研究建立神经中胚层祖细胞的谱系示踪与功能研究技术
中国科学院分子细胞科学卓越创新中心周斌研究组与香港中文大学吕爱兰研究组合作,构建了双同源重组酶系统,建立了体内神经中胚层祖细胞(NMPs)的谱系示踪与功能研究技术,并结合单细胞转录组测序技术,揭示了NMPs在胚胎发育中的细胞命运和分子特征。这一研究揭示了NMPs在胚胎发育中的分布、分化潜能和功能,为脊髓损伤的细胞治疗提供了新的研究方向。脊髓作为中枢神经系统的重要组成部分,承担着神经信号传导和肌肉运动协调等关键功能。目前,针对脊索退行性病变和外源性脊髓损伤的治疗手段存在局限性。体外细胞实验表明,NMPs能够分化为脊髓中的神经细胞,并可以产生周围的中胚层组织,在脊髓损伤的细胞治疗中具有应用前景。尽管既往研究证实NMPs具有双向分化潜能,但缺乏在体内直接示踪和功能评估的遗传工具。因此,开发精准靶向体内NMPs的技术对揭示其细胞命运和功能至关重要。该研究设计和构建了多种双同源重组酶系统,建立了哺乳动物体内特异性标记NMPs的遗传谱系示踪......阅读全文
研究建立神经中胚层祖细胞的谱系示踪与功能研究技术
中国科学院分子细胞科学卓越创新中心周斌研究组与香港中文大学吕爱兰研究组合作,构建了双同源重组酶系统,建立了体内神经中胚层祖细胞(NMPs)的谱系示踪与功能研究技术,并结合单细胞转录组测序技术,揭示了NMPs在胚胎发育中的细胞命运和分子特征。这一研究揭示了NMPs在胚胎发育中的分布、分化潜能和功能,为
同源重组技术原理
同源重组技术原理:基因敲除鼠技术是上世纪80年代中后期基于DNA同源重组的原理发展起来的,Capecchi和Smithies在1987年根据同源重组(homologous recombination)的原理,首次实现了ES的外源基因的定点整合(targeted integration),这一技术称为
同源重组法技术介绍
同源重组法:同源重组(homologous recombination)是将外源基因定位导入受体细胞的染色体上,在该座位因有同源序列,通过单一或双交换,新基因片段替换有缺陷的片段,达到修正缺陷基因的目的。如在新基因片段旁组装一Neo基因,则在同源重组后,因有Neo基因,可在含有新霉素(neomyci
非同源重组的概念
非同源重组指的是发生在不含同源序列的DNA序列间的重组。这可能导致染色体易位,有时会导致癌症。
同源重组的原理是什么?
同源重组(Homologous Recombination) 是指发生在非姐妹染色单体(sister chromatid) 之间或同一染色体上含有同源序列的DNA分子之间或分子之内的重新组合。同源重组需要一系列的蛋白质催化,如原核生物细胞内的RecA、RecBCD、RecF、RecO、RecR等
关于同源重组的基本介绍
同源重组( homologous recombination)是指发生在两段同源序列之间的DNA片段交换。两段同源序列既可以完全相同,也可以存在差异,既可以位于两个DNA分子上,也可以位于一个DNA分子中。真核生物的同源染色体交换及姐妹染色单体交换、细菌的转导和转化、噬菌体的重组都属于同源重组。
同源重组的概念和过程
同源重组(Homologous Recombination) 是指发生在非姐妹染色单体(non-sister chromatid) 之间或同一染色体上含有同源序列的DNA分子之间或分子之内的重新组合。同源重组需要一系列的蛋白质催化,如原核生物细胞内的RecA、RecBCD、RecF、RecO、Rec
DNA-同源重组的关键分子机制
蛋白质与植物基因研究国家重点实验室研究团队揭示 DNA 同源重组的关键分子机制 作为三大DNA代谢途径(DNA 复制、重组、损伤修复)之一,DNA同源重组(Homologous Recombination)是生命体的基本生物事件。它在细胞生长、减数分裂、配子形成、物种进化、DNA双链断裂修复、
关于同源重组的Holliday模型介绍
Holliday于1964年提m Holliday模型,将同源重组分为四个阶段。 1.同源序列配对。 2.形成Holliday结构,即两段同源序列的单股同源DNA的同一磷酸二酯键被水解,同源末端交换,连接,形成Holliday结构(HoIJiday structure,又称Holliday连
同源双链的概念
中文名称同源双链英文名称homoduplex定 义由相同的或从同一来源的两个分子所构成的分子。如从同一来源的两条核酸单链构成的DNA-DNA或RNA-RNA双链就是同源双链。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)
关于同源重组的基本内容介绍
我们可以看到,同源重组一般都在染色体内仍按DNA序列的原来排列次序。但是在所谓位点特异性重组(site-specific recombination)中,DNA节段的相对位置发生了移动,从而得到不同的结果─DNA序列发生重排。位点特异性重组不依赖于DNA顺序的同源性(虽然亦可有很短的同源序列),
DNA损伤修复机制——非同源末端链接NHEJ和同源重组HR
生命极其脆弱,我们每天在电子辐射、紫外线、雾霾等等各种外部环境及细胞代谢产物等内源因素影响下,我们生命的核心-DNA都会受到不同程度的损伤,其中DNA双链断裂(DSBs,Double strand breaks)是损伤中最为严重的一种,然而生命却又极其强大,我们无时无刻不在受伤,也无时无刻不在自
DNA损伤修复机制——非同源末端链接NHEJ和同源重组HR
生命极其脆弱,我们每天在电子辐射、紫外线、雾霾等等各种外部环境及细胞代谢产物等内源因素影响下,我们生命的核心-DNA都会受到不同程度的损伤,其中DNA双链断裂(DSBs,Double strand breaks)是损伤中最为严重的一种,然而生命却又极其强大,我们无时无刻不在受伤,也无时无刻不
DNA损伤修复机制——非同源末端链接NHEJ和同源重组HR
【干货】拯救你受伤的DNA-NHEJ与HR生命极其脆弱,我们每天在电子辐射、紫外线、雾霾等等各种外部环境及细胞代谢产物等内源因素影响下,我们生命的核心-DNA都会受到不同程度的损伤,其中DNA双链断裂(DSBs,Double strand breaks)是损伤中最为严重的一种,然而生命却又极
双同源重组报告系统可同时对三种细胞群进行标记示踪
2019年11月26日,国际学术期刊Journal of Biological Chemistry 在线发表了中国科学院分子细胞科学卓越创新中心/生物化学与细胞生物学研究所周斌研究组的科研成果“Triple-cell lineage tracing by a dual reporter on a
RNA为模板-首次实现植物同源重组修复
中国农业科学院作物科学研究所作物转基因技术与应用创新团队与美国加州大学圣地亚哥分校合作,使用核糖核苷酸(RNA)作为同源重组修复(HDR)的模板,成功获得后代无转基因成分的抗ALS抑制剂类除草剂水稻植株。这是在植物中首次成功利用RNA作为脱氧核糖核酸(DNA)同源重组修复模板。相关研究论文北京时
关于同源重组的双股断裂修复模型介绍
双股断裂修复模型( double-strand break repaii。mnodel)也将同源重组分为四个阶段。 1、同源序列配对。 2、形成3’端突出结构,即配对同源序列之一的DNA双链水解,并由5’外切核酸酶水解,形成3'端突出结构(即3’黏端)(①~②) 3、形成Holli
同源双链体的结构特点
中文名称同源双链体英文名称homoduplex定 义物种中原有的双链DNA,或经变性复性后完全互补的双链DNA。应用学科遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)
“一种特异性重组酶系统及其应用”获发明ZL
此前,中国科学院华南植物园研究员区永祥带领的团队建立了一套由重组酶介导的基因定点叠加系统以提高多基因分子育种的效率(Hou et al., 2014 Molecular plant 7: 1756 -1765)。在这套系统中,Cre重组酶扮演着重要的角色——在每一轮的基因叠加后,删除不再需要的外
遗传发育所在同源重组机制研究中取得进展
减数分裂是维持生物体染色体数恒定,导致遗传重组产生的基础。减数分裂缺陷是导致不孕、不育和出生障碍的主要原因。绝大多数减数分裂基因在不同物种中有着高度保守的功能。HEI10基因最初在人类体细胞中分离,并证明有调控细胞周期的功能。在小鼠中的研究表明,HEI10基因的突变会导致减数分裂异常并最终导致不
通过自杀质粒同源重组构建细菌突变株
自杀性质粒载体:一般用于基因突变。将突变的目的基因克隆到自杀性质粒载体上,通过接合等使其进入宿主,由于在宿主菌中不存在复制基因启始所需的复制蛋白(如Pi蛋白等),其无法复制,在外界选择性压力的作用下,自杀性质粒载体所携带的突变基因就与宿主染色体上的野生型发生基因发生二次同源重组,产生了带有突变的突变
基于胚胎干细胞的同源重组技术介绍
基因改造(包括敲除和敲进)小鼠已经成为现代生命科学基础研究和药物研发领域不可或缺的实验动物模型,在生命科学、人类医药和健康研究领域中发挥着重要的作用。今天呢,就给大家介绍最传统最稳定的基因改造技术:基于胚胎干细胞的同源重组技术。Capecchi和Smithies早在在1989年根据同源重组(homo
遗传发育所解析同源重组保障的新机制
减数分裂过程中,性母细胞会主动产生DNA双链断裂(double-strand break, DSB),起始同源重组。同源重组正常发生在同源DNA之间,若在非同源DNA之间发生重组,则会导致后代基因组的紊乱。为此,生物体进化出了一套完善的体系,避免在序列相似的非同源DNA之间发生重组。但是目前对该
研究揭示植物调控同源重组修复的新机制
近日,华中农业大学生命科学技术学院教授严顺平团队在国际学术期刊PNAS在线发表成果。该研究不仅揭示了植物调控同源重组修复的新机制,也为利用同源重组修复机制提高植物基因打靶效率提供了新思路。同时,该研究还首次揭示了植物调控SOG1蛋白稳定性的机制,具有重要的科学意义。所有生物都需要把正确的遗传信息(D
分子遗传学词汇同源双链体
中文名称:同源双链体英文名称:homoduplex定 义:物种中原有的双链DNA,或经变性复性后完全互补的双链DNA。应用学科:遗传学(一级学科),分子遗传学(二级学科)
生态中心在同源重组分子机制研究方面取得进展
近日,中国科学院生态环境研究中心研究员汪海林团队在同源重组分子机制研究方面取得进展,相关研究成果以Flanking strand separation activity of RecA nucleoprotein filaments in DNA strand exchange reaction
重组质粒双酶切鉴定
既然你的质粒已经提出来了,那么感受态、转化等因素就不必再考虑了。 你看看双酶切后载体的位置有几条带,如果是两条,那说明酶切不完全,如果是一条,那说明酶切效率没问题。 pET28a分子量为5.6k,你的插入片段为500bp,如果你的质粒完全切开,载体和插入片段的摩尔比为1:1,质量比就是5.6
从同源重组到碱基编辑器-看基因编辑72变
基因编辑尤其是“基因魔剪”CRISPR的新闻报道几乎每天都能见到。仅在3月份,就有两篇引起广泛关注的重磅成果,其一,曾与张峰合作开创“基因魔剪”CRISPR的科技大牛刘如谦(David Liu),利用基因编辑技术研发出给细胞活动拍照的“细胞记录仪”(CAMERA)。正如黑匣子能记录事故发生时的
南模生物小鼠模型在构建一种全新诱导型Cre重组酶系统...
南模生物小鼠模型在构建一种全新诱导型Cre重组酶系统的应用Cre-loxP介导的遗传操作技术,广泛应用于谱系示踪、基因异位表达和组织特异性基因敲除等研究,为了解器官发育、组织再生和疾病进程中体内细胞行为和基因功能提供了关键依据。然而,Cre-loxP介导的遗传操作技术长期存在的缺陷和不足,已成为阻碍
遗传发育所揭示减数分裂同源重组保障新机制
减数分裂过程中,性母细胞主动产生大量DNA双链断裂(double-strand break, DSB),以起始同源重组,形成交叉结,确保同源染色体均等分离。但是,同源重组并不是唯一DSB修复方式,其他非精确修复途径如非同源末端连接(non-homologous end joining, NHEJ