武汉病毒所在活体分子影像研究领域取得进展
中国科学院武汉病毒研究所崔宗强研究员和中科院生物物理研究所张先恩研究员联合研究团队在蛋白-蛋白及RNA-蛋白质相互作用的活体内分子成像方面取得重要进展,创建了远红光波段的荧光片段互补系统(Far-red fluorescence complementation systems),首次实现了动物活体内RNA-蛋白质相互作用的荧光成像,并揭示了HIV-1 mRNA与人PTB蛋白相互作用机制。相关研究结果近日已在线发表于核心期刊Nucleic Acids Research。 蛋白-蛋白及RNA-蛋白质相互作用的活体成像一直是挑战性的研究课题。该研究中,研究团队开发了激发波长在600 nm以上的红色荧光蛋白mNeptune荧光片段互补技术,建立了位于活体成像“光学窗口”的双分子和三分子荧光互补系统。其中双分子荧光互补系统可以用于活细胞及活体内蛋白-蛋白相互作用成像,三分子荧光互补系统可以用于活细胞及活体内RNA-蛋白质之间的相互作......阅读全文
蛋白质相互作用如何驱动细胞凋亡
细胞敢死队 “健康的身体取决于严格按规定执行的细胞分裂和死亡,波鸿“Resolv” 卓越电子顺磁共振光谱研究组Stephanie Bleicken博士说。“当它们失控时,癌症和神经退行性疾病就会发生。”细胞凋亡是身体摆脱损害、老化或不需要的细胞的重要安全机制。 Bcl-2蛋白家族决定细胞何时
蛋白质相互作用组研究获进展
蛋白质相互作用组是指蛋白质之间的基本相互作用,对于大多数物种而言,其在很大程度上都是未知的。因而,研究探索膜蛋白潜在的相互作用组必然是一项极具挑战性的工作。 美国斯坦福大学卡耐基科学研究所Jones等研究人员,使用构建好的分裂泛素化酵母试验系统,从拟南芥中筛选鉴定出超过3000个膜蛋白之间的相
利用-BIAcore-分析相互作用的蛋白质
试剂、试剂盒 EDC氨基乙醇ExtracleanHEPES 缓冲的盐水缓冲液HClNHS小鼠抗-TSH 单克隆抗体兔抗小鼠-Fc 结构域TSHTSH 稀释液仪器、耗材 BIAcore 仪器CM-5 传感芯片实验步骤 第一阶段 捕获表面的制备和结合试验材料缓冲液和溶液将贮存溶液稀释到适当的浓度。ED
RNA-蛋白质的相互作用2
叶绿体mRNA3’末端的体外加工l RNA加工反应1.在1.5ml微量离心管中加入下列反应液:缓冲液IVT(20×) 0.5μl叶绿体蛋白提取物(20μg) Lμl缓冲液E
Far-Western分析蛋白质相互作用实验
实验方法原理 实验材料 待分析的样品编码目的蛋白的 cDNA(已经克隆到体外表达载体中)试剂、试剂盒 1 × SDS 上样缓冲液丽春红 S 染液封闭缓冲液 I封闭缓冲液 II体外转录 翻译试剂盒PBS35S-甲硫氨酸探针纯化缓冲液探针稀释缓冲液仪器、耗材 微量过滤离心柱聚偏氟乙烯(PVDF)/硝化纤
RNA-蛋白质的相互作用1
叶绿体RNA的体外加工与紫外交联分析RNARNA的合成l DNA模板的线性化1.根据供应商的指导用合适的限制酶酶解含有DNA模板(如亚克隆在转录载体如pBluescript®(Stratagene)上的菠菜叶绿体psbA基因)的质粒(Schuster and Gruissem1991)。2
Far-Western分析蛋白质相互作用实验
分析蛋白质混合物 实验方法原理 实验材料 待分析的样品 编码目的蛋白的
Far-Western分析蛋白质相互作用实验
使用 Far Western blot 分析蛋白质相互作用时,目的蛋白固定在一个固体支持膜上,然后用非抗体蛋白探测。 Far Western blot 能够用于识别复杂的蛋白复合物中蛋白质的特异性相互作用。实验材料待分析的样品编码目的蛋白的 cDNA(已经克隆到体外表达载体中)试剂、试剂盒1 × S
利用-BIAcore-分析相互作用的蛋白质
实验方法原理 Biacore是基于表面等离子体共振(SPR)技术来实时跟踪在天然状态下生物分子间的相互作用,无需任何标记物。表面等离子体共振(surface plasmonresonance,SPR)是一种光学现象,在传感芯片发生全反
蛋白质间相互作用研究方法1
确定各种可能与目标蛋白相互作用的蛋白质,“撒大网”l 双杂交和其他双成分系统第一阶段:诱饵-LexA融合蛋白的鉴定诱饵-LexA融合蛋白的构建1.将编码诱饵蛋白的靶DNA克隆到LexA融合载体的多聚接头处,以合成一种框架内的LexA融合基因。确定诱饵序列的羧基端存在翻译终止序列。形成的
研究蛋白质相互作用的新技术
近期,来自多伦多大学Lunenfeld-Tanenbaum Research Institute (LTRI)和Donnelly中心的一组研究人员,开发出一种新技术,可以将细胞内的DNA条形码拼接在一起,以同时搜寻数百万个蛋白质配对,用以分析蛋白质相互作用。相关研究结果发表在4月22日的《Mol
质谱研究蛋白质相互作用(一)
质谱技术已经成为了蛋白质组学研究的主力。这种技术方法能精确的检测多肽,从而帮助研究人员识别并测序多肽分子,分析它们的特征,了解它们如何进行化学修饰的。 但大多数蛋白质并不是单独行动的,一些关键的生物学过程,如DNA 复制、转录、翻译、细胞分裂和能量生成都依赖于大型蛋白复合物的行为,这些蛋白复合
利用-BIAcore-分析相互作用的蛋白质
BIAcore表面等离子共振广泛应用于:(1)研究各种生物分子(如多肽、蛋白质、寡核苷酸,以及病毒、细菌、小分子化合物)之间的相互作用过程;(2)特异性抗体检测或质控、疾病机制、药物筛选;(3)相关药物动力学实时监测、配体垂钓、免疫调节、结构-功能关系等。实验方法原理Biacore是基于表面等离子体
邻位连接技术PLA在蛋白蛋白相互作用,蛋白磷酸化修饰..
邻位连接技术PLA在蛋白-蛋白相互作用,蛋白磷酸化修饰的应用摘要 邻位连接技术(proximityligationassay,PLA),是新研发的一项高灵敏度的蛋白质体外分析技术。该方法利用一对邻位探针(proximityprobes)对靶分子进行双识别,通过连接反应产生可扩增的检测信号,以实时PC
活体电穿孔法介绍
1、什么是活体电穿孔 活体电穿孔法(in vivo electroporation)是将外源基因通过电场作用,导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源基因,可在多种组织器官上应用,并且效率较高。活体电穿孔法的原理很简单,在直流电场作用的瞬间,细胞膜表面产生疏水或亲水的微小通道105~115
活体电穿孔法介绍
1、什么是活体电穿孔活体电穿孔法(in vivo electroporation) 是将外源基因通过电场作用,导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源基因,可在多种组织器官上应用,并且效率较高。活体电穿孔法的原理很简单,在直流电场作用的瞬间,细胞膜表面产生疏水或亲水的微小通道105~115
[体内]活体染色的定义
中文名称[体内]活体染色英文名称vital staining;intravital staining定 义活体组织或细胞经染色后仍可保持生理活性的染色技术。使用毒性小的染料对活体细胞或组织的染色。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
活体电穿孔法介绍
1、什么是活体电穿孔 活体电穿孔法(in vivo electroporation) 是将外源基因通过电场作用,导入动物目标组织或器官。由于这种方法能有效导入外源基因,可在多种组织器官上应用,并且效率较高。活体电穿孔法的原理很简单,在直流电场作用的瞬间,细胞膜表面产生疏水或亲水的微小通
活体染料的功能介绍
中文名称活体染料英文名称vital stain;vital dye定 义可使活细胞呈染色反应的物质。如中性红、尼罗兰。某些染色剂对细胞器染色的具有选择性,如詹纳斯绿可专一性地使线粒体着色。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
线粒体的活体染色实验
实验方法原理活体染色是应用无毒或毒性较小的染色剂真实地显示活细胞内某些结构而又很少影响细胞生命活动的一种染色方法。詹纳斯绿 B是线垃体的专一性活体染色剂。线粒体中细胞色素氧化酶使染料保持氧化状态呈蓝绿色,而在周围的细胞质中染料被还原,成为无色状态。实验材料兔子试剂、试剂盒显微镜手术器材解剖盘平皿载玻
什么是[体内]活体染色?
中文名称[体内]活体染色英文名称vital staining;intravital staining定 义活体组织或细胞经染色后仍可保持生理活性的染色技术。使用毒性小的染料对活体细胞或组织的染色。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞生物学技术(二级学科)
小动物活体成像
小动物活体成像 主要采用生物发光(bioluminescence)与荧光(fluorescence)两种技术。生物发光是用荧光素酶(Luciferase)基因标记细胞或DNA,而荧光技术则采用荧光报告基团(GFP、RFP, Cyt及dyes等)进行标记。利用一套非常灵敏的光学检测仪器,
小动物活体成像
小动物活体成像主要采用生物发光(bioluminescence)与荧光(fluorescence)两种技术。生物发光是用荧光素酶(Luciferase)基因标记细胞或DNA,而荧光技术则采用荧光报告基团(GFP、RFP, Cyt及dyes等)进行标记。利用一套非常灵敏的光学检测仪器,让研究人员能够直
活体染色的实验步骤
1、活细胞的检测一:台酚蓝排除法取一滴细胞悬液,与一滴2%台酚蓝溶液混合,放盖玻片,静置3分钟,显微镜下观察染色情况。活细胞不着色,死细胞呈蓝色。计算活细胞的百分比。2、活细胞的检测二:中性红法1)在小离心管中,用Hanks液对1%中性红水溶液作10倍稀释,1500rpm离心7分钟,取上清液置另一干
江西蜜蜂活体出口蒙古
5月14日,经江西出入境检验检疫局隔离检疫合格的200箱、重8吨的蜜蜂顺利出口蒙古国。据悉,这是我省养殖培育的蜜蜂首次出口到国外,也是我国首次向“一带一路”沿线国家出口活体蜜蜂。 为帮扶我省蜜蜂养殖产业“走出去”,江西出入境检验检疫局及时与蒙古国官方有关部门取得联系,了解蒙古国对出口蜜蜂的检疫
活体肌张力测定系统
加拿大Aurora公司在1997年时为从事肌肉力学研究的科学家提供力传感器和电机。之后因为得到该科研领域人士的认可,逐渐扩大了客户群,所以陆续发展出刺激器,软件和实验装置等等,组合成不同的系统,应用于不用的实验之中。我们的产品可以是独立销售或是整个系列的包装发售,务求达到尽可能完善的客制化。在产品测
活体成像技术的应用
光学活体成像技术主要采用生物发光(bioluminescence)与荧光(fluorescence)两种技术。生物发光是用荧光素酶(Luciferase)基因标记细胞或DNA,而荧光技术则采用荧光报告基团(GFP、RFP, Cyt及dyes等)进行标记。可见光体内成像通过对同一组实验对象在不同时
JCIM:计算提升蛋白质蛋白质相互作用的预测精度
蛋白质-蛋白质相互作用和识别在生物学过程中有着非常重要的作用。尽管结构生物学已经取得了较大的进展,但直接采用实验方法确定蛋白质-蛋白质复合物结构仍然非常困难。分子对接技术是预测蛋白质-蛋白质复合物结构的有效方法。蛋白质-小分子之间的相互作用一般蛋白质受体有结合口袋,相互作用区域比较明确,而蛋白质
蛋白质与水的相互作用:蛋白质的水溶性
蛋白质与水之间的作用力主要是蛋白质中的肽键(偶极-偶极相互作用或氢键),或氨基酸的侧链(解离的、极性甚至非极性基团)同水分子之间发生了相互作用。 影响蛋白质水溶性的应素很多: (1)pH>pI 时,蛋白质带负电荷,pH=pI 时,蛋白质不带电荷,pH 时,蛋白质带正电荷。溶液的pH 低于或高
表面等离子共振技术在蛋白蛋白相互作用的应用(二)
控制软件SensiQ的控制软件在原始反应曲线生成时,同时并实时获取和展示两个通道内的数据。参照通道内的数据被减除,以补偿热漂移、非特异性结合、总折射指数移相等效应,从而得到清晰高质的实验数据。控制软件在反应曲线上简单加入报告点,用来确定样品注入后产生的结合反应。报告点的添加可在实验中的任何时候由人工