世界首例ROSA26基因敲入猪模型诞生
近日,中科院广州生物医药与健康院研究员赖良学与美国密西根大学教授王忠合作,获得了世界首例ROSA26定点基因敲入猪模型。据称,该研究成功地实现了猪重组酶介导的基因交换,从而解决了一直困扰转基因猪研究领域效率低下、表型不确定的问题。相关研究成果日前在线发表于《细胞研究》。 转基因猪在农业新品种培育和生物医药研究中具有非常重要的应用价值。长期以来,由于缺乏猪胚胎干细胞,转基因猪的制备主要依赖体细胞基因修饰和体细胞核移植技术。而目前,对体细胞的基因修饰主要依赖将外源基因随机插入猪基因组的方法,导致外源基因在猪基因组中的整合位点和拷贝数不可控,进而使外源基因猪体内表达不稳定,引发转基因猪个体之间表型不均一等问题,限制了转基因猪的培育与应用前景。 上述研究团队在猪基因组中找到了一个特殊基因位点ROSA26,并利用TALEN介导基因敲入技术,成功地构建了世界上第一个ROSA26定点敲入Cre重组酶报告基因的大动物模......阅读全文
Small:利用近红外光触发Cre重组酶介导的基因组编辑
在细胞中进行基因组编辑的一个主要障碍是细胞本身。美国加州大学圣塔芭芭拉分校化学与生物化学系教授Norbert Reich解释道,“人细胞不喜欢摄入东西。”人细胞已形成一种“垃圾处理”机制来分离和降解外来的蛋白、其他的不想要的生物分子和病原体,甚至是受损的细胞结构。因此,对生物技术、生物制药和基因
世界首例ROSA26基因敲入猪模型诞生
近日,中科院广州生物医药与健康院研究员赖良学与美国密西根大学教授王忠合作,获得了世界首例ROSA26定点基因敲入猪模型。据称,该研究成功地实现了猪重组酶介导的基因交换,从而解决了一直困扰转基因猪研究领域效率低下、表型不确定的问题。相关研究成果日前在线发表于《细胞研究》。 转基因猪
广州生物院合作获得世界首例ROSA26基因打靶猪模型
中国科学院广州生物医药与健康研究院研究员、吉林大学动物医学学院教授赖良学博士与美国密西根大学教授王忠合作,获得了世界首例ROSA26定点基因敲入猪模型。利用该模型猪,成功地实现重组酶介导的基因交换,从而解决了一直困扰转基因猪研究领域的效率低下、表型不确定的问题,该成果的获得将极大地推动转基因猪在
基因重组胰蛋白酶与传统胰酶的消化对比
胰蛋白酶(Trypsin)是一种丝氨酸蛋白水解酶。其前体为无生物活性的胰蛋白酶原(trypsinogen),产生于胰脏。随胰液分泌到小肠中,被小肠中的肠肽酶激活后,能将蛋白质分解为多肽,进而分解成为氨基酸。其切割肽链的位点主要位于赖氨酸或精氨酸的羧基端。故在体外细胞培养中,胰蛋白酶被用于消化贴壁细胞
病毒介导基因转移
病毒介导基因转移:前述的化学和物理方法都是通过传染方式基因转移。病毒介导基因转移(viral mediatedgene transfer)是通过转换方式完成基因转移,即以病毒为载体(vector),将外源目的基因通过基因重组技术,将其组装于病毒上,让这种重组病毒去感染受体宿主细胞,这种病毒称为病毒运
基因重组和DNA重组区别
基因重组是由于不同DNA链的断裂和连接而产生DNA片段的交换和重新组合,形成新DNA分子的过程。 在人类的生殖细胞中发现的46条染色体发生在生物体内基因的交换或重新组合。基因重组是生物遗传变异的一种机制,包括同源重组、位点特异重组、转座作用和异常重组四大类。DNA重组指DNA分子内或分子间发生的遗传
什么是重组酶?
中文名称重组酶英文名称recombinase定 义参与基因定位重组过程的酶。负责识别、切割特异的重组位点,并连接两个参与重组的分子。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),酶(二级学科)
猪伪狂犬GE基因抗体(PRV-Ab)酶联免疫说明
本试剂盒仅供研究使用。 96T使用目的:本试剂盒用于测定猪血清、血浆及相关液体样本中伪狂犬GE基因抗体(PRV Ab)表达。实验原理本试剂盒应用双抗原夹心法测定标本中猪伪狂犬GE基因抗体(PRV Ab)表达。用纯化的猪伪狂犬GE基因抗原包被微孔板
重组酶聚合酶扩增叙述
重组酶聚合酶扩增(RPA),被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。RPA技术主要依赖于三种酶:能结合单链核酸(寡核苷酸引物)的重组酶、单链DNA结合蛋白(SSB)和链置换DNA聚合酶。这三种酶的混合物在常温下也有活性,最佳反应温度在37℃左右。重组酶与引物结合形成的蛋白-DNA复合物,能在双链D
关于基因重组的自然重组的介绍
自然界不同物种或个体之间的基因转移和重组是经常发生的,它是基因变异和物种进化的基础。自然界的基因转移的方式有: 接合作用:当细胞与细胞、或细菌通过菌毛相互接触时,质粒DNA就可从一个细胞(细菌)转移至另一细胞(细菌),这种类型的DNA转移称为接合作用(conjugation )。 转化作用(
什么是Cre重组酶?
Cre重组酶是细菌噬菌体P1的I型拓扑异构酶,催化loxP位点间的DNA进行位点特异性重组。本酶无需能量辅助因子,Cre-介导的重组很快在底物与反应产物之间达到平衡 [1] 。 Cre(Cyclization Recombination Enzyme,即环化重组酶)是来源于噬菌体P1的一种
RPA重组酶是什么?
2006 年,Piepenburg 等首次提出了重组酶聚合酶扩增反应(recombinase polymerase amplification,RPA)。它是由重组酶(T4 uvsX)、聚合酶(Bsu)和单链结合蛋白(gp32)以及两条特异性的上下游引物参与的等温扩增。 首先, T4 uvsX
DNA重组技术-酶切
实验概要 通过酶切获得可进行体外重组的载体和外源DNA实验原理 DNA重组技术是用内切酶分别将载体和外源DNA切开,经分离纯化后,用链接酶将其连接,构成新的DNA分子。 限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DN
基因重组的应用——基因诊断
通过使用基因芯片分析人类基因组,可找出致病的遗传基因。癌症、糖尿病等,都是遗传基因缺陷引起的疾病。医学和生物学研究人员将能在数秒钟内鉴定出Z终会导致癌症等的突变基因。借助一小滴测试液,医生们能预测药物对病人的功效,可诊断出药物在ZL过程中的不良反应,还能当场鉴别出病人受到了何种细菌、病毒或其他微生物
基因重组应用——转基因技术
基因重组中转基因技术的理论基础来源于进化论衍生来的分子生物学。基因片段的来源可以是提取特定生物体基因组中所需要的目的基因,也可以是人工合成指定序列的DNA片段。基因重组DNA片段被转入特定生物中,与其本身的基因组进行重组,再从重组体中进行数代的人工选育,从而获得具有稳定表现特定的遗传性状的个体。该技
基因重组的定义
重组(recombination) 杂交后代的个体中出现了亲代所没有的基因组合的现象。
基因重组的简述
基因重组是由于不同DNA链的断裂和连接而产生DNA片段的交换和重新组合,形成新DNA分子的过程。1974年波兰斯吉巴尔斯基(Waclaw Szybalski)称基因重组为合成生物学,1978年他在《基因》期刊中写道:限制酶将带领我们进入合成生物学的新时代。
基因重组的分类
①基因的自由组合:减数分裂(减1后期)形成配子时,随着非同源染色体的自由组合,位于这些染色体上的非等位基因也自由组合。组合的结果可能产生与亲代基因型不同的个体。②基因的交叉互换:减Ⅰ四分体时期,同源染色体上(非姐妹染色单体)之间等位基因的交换。结果是导致染色单体上基因的重组,组合的结果可能产生与亲代
什么是基因重组
基因重组是造成基因型变化的核酸的交换过程,是生物体内细胞中DNA序列的改变。基因重组是在生物体进行有性生殖的过程中,控制不同性状的基因重新组合。基因重组一般发生在减数分裂过程中,包含两种情况,一种是减一后期同源染色体上的等位基因彼此分离,非同源染色体上的非等位基因彼此结合;另一种情况是联会时期的交叉
猪酶联免疫分析(ELISA)
猪酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用 目的:本试剂盒用于测定猪血清,血浆及相关液体样本中胰岛素(Insulin)的含量。实验原理: 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪胰岛素(Insulin)水平。用纯化的猪胰岛素(Insulin)抗体包被微孔板,制成固
猪胰蛋白酶制备
实验概要本实验介绍了猪胰蛋白酶制备的原理及操作步骤等。实验原理胰蛋白酶是以无活性的酶原形式存在于动物胰脏中,在Ca2 的存在下,被肠激酶或有活性的胰蛋白酶自身激活,从肽链N端赖氨酸和异亮氨酸残基之间的肽键断开,失去一段六肽,分子构象发生一定改变后转变为有活性的胰蛋白酶。胰蛋白酶原的分子量约为2400
CRISPR-猪:精准猪基因编辑对抗-PRRS-病毒威胁
基于 CRISPR 的基因组编辑已成功应用于镰状细胞病,其他公司正在致力于开发基于 CRISPR 的疗法。这项技术应用到动物身上似乎是很自然的事情。现在,英国动物遗传学公司 Genus 的科学家团队在威斯康星州和田纳西州设有研究机构,开发出新一代 CRISPR 编辑猪,可以抵抗猪繁殖与呼吸综合征 (
猪胰蛋白酶酶活力的测定
实验原理胰蛋白酶是以无活性的酶原形式存在于动物胰脏中,在Ca2+的存在下,被肠激酶或有活性的胰蛋白酶自身激活,从肽链N端赖氨酸和异亮氨酸残基之间的肽键断开,失去一段六肽,分子构象发生一定改变后转变为有活性的胰蛋白酶。胰蛋白酶原的分子量约为24000,其等电点约为pH8.9,胰蛋白酶的分子量与其酶原接
RNA介导的基因沉默实验
实验材料pGEM-T 载体DNA 模板试剂、试剂盒dNTP 混合物DNA 聚合酶(Sigma) 及配套缓冲液限制酶仪器、耗材PCR 纯化试剂盒或柱子实验步骤一、筛选目的基因片段的参数1. 序列( 1 ) 构建一个指定的 RNA 沉默载体首先要进行生物信息学分析。根据目的基因对应的已知 cDNA 序列
RNA介导的基因沉默实验
实验材料 pGEM-T 载体DNA 模板试剂、试剂盒 dNTP 混合物DNA 聚合酶(Sigma) 及配套缓冲液限制酶仪器、耗材 PCR 纯化试剂盒或柱子实验步骤 一、筛选目的基因片段的参数1. 序列( 1 ) 构建一个指定的 RNA 沉默载体首先要进行生物信息学分析。根据目的基因对应的已知 c
RNA介导的基因沉默实验
实验材料pGEM-T 载体 DNA 模板 试剂、试剂盒d
病毒介导基因转移技术介绍
病毒介导基因转移:前述的化学和物理方法都是通过传染方式基因转移。病毒介导基因转移(viral mediatedgene transfer)是通过转换方式完成基因转移,即以病毒为载体(vector),将外源目的基因通过基因重组技术,将其组装于病毒上,让这种重组病毒去感染受体宿主细胞,这种病毒称为病毒运
基因重排与基因重组的区别
基因重排:通过基因的转座,DNA的断裂错接而使正常基因顺序发生改变基因重组: 是由于不同DNA链的断裂和连接而产生DNA片段的交换和重新组合,形成新DNA分子的过程。也就是说,,基因重排是一个基因内DNA排列发生改变,,而使这个基因改变了,如出现新的基因就是靠这种方法,而基因重组却是几个不同基因互相
基因重组和基因突变区别
1、基因突变是基因的从无到有,突变产生新基因。基因重组是原有基因的重新组合,产生的是新基因型。2、发生的时间:基因重组发生的时期是:减数分裂中四分体时期同源染色体的非姐妹染色单体之间的局部交换和减数diyi次分裂后期非同源染色体的而重新组合;基因突变发生的时间是在有丝分裂和减数分裂的间期。
基因重组和基因重排的区别
基因重排:通过基因的转座,DNA的断裂错接而使正常基因顺序发生改变。基因重排是一个基因内DNA排列发生改变,而使这个基因改变了,如出现新的基因就是靠这种方法基因重组: 是由于不同DNA链的断裂和连接而产生DNA片段的交换和重新组合,形成新DNA分子的过程。基因重组却是几个不同基因互相改变位置,而使的