人员建立了一个稳定可靠的基于RNA磁珠提取和数字PCR的方法,可从粪便样本中检测与EE(热带肠病)关联的人mRNA,灵敏度可达20拷贝GAPDH mRNA/200mg粪便样本。已有报道表明病人粪便中存在人mRNA,可作为反应病人消化道病

重大发现!miRNA可鉴别心梗引起的心肌损伤!

  相信大家在新冠肺炎疫情全球流行期间,一定听过一种很致命的并发症——暴发性心肌炎。  心肌炎是心脏的炎症性疾病,其病因包括病原体感染、毒素、药物及自身免疫功能障碍,最终可能引起心脏性猝死或进展为扩张型心肌病。  然而,当前心肌炎的诊断仍较为困难,常常需要建立在排除冠心病的基础上,且难以与冠状动脉非

Tecan与Roche联合打造即用型qPCR检测平台

  美国北卡罗来纳大学迪特默实验室正在使用已整合了Roche LightCycler® 480实时荧光定量PCR仪的Tecan Freedom EVO® 150全自动液体处理平台对病毒性癌症进行生物学研究,如研究由卡波氏肉瘤相关病毒((Kaposi sarcoma-associated herp

什么叫QPCR

QPCR 问:什么是QPCR?答:QPCR的英文全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System。即实时荧光定量核酸扩增检测系统,也叫实时定量基因扩增荧光检测系统,简称QPCR。问:QPCR、DNA检测、PCR之间的关系?答:聚合酶链式反应(Polymer

什么叫QPCR

QPCR 问:什么是QPCR?答:QPCR的英文全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System。即实时荧光定量核酸扩增检测系统,也叫实时定量基因扩增荧光检测系统,简称QPCR。问:QPCR、DNA检测、PCR之间的关系?答:聚合酶链式反应(Polymer

qpcr实验流程

Q-PCR 实验流程一、实验前准备,每天早上到实验室后,先把超净工作台的紫外灯打开 15-20 分钟。2超净台前做实验,需佩戴干净的橡胶手套/一次性薄膜手套,RNA 抽提需 带口罩。3取 EP 管/枪头时需用镊子,不可以用使用过的手套直接取用。取完 EP 管/枪头后,袋子及时封好。@橡胶手套须放入超