世界首例ROSA26基因敲入猪模型诞生

重组克隆筛选（酶切鉴定）

【实验目的】1.掌握质粒提取的基本方法的原理；2.学习和掌握限制性内切酶的使用方法。【实验原理】重组克隆的筛选和鉴定是基因工程中的重要环节之一。不同的克隆载体和相应的宿主系统，其重组克隆的筛选和鉴定方法不尽相同。从理论上说，重组克隆的筛选是排除自身环化的载体、未酶解完全的载体以及非目的DNA片断插入

DNA重组技术：酶切、连接

实验原理: DNA重组技术是用内切酶分别将载体和外源DNA切开，经分离纯化后，用链接酶将其连接，构成新的DNA分子。限制性内切酶能特异地结合于一段被称为限制性酶识别序列的DNA序列之内或其附近的特异位点上,并切割双链DNA。如EcoRⅠ切割识别序列后产生两个互补的粘性末端。 　　5’…G↓A

什么酶重组等温扩增技术？

通过模拟生物体遗传物质自身扩增复制的原理,将来源于细菌,病毒和噬菌体的特定重组酶、外切酶、聚合酶等多酶体系进行改造突变并筛选其功能,通过不同的核酸扩增反应体系进行优化组合,从而获得核心的重组等温扩增体系,建立特殊扩增反应体系,在37-42℃恒温条件下,可将微量DNA/RNA的特异性区段在数分钟内扩增

重组质粒双酶切鉴定

　　既然你的质粒已经提出来了，那么感受态、转化等因素就不必再考虑了。　　你看看双酶切后载体的位置有几条带，如果是两条，那说明酶切不完全，如果是一条，那说明酶切效率没问题。　　pET28a分子量为5.6k，你的插入片段为500bp，如果你的质粒完全切开，载体和插入片段的摩尔比为1：1，质量比就是5.6

外源基因表达新进展，工具猪价值翻倍

近日，中国科学院广州生物医药与健康研究院赖良学课题组在可诱导外源基因表达工具猪培育及其应用取得新进展，成功建立了仅需一轮体细胞克隆，即可获得可稳定遗传的药物调控外源基因表达的工具猪模型。相关研究在线发表于Science China Life Sciences。 高表达外源基因的基因修饰猪在生物医

重组酶聚合酶扩增（RPA）技术简介

核酸检测革命：可替代PCR的犀利技术——RPA重组酶聚合酶扩增（Recombinase Polymerase Amplification，RPA），被称为是可以替代PCR的核酸检测技术。RPA技术主要依赖于三种酶：能结合单链核酸（寡核苷酸引物）的重组酶、单链DNA结合蛋白（SSB）和链置换DNA

湖北农科院用CRISPR制备基因敲除克隆猪

　　来自湖北省农科院畜牧兽医研究所、河南科技大学和中科院水生生物研究所的研究人员，用CRISPR/Cas9系统和Cre/LoxP，敲除了猪初生细胞中肌生成抑制蛋白（MSTN）的一个等位基因，制备了无选择标记的MSTN基因敲除克隆猪。相关研究结果发表在8月17日的《Scientific Reports

细胞重组－无需插入基因

无需插入基因也可实现人体细胞重组    美新发现为细胞重组研究开辟了全新思路 　　美国研究人员发现了一种打开人体成纤维细胞(皮肤细胞)中的干细胞基因的新方法，从而避免了插入额外基因或利用病毒所带来的健康风险。这一成果开辟了细胞重组的新途径，未来通过诱使患者自身细胞修复和再生受损组织，该方法将可用于

遗传重组热点基因研究

        遗传重组(它涉及DNA股的断开和重接以产生新的基因组合)是真核细胞生物中的一种基本的生物学过程。在哺乳动物减数分裂的时候，在这一专门化的细胞分裂过程中，来自母系和父系的染色体被一分为二并产生出精子细胞和卵子细胞，而重组过程则将同源染色体的不同部分连接在了一起，从而导致了后代中的基

基因的重组连接技术

DNA酶切片段的连接是分子生物学实验中又一关键技术，该技术是基因重组，基因改造的重要中间环节。两DNA片段相邻的5'磷酸和3'羟基间可由连接酶催化形成磷酸二酯键，这个连接反应在体外一般都有大肠杆菌DNA联接酶和T4DNA联接酶催化，但分子生物学实验中主要采用T4DNA联接酶，因该酶在

基因重组的相关介绍

　　基因重组指在生物体进行有性生殖的过程中,控制不同性状的基因重新组合。　　其发生在二倍体生物的每一个世代中。每条染色体的两份拷贝在有些位置可能具有不同的等位基因,通过互换染色体间相应的部分,可产生于亲本不同的重组染色体。重组来源于染色体物质的物理交换,减数分裂前期,每条染色体有4份拷贝,所有的4份

简述基因重组的过程

　　由于基因的独立分配或连锁基因之间的交换而在后代中出现亲代所没有的基因组合。　　原核生物的基因重组有转化、转导和接合等方式。受体细胞直接吸收来自供体细胞的DNA片段,并使它整合到自己的基因组中,从而获得供体细胞部分遗传性状的现象,称为转化。通过噬菌体媒介,将供体细胞DNA片段带进受体细胞中,使后者

基因重组有哪些类型？

　　基因重组是指一个基因的DNA序列是由两个或两个以上的亲本DNA组合起来的。基因重组是遗传的基本现象,病3毒、原核生物和真核生物都存在基因重组现象。减数分裂可能发生基因重组。基因重组的特点是双DNA链间进行物质交换。真核生物,重组发生在减数分裂期同源染色体的非姊妹染色单体间,细菌可发生在转化或转导

猪组胺（Histamine）酶联免疫分析

Nature：磷脂酶介导的残酷竞争

　　Umeå大学和华盛顿大学的一项新研究显示，细菌能够在不损害自身细胞膜的基础上，合成特定的酶来降解其竞争者的细胞膜，文章发表在Nature杂志上。这一发现将帮助科学家们利用细菌自身的武器，开发新的抗菌药物。　　细菌在感染过程中，会分泌出对宿主细胞和组织有害的毒素。有趣的是，细菌在与其他细菌竞争时也

巴西培育基因编辑“供体猪”

　　据美国科学促进会（AAAS）旗下eurekalert！网站11日消息，巴西科学家在伦敦举行的一项活动中报告说，他们正尝试用基因编辑技术培育可用于异种器官移植的“供体猪”，以便未来可以扩大供人类移植的器官供应量。目前这一研究仍处于初始阶段，但他们将致力减少异种器官移植排异反应。　　所谓异种移植，即

染色体介导的基因转移

中文名称染色体介导的基因转移英文名称chromosome-mediated gene transfer定　　义以染色体为载体在细胞间转移遗传物质的操作。应用学科遗传学（一级学科），细胞遗传学（二级学科）

转基因技术精子介导法简介

　　精子介导的基因转移是把精子作适当处理后，使其具有携带外源基因的能力。然后，用携带有外源基因的精子给发情母畜授精。在母畜所生的后代中，就有一定比例的动物是整合外源基因的转基因动物。　　同显微注射方法相比，精子介导的基因转移有两个优点：首先是它的成本很低，只有显微注射法成本的1/10。其次，由于它不

基因突变和基因重组的区别

基因重组是指控制不同性状的基因重新组合。能产生大量的变异类型,但只产生新的基因型,不产生新的基因。基因重组发生在有性生殖的减数第一次分裂过程中,即四分体时期,同源染色体的非姐妹染色单体交叉互换和减数第一次分裂后期非等位基因随着非同源染色体的自由组合而自由组合,基因重组是杂交育种的理论基础。基因突变是

基因突变和基因重组的区别

1、两者性质不同，基因重组是两种不同的基因组合在一起，形成新的基因片段。基因突变是指基因组DNA分子发生的突然的、可遗传的变异现象。2、基因突变是基因的从无到有，突变产生新基因。基因重组是原有基因的重新组合，产生的是新的基因型。3、发生的时间不同，基因重组发生的时期是减数分裂中四分体时期同源染色体的

关于基因重组的基因诊断的介绍

　　通过使用基因芯片分析人类基因组,可找出致病的遗传基因。癌症、糖尿病等,都是遗传基因缺陷引起的疾病。医学和生物学研究人员将能在数秒钟内鉴定出最终会导致癌症等的突变基因。借助一小滴测试液,医生们能预测药物对病人的功效,可诊断出药物在治疗过程中的不良反应,还能当场鉴别出病人受到了何种细菌、病毒或其他微

台研发转基因香蕉－猪吃了可预防“神秘猪病”

　　据台湾《中国时报》报道，喂猪吃香蕉，有些怪;但吃了就不会生病，倒是很神奇。台湾大学研究团队把猪生殖与呼吸综合症(PRRSV)病毒基因接种到香蕉细胞，成功研发出基改香蕉(转基因香蕉)，直接当成口服疫苗，猪吃了可以预防仔猪感染俗称神秘猪病或蓝耳病的PRRSV. 　　这项研究成果是成功利用香蕉研发动

Cre重组酶的基本信息

Cre重组酶是细菌噬菌体P1的I型拓扑异构酶,催化loxP位点间的DNA进行位点特异性重组。本酶无需能量辅助因子，Cre-介导的重组很快在底物与反应产物之间达到平衡 [1]  。Cre(Cyclization Recombination Enzyme,即环化重组酶）是来源于噬菌体P1的一种酶蛋白，分

Cre重组酶的结构和来源

Cre重组酶是细菌噬菌体P1的I型拓扑异构酶,催化loxP位点间的DNA进行位点特异性重组。本酶无需能量辅助因子，Cre-介导的重组很快在底物与反应产物之间达到平衡   。Cre(Cyclization Recombination Enzyme,即环化重组酶）是来源于噬菌体P1的一种酶蛋白，分子量约

DNA重组（DNA－recombination）技术：工具酶

一、限制性内切酶限制性内切酶（restriction endonucleases，RE）是其中最重要的工具酶之一。它是一类核酸水解酶，能识别和切割双链DNA分子中的特定核苷酸序列。（一）命名原则限制性内切酶大多从细菌中发现，根据来源进行命名，限制酶的第一个字母（大写，斜体）为宿主菌的属名，第二、第三

猪钙调神经磷酸酶(CaN)酶联免疫分析

猪钙调神经磷酸酶(CaN)酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的：本试剂盒用于测定猪血清，血浆及相关液体样本中钙调神经磷酸酶的含量。实验原理：本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中猪钙调神经磷酸酶水平。用纯化的猪钙调神经磷酸酶抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中加入

基因重组的定义和原理

基因重组指在生物体进行有性生殖的过程中,控制不同性状的基因重新组合。其发生在二倍体生物的每一个世代中。每条染色体的两份拷贝在有些位置可能具有不同的等位基因,通过互换染色体间相应的部分,可产生与亲本不同的重组染色体。重组来源于染色体物质的物理交换,减数分裂前期,每条染色体有4份拷贝,所有的4份拷贝紧密

基因物质的转移和重组

（1）转化：是受体菌直接摄取供体菌提供的游离DNA片段整合重组，使受体菌的性状发生变异的过程。（2）转导：是以温和噬菌体为媒介，将供体菌的基因转移到受体菌内，导致受体菌基因改变的过程。（3）接合：是受体菌和供体菌直接接触，供体菌通过性菌毛将所带有的F质粒或类似遗传物质转移至受体菌的过程。（4）溶原性

CreloxP－基因重组技术

re-loxP 是一种位点特异的基因重组技术，被广泛应用于特异位点的基因敲除、基因插入、基因翻转和基因易位，在真核生物和原核生物中均有广泛应用。Cre-loxP 的基本原理Cre 蛋白是一种重组酶，是causes recombination的缩写，于1981 年从 P1 噬菌体中被发现，属于 λIn

CreloxP－基因重组技术

re-loxP 是一种位点特异的基因重组技术，被广泛应用于特异位点的基因敲除、基因插入、基因翻转和基因易位，在真核生物和原核生物中均有广泛应用。Cre-loxP 的基本原理Cre 蛋白是一种重组酶，是causes recombination的缩写，于1981 年从 P1 噬菌体中被发现，属于 λIn