张学礼等丁二酸细胞工厂构建及高效合成机制解析获进展
丁二酸是一种优秀的平台化合物,在化工、材料、医药、食品领域有着广泛的用途,被美国能源部列为未来12种最有价值的平台化合物之一。作为C4平台化合物,其可用于合成1,4-丁二醇、四氢呋喃、γ-丁内酯以及生物可降解材料聚丁二酸丁二醇酯(PBS)。构建高效生产丁二酸的微生物细胞工厂,将可再生的生物质资源高效转化为丁二酸,是近年来国际上的研究热点。 中国科学院天津工业生物技术研究所的张学礼研究员课题组结合理性遗传改造和进化代谢技术,构建出高效生产丁二酸的大肠杆菌细胞工厂HX024,糖酸转化率达1.36 mol/mol,为理论最大转化率的80%。在此基础上,通过全基因组测序、转录组分析及酶活分析,解析了细胞工厂HX024高产丁二酸的分子机制。研究发现丙酮酸脱氢酶PDH的E3编码基因lpdA发生突变,突变的lpdA基因导致酶活比野生型提高了26倍,解除了NADH对PDH酶活的抑制,从而为厌氧合成丁二酸途径提供更多的还原力。另一方面,丁二......阅读全文
简述2,3二羟基丁二酸的历史
酒石酸盐在历史上对建立有机立体化学起了作用。1769年,舍勒首次从葡萄汁的发酵液内得到游离的无色酒石酸结晶。它的各种立体异构体和外消旋体具有不同的物性。自然界存在的多为右旋体,葡萄汁和其他浆果汁中尤多,故又叫果酸。如用丁烯二酸控制氧化得到的是外消旋体。将上述反应过程中产生的酒石以石灰乳处理生成酒
使用二巯基丁二酸钠的不良反应介绍
1、适应症: 本品用于治疗锑、汞、砷、铅、铜等金属中毒及肝豆状核变性。 2、用法用量: 成人常用量1g,临用配置成10%溶液,立即缓慢静脉注射,10~15分钟注射完毕。 3、不良反应: 约有50%患者在静脉注射本品过程中出现轻度头昏、头痛、四肢无力、口臭、恶心、腹痛、少数患者有皮疹,皮
2,3二羟基丁二酸的基本介绍
酒石酸,即2,3-二羟基丁二酸,是一种羧酸,化学式为C4H6O6。存在于多种植物中﹐如葡萄和罗望子。也是葡萄酒中主要的有机酸之一。 作为食品中添加的抗氧化剂﹐可以使食物具有酸味。酒石酸最大的用途是饮料添加剂,也是药物工业原料。
2,3二羟基丁二酸的用途介绍
酒石酸常用于制药物、媒染剂和鞣剂等,也常用作拆分外消旋碱性化合物的试剂。它也是食品添加剂中的酸味剂,酸感优于苹果酸、乳酸等。它的几种盐都有重要应用,例如实验室中用酒石酸钾钠配制斐林试剂,用于鉴定有机分子结构中醛基官能团。它的钾钠盐又叫罗谢尔盐,其晶体在压力作用下发生极化而使两端表面产生电势差(压
二巯丁二酸的性状及鉴别方法
性状本品为白色或类白色结晶或结晶性粉末;有类似蒜的特F臭。本品在甲醇或乙醇中微溶,在水或三氯甲烷中几乎不溶熔点本品的熔点(通则0612)为190~194℃,熔融时同时分解鉴别(1)取本品约0.2g,加水2ml与碳酸氢钠试液适量使溶解并呈中性,加醋酸铅试液1ml,即生成淡黄色沉淀(2)取本品约0.2g
二巯丁二酸胶囊的类别及贮藏方法
类别同二巯丁二酸。规格0.25g贮藏遮光,密封,在阴凉干燥处保存
二巯丁二酸的检查方法及含量测定
检查酸度取本品1.0g,加水20m1制成混悬液,依法测定(通则0631),pH值应为25~3.0。干燥失重取本品,在105℃干燥至恒重,减失重量不得过1.0%(通则0831)。炽灼残渣取本品1.0g,依法检查(通则0841),遗留残渣不得过0.1%重金属取炽灼残渣项下遗留的残渣,依法检查(通则082
微生物电合成系统利于还原性产物(乳酸、乙醇等)合成
微生物电合成(Microbial electrosynthesis)是微生物利用电能作为还原力将CO2、葡萄糖或其它底物还原合成为各种化学品的过程,其系统包括阳极(对电极)、参比电极和阴极(工作电极)。阴极电子在细胞内被转化为还原当量,为胞内CO2的固定、富马酸还原转化丁二酸等提供还原力。随着温
关于二巯基丁二酸钠药物分析的操作步骤介绍
精密称取干燥至恒重的供试品约0.1g,置100mL量瓶中,加水30mL溶解后,加稀硫酸2mL,精密加入硝酸银滴定液(0.1mol/L)50mL,强力振摇,置水浴中加热2~3分钟,放冷,加水稀释至刻度,摇匀,滤过,精密量取续滤液50mL,置具塞锥形瓶中,加硝酸2mL与硫酸铁铵指示液2mL,用硫氰酸
二巯丁二酸胶囊的检查方法及含量测定
检查干燥失重取本品的内容物适量,在105℃千燥至恒重,减失重量不得过1.0%(通则0831)。其他应符合胶囊剂项下有关的各项规定(通则0103)含量测定取装量差异项下的内容物,混合均匀,精密称取适量(约相当于二巯丁二酸50mg),照二巯丁二酸项下的方法测定。每1ml硝酸银滴定液(0.1mol/L)相
关于二巯基丁二酸钠的药理药动学介绍
1、药理毒理 与二巯丙醇相似,在碳链上带有两个巯基(-SH),能与机体组织蛋白质和酶的巯基竞争结合金属离子,并能夺取已与酶结合的金属离子,从而保护和恢复酶的活性,本品与金属离子结合形成的复合物主要由尿排出。 2、药代动力学 雄性小鼠肌肉注射用35S标记的本品,血药浓度5分钟即达高峰,分布以
简述二巯丁二酸的药代动力学
二巯丁二酸口服易吸收,达峰时间30分钟,在血中约95%与血浆蛋白结合,分布容积较小,半衰期t1/248小时。主要分布在肾脏,依次为肺、肝、心、肠和脾等。铅中毒儿童服用后有肝-肠循环,迅速以原形和代谢物经肾排出。经肾消除速度与血铅浓度成正相关。铅中毒儿童和成年人及健康志愿者的肾清除率分别为每分钟1
科学家改造葡萄糖利用途径生产丁二酸
丁二酸是一种优秀的平台化合物,在化工、材料、医药、食品领域有着广泛的用途,被美国能源部列为未来12种最有价值的平台化合物之一。作为C4平台化合物,其可用于合成1,4-丁二醇、四氢呋喃、γ-丁内酯、2-吡咯烷酮以及生物可降解材料聚丁二酸丁二醇酯(PBS)。构建高效生产丁二酸的人工细胞工厂,将可再生
我国学者首次构建大肠杆菌电能细胞工厂
微生物电合成(Microbial electrosynthesis,MES) 技术是微生物利用电能作为还原力将CO2、葡萄糖或者其它底物还原合成为各种目标化学品的过程。随着温室气体CO2的过量排放, 微生物电合成作为一种绿色可持续和有前途的生物固碳技术,越来越成为科学家们研究的热点。 微生物电
天津工生所在改造葡萄糖利用途径生产丁二酸方面取得进展
丁二酸是一种优秀的平台化合物,在化工、材料、医药、食品领域有着广泛的用途,被美国能源部列为未来12种最有价值的平台化合物之一。作为C4 平台化合物,其可用于合成1,4-丁二醇、四氢呋喃、γ-丁内酯、2-吡咯烷酮以及生物可降解材料聚丁二酸丁二醇酯(PBS)。构建高效生产丁二酸的人工细胞工厂,将
过程工程所在利用生物油发酵生产丁二酸方面取得进展
生物质经过热化学裂解作用产生生物油(bio-oil),bio-oil经过进一步的加工之后,可以转化为车用燃料,有望代替传统的汽油等。与汽油相比,生物油的氧含量高(40-50w/w%),H/C比例低,并且含水量比较大(15 - 30 w/w%)。这些因素造成了生物油的低热值。近来的研究发现
酵母转化实验_乙酸锂转化
实验材料酵母试剂、试剂盒YPDYPAD腺嘌呤半硫酸TE乙酸锂仪器、耗材摇床水浴锅转子离心机培养箱实验步骤1. 在开始实验前2天,接种待转化的酵母菌株的单菌落于5 ml YPD培养基中,于30℃恒温摇床,培养过夜。 2. 转化的前一天晚上,往1 L 无菌烧瓶中加入300 ml YPAD培养基,然后
酵母转化实验_电穿孔转化
实验材料酵母试剂、试剂盒二硫苏糖醇山梨醇仪器、耗材电穿孔仪器电击池水浴锅实验步骤1. 实验前两天,将转化用酵母菌株的单菌落接种于5 ml YPD培养基中,30℃过夜培养至饱和。 2. 转化前一天晚上,在装有500 ml YPD培养基的2 L 无菌烧瓶中接种适量的过夜培养液,于30℃剧烈摇动培养过
细菌的转化的转化效率
同一种细菌也可以由于基因型的改变而改变转化效率。细菌的限制性核酸内切酶能够分解外来的DNA,所以如果用限制酶失活的突变型菌株作为转化受体时可以提高转化效率。通过筛选也可以得到转化效率显著下降的突变型,包括吸附能力、吸收能力和整合能力下降的突变型。某些转化效率降低的突变型对于紫外线格外敏感,这一性质也
关于二巯基丁二酸钠药物分析的仪器设备介绍
1、稀硫酸 取硫酸57mL,加水稀释至1000mL。 2.、硝酸银滴定液(0.1mol/L) 配制:取硝酸银17.5g,加水适量使溶解成1000mL,摇匀。 标定:取在110℃干燥至恒重的基准氯化钠0.2g,精密称定,加水50mL使溶解,再加糊精溶液(1→50)5mL,碳酸钙0.1g与荧
丁二酸二乙酯的红外光谱图的分析
红外比较复杂,不容易分析,一般只是看主要的键的主要峰。如果产品够纯,能够找到所有的震动吸收。丁二酸二乙酯,里面有很多键,有C-H、C-C、酯基。我认为你只需要找到酯基对应的吸收峰就可以了,具体的方法可以找一本红外工具书,然后找对应的吸收。上面说的是通用的方法。丁二酸二乙酯也算是常见的物质,应该有标准
关于2,3二羟基丁二酸的制备方法介绍
制备酒石酸主要有三种方法: 1.DL-酒石酸的制备用富马酸或马来酸进行氧化而得。 2.从乙二醛同氢氰酸进行反应然后酸水解而得。D—酒石酸,在很多果实中或很多植物的其他部分中都有发现,有游离状态存在,也有同钾、钙、镁结合状态存在的。 3.酒石酸从生产酒时生成的粗酒石沉淀物中制备,提取酒石酸氢
质粒的转化及转化子的鉴定实验——电转化法
实验方法原理电转化法:外加于细胞膜上的电场造成细胞膜的不稳定,形成电穿孔,不仅有利于离子和水进入细菌细胞,也有利于孔DNA等大分子进入。同时DNA在电场中形成的极性对于它运输进细胞也是非常重要的。实验材料外源片段与载体的连接产物大肠杆菌感受态细胞试剂、试剂盒X-galAmpLA培养基水抗生素仪器、耗
酵母转化实验_原生质体转化
实验材料酵母试剂、试剂盒YPD山梨醇CaCl2-MEPEG选择性再生琼脂仪器、耗材水浴锅离心机分光光度计培养箱实验步骤1. 在实验前2天,将转化用酵母菌株的单菌落接种到5 ml YPD培养基中,于30℃培养过夜(如果酵母菌株是温度敏感的应在低温下培养)。2. 转化前一天晚上,从5 ml 过夜培养
关于二巯基丁二酸钠的物质检查和含量测定介绍
一、检查 酸碱度 取本品1.0g,加水10mL使溶解,依法测定(通则0631),pH值应为6.0~7.5。 溶液的颜色 取本品1.0g,加水10mL溶解后,溶液应无色,如显色,与棕红色4号标准比色液(通则0901第一法)比较,不得更深。 干燥失重 取本品,以五氧化二磷为干燥剂,在60
酵母转化
· Yeast Transformation (Gietz Lab)LiAc/SS-DNA/PEG Transformation· Yeast Transformation (Breeden Lab)LiAc method· Large-Scale Y
细菌转化
实验概要本实验介绍了细菌转化的两种方法:电击法和热击法。主要试剂LB培养基主要设备电击杯,电击仪,1.5 mL的离心管,摇床,恒温水浴锅实验材料DNA样品或者连接产物,细菌感受态细胞实验步骤1. 电击转化 1) 加DNA样品或者连接产物于融化的细菌感受态细胞中,混匀后加入冰预冷的电击杯中。
DNA转化
DNA转化Chemical Transformation· Transformation of Competent Cells (RbCl2 Method) (Goldberg Lab)Very nice protocol for E. Coli transformation inc
质粒转化
[ 基本原理 ] 将质粒 DNA 导入细菌的过程称为转化( Transformation )。此感受态细菌细胞在 CaCl 2 低渗溶液中膨胀为球状(感受态细菌的制备,见前)。质粒 DNA 与 CaCl 2 形成抗 DNase 羟基 - 磷酸钙复合物黏附于细菌表面,经 42℃ 短时间热冲
拟南芥转化
实验概要本实验以拟南芥为试材介绍了转化及筛选的过程。主要试剂1. 渗透培养基:(1L)1/2xMurashige-Skoog5%蔗糖0. 5克MES用KOH调至pH5. 7再加:10微升lmg/ml的6-BA母液200微升Silwet L-77Top agar0. 1%琼脂PNS或水溶液2. 筛选培