科学家设计出一种基因载体可帮助减肥
据在线发表于《自然—材料学》上的一项研究显示,一种特定针对肥胖小鼠体内脂肪细胞的肽链类基因载体可以携带投递一种治疗基因,从而帮助减肥。虽然其在人身上的可用性和安全性还需进一步实验才能确认,但是这种分子复杂物或能够用于治疗肥胖以及肥胖引发的相关代谢症状。 肥胖通常是过度饮食造成的,能量都储存在脂肪组织中。因此,脂肪组织是各种肥胖治疗手段的目标之一,但是,在基因投递机制中,由于细胞很难被转染,所以基因疗法此前无法应用于脂肪细胞上。 Yong-Hee Kim等人设计出一种基因载体,其组成包括一段短链肽、一组以脂肪细胞为目标的基因序列和天然氨基酸——精氨酸。他们发现,这种基因载体能够通过与脂肪细胞表面的一种蛋白相结合的方式,有选择的将遗传材料投递至成熟的脂肪细胞。他们注意到,将基因载体注入到肥胖小鼠体内会导致基因载体与脂肪血管进行特异结合,之后被脂肪细胞内化并产生基因表达。该治疗基因(其成分为一段能够让脂肪酸结合蛋白-4沉默的短......阅读全文
细胞治疗与基因治疗载体纯化
细胞治疗是将细胞转移到一个病人身上,其目的是改善或治疗疾病。细胞治疗策略包括分离和转移特定的干细胞群,执行效应细胞,诱导成熟细胞成为多能性细胞,以及成熟细胞的重新编程。 基因治疗是一种新的治疗手段,是指将外源正常基因导入靶细胞,以纠正或补偿因基因缺陷和异常引起的疾病,以达到治疗目的。即将外源基
细胞替代治疗和基因治疗的载体
胚胎干细胞最诱人的前景和用途是生产组织和细胞,用于“细胞疗法”,为细胞移植提供无免疫原性的材料。任何涉及丧失正常细胞的疾病,都可以通过移植由胚胎干细胞分化而来的特异组织细胞来治疗。如用神经细胞治疗神经退行性疾病(帕金森病、亨廷顿舞蹈症、阿尔茨海默病等),用胰岛细胞治疗糖尿病,用心肌细胞修复坏死的
干货|细胞治疗与基因治疗载体纯化
细胞治疗是将细胞转移到一个病人身上,其目的是改善或治疗疾病。细胞治疗策略包括分离和转移特定的干细胞群,执行效应细胞,诱导成熟细胞成为多能性细胞,以及成熟细胞的重新编程。图片来源于网络 基因治疗是一种新的治疗手段,是指将外源正常基因导入靶细胞,以纠正或补偿因基因缺陷和异常引起的疾病,以达到治疗目
基因克隆的载体类型
①在宿主细胞中能保存下来并能大量复制,且对受体细胞无害,不影响受体细胞正常的生命活动。②有多个限制酶(Restriction enzymes)切点,而且每种酶的切点最好只有一个,如大肠杆菌pBR322就有多种限制酶的单一识别位点,可适于多种限制酶切割的DNA插入。③含有复制起始位点,能够独立复制;通
基因载体的相关介绍
基因载体本身是DNA,除根据其来源分为质粒载体、噬菌体载体、病毒载体等外,还可以根据它们的主要用途分为克隆载体与表达载体。根据它们的性质分为温度敏感型载体(temperature sensitive vector)、融合型表达载体、非融合型表达载等。 基因载体(vector) 的作用是运载目的
如何阅读基因载体图谱?
基因载体是基因工程的核心,也是基因治疗中强有力的生物工具,我们先来认识和阅读载体图谱吧。 载体分类及载体组成元件 载体分类 1、按属性分类:病毒载体和非病毒载体 病毒载体是一种常见的分子生物学工具,可将遗传物质带入细胞,原理是利用病毒具有传送其基因组进入目的细胞,进行感染的分子机制。
如何阅读基因载体图谱
基因载体是基因工程的核心,也是基因治疗中强有力的生物工具,我们先来认识和阅读载体图谱吧。 一、载体分类及载体组成元件 载体分类 1、按属性分类:病毒载体和非病毒载体 病毒载体是一种常见的分子生物学工具,可将遗传物质带入细胞,原理是利用病毒具有传送其基因组进入目的细
如何阅读基因载体图谱
基因载体是基因工程的核心,也是基因治疗中强有力的生物工具,我们先来认识和阅读载体图谱吧。 一、载体分类及载体组成元件 载体分类 1、按属性分类:病毒载体和非病毒载体 病毒载体是一种常见的分子生物学工具,可将遗传物质带入细胞,原理是利用病毒具有传送其基因组进入目
痘苗载体转染细胞实验
实验方法原理 将感兴趣的外源基因亚克隆到质粒转移载体上,外源基因的两端为痘苗病毒基因组非必需基因片段。随后,将重组质粒转染病毒感染的细胞,痘苗病毒基因组与质粒上同源的部分发生同源重组。应用适当的筛选方案,经几轮噬斑纯化,从细胞裂解物中获得重组病毒。实验材料 pSCll/pRB21/pSC65/pLW
痘苗载体转染细胞实验
CaCl2 法 DOTAP 法 实验方法原理 将感兴趣的外源基因亚克隆到质粒转移载体上,外源基因的两端为痘苗病毒基因组非必需基因片段。随后,将重组质
基因工程的载体1
引 言基因克隆的本质是使目的基因在特定的条件下得到扩增和表达,而目的基因本身无法进行复制和表达、不易进入受体细胞、不能稳定维持,所以就必须借助于“载体”及其“寄主细胞”来实现。作为基因克隆的载体必须具备以下特性:⑴载体必须是复制子。⑵具有合适的筛选标记,便于重组子的筛选。⑶具备多克隆位点(MCS),
如何阅读基因载体图谱?(一)
基因载体是基因工程的核心,也是基因治疗中强有力的生物工具,我们先来认识和阅读载体图谱吧。 一、载体分类及载体组成元件载体分类1、按属性分类:病毒载体和非病毒载体病毒载体是一种常见的分子生物学工具,可将遗传物质带入细胞,原理是利用病毒具有传送其基因组进入目的细胞,进行感染的分子机制。可发生于完整活体或
如何阅读基因载体图谱?(三)
三、改造载体 1、改造启动子:一般在过表达载体中CMV属于广谱型的强启动子,具体可根据实验需求,选用不同启动子,尤其是对于AAV载体构建时选用组织特异性启动子。 启动子名称启动子大小组织特异性ALB2.4kb肝脏特异性CAG944bp广泛表达的强启动子CamKIIa1.2kb大脑皮层和海马神经元特异
基因工程的载体2
2、pUC质粒载体 1987年,J.Messing和J.Vieria采用MCS技术在pBR322基础上构建的。 结构: (1)来自于pBR322的Ori (2)氨苄青霉素的抗性基因(ampr)。 但核苷酸序列发生
基因工程的载体3
⑷基因组成 lDNA至少包括61个基因,大多基因按功能相似性成簇排列,其中一部分为噬菌体生命活动的必须基因,另一部分约1/3为非必须区段。 3. l噬菌体载体的类型 插入型 (Insertion vectors )
目的基因片段与载体连接
1.目的学会DNA片段的体外连接技术。2.原理在Mg2+和ATP存在下,T4 DNA连接酶能催化载体分子的粘性末端与外源DNA的相同粘性末端联接成重组DNA分子。3.器材旋涡混合器,微量移液取样器,移液器吸头,1.5ml 微量离心管,双面微量离心管架,台式离心机,干式恒温气浴。易生物仪器库:http
目的基因片段与载体连接
实验概要本实验介绍了目的基因片段与载体连接的操作步骤,有助于学会DNA片段的体外连接技术。实验原理在Mg2 和ATP存在下,T4 DNA连接酶能催化载体分子的粘性末端与外源DNA的相同粘性末端联接成重组DNA分子。主要试剂1. T4 DNA 连接酶2. 连接酶缓冲液3. 无菌ddH2O主要设备1.
如何阅读基因载体图谱?(二)
二、选择和准备载体选择载体主要依据构建的目的,同时还要考虑载体中应有合适的限制酶切位点等。如果构建的目的是要表达一个特定的基因,则要选择合适的表达载体。选用哪种载体,还是要结合目的基因及载体特点以实验目的为准绳。 载体选择主要考虑下述3点: 1、构建DNA重组体的目的,克隆扩增/表达表达,选择合适的
脂肪细胞分类
脂肪细胞(fat cell)分为白色脂肪细胞和褐色脂肪细胞白色脂肪细胞单泡脂肪细胞,细胞中央有一大脂滴,胞质呈薄层,位于细胞周缘,包绕脂滴,核扁,在边缘,细胞呈空泡状。多泡脂肪细胞内散在许多小脂滴,线粒体大而丰富,核圆形,位于细胞中央。褐色脂肪细胞主要存在于颈后,背侧一带,可以降低体内脂质含量,含有
细胞质对基因载体—染色体的调节作用介绍
受精的细胞质中的内含物的分布(色素、卵黄粒、线粒体等)是不均匀的,对染色体的影响也不一样。如小麦瘿蚊的个体发育中,瘿蚊卵跟果蝇相似,其卵的后端含有一种特殊的细胞质—极细胞质,在极细胞质区域的核内,保持了全部40条染色体,以后分化为生殖细胞。但位于其他细胞质区域的核丢失了32条染色体,只保留了8条,将
关于干细胞作为疾病基因治疗的载体的介绍
干细胞是对疾病进行基因治疗的理想载体。造血干细胞具有自我更新、多向分化重建长期造血、采集和体外处理容易等特点。因此是基因治疗最理想的载体细胞之一,以此为基础的基因治疗,在重症免疫缺陷、遗传性疾病、恶性肿瘤、造血干细胞保护、AIDS等领域具有广阔的应用前景。 骨髓间充质干细胞易于外源基因的导入和
简述脂肪干细胞和脂肪细胞的共培养
将准备好的脂肪干细胞和脂肪细胞分别置于Transwell 的上室和下层中,脂肪干细胞与脂肪细胞的个数之比分别为1:5,1:1,2:1 和5:1(4 组分别命名为A、B、C 和D 组)进行共培养,其中每孔中脂肪细胞的数量均为1×105 个。以上每组均做平行实验(n=3)。
脂肪来源干细胞ASCs特征及分化实验—脂肪干细胞脂肪分化
实验材料脂肪干细胞试剂、试剂盒脂肪诱导培养基脂肪细胞生长培养基PBSA仪器、耗材培养瓶实验步骤(a)吸去培养基。(b)加人PBSA润洗细胞。(c)加入脂肪诱导培养基,将培养瓶放回温箱。(d)三天后,将诱导培养基更换成脂肪细胞生长培养。注意事项其他培养基配方:成脂诱导培养基:DMEM/F12 1×、胎
固定化细胞技术载体要求及常用载体介绍
①载体应是亲水的,疏水载体与有机溶剂相同的变性影响。②载体也是要求有一定的机械强度和稳定性。③常用的载体包括:1、天然高分子(纤维素、琼脂糖、淀粉、葡萄糖凝胶、胶原及其衍生物等)2、合成高聚物(尼龙。多聚氨基酸等)3、无机支持物(多孔玻璃、金属氧化物等)
可视化基因载体的介绍
据介绍,微环DNA被认为是最具潜力的基因治疗载体,而如何实现微环DNA的高效递送以及载体非侵入性生物学信息的获取是当前亟待解决的问题。聚乙烯亚胺(PEI)作为阳离子基因传递载体,已广泛应用于生物医学研究。但由于高分子量PEI在提高基因转染效率的同时也增加了细胞毒性,其在体内的应用受到制约。如何实
关于基因载体的分类相关介绍
基因载体,即gene delivery或gene vector,是作为基因导入细胞的工具。犹如火箭能把卫星射向九天一样,基因载体可以把目的基因送入靶细胞内,然后将目的基因释放出来,有的目的基因还可以整合到细胞核中,从而发挥目的基因的特定功能。 1. 基因载体是把基因导入细胞的工具,它的作用是①
真核基因表达载体的构建
提高目的基因在哺乳动物细胞中表达的策略:1、DNA水平:增加基因拷贝数(1)高拷贝载体;(2)基因共扩增;2、转录水平:利用强启动子、增强子,可诱导启动子,如CMV、Tet;3、翻译水平:优化翻译起始序列和非编码区序列。本篇文章来源于网络,如有异议请联系我们,我们将在3个工作日内作出处理。
人工病毒载体可用于基因编辑
《自然·通讯》30日报告了一种制作人工病毒样载体的方法,所制载体能进入人类细胞执行特定任务,如基因编辑。这种大容量、可定制化的纳米材料为未来基因疗法和定制化医疗带来新希望。病毒是一种高效的生物“机器”,能够快速复制和组装后代。自然的人类病毒,如慢病毒属,此前曾经过改造在动物中递送治疗性的DNA或RN
基因治疗的载体有哪些?
病毒载体病毒会与他们的宿主细胞结合,引入它们的遗传物质作为其宿主细胞复制循环的一部分。这种遗传物质包含病毒的基本信息,比如如何产生这些病毒的副本,如何破坏人体的正常生产机制以满足该病毒的需要。宿主细胞将执行这些指令并产生更多的病毒副本,以至于越来越多的正常细胞将受到感染。某些类型的病毒将自己的基因插
基因克隆的载体必要条件
⑴载体必须是复制子。⑵具有合适的筛选标记,便于重组子的筛选。⑶具备多克隆位点(MCS),便于外源基因插入。⑷自身分子量较小,拷贝数高。⑸在宿主细胞内稳定性高。