上海交通大学华修国等首次分离出鸽冠状病毒

来自健康报的消息,上海交通大学农业与生物学院人兽共患病与比较医学团队博士生周俊芳、硕士生钱华冬等,在华修国教授指导下,率先从患胰腺炎的鸽子身上分离出冠状病毒并加以鉴定。该论文《胰腺炎鸽冠状病毒的分离与鉴定》继2006年在美国兽医学会会刊《美国兽医研究》杂志发表后,又被推选在该杂志2007 年第一期封面刊登。 冠状病毒家族属RNA病毒,可对人类和动物健康造成较大危害,如人类的SARS根据其血清学特点和核苷酸序列差异,分为冠状病毒和环曲病毒两个属。冠状病毒共同的特点是基因重组率非常高,常导致病毒的毒力和宿主特异性发生变化,是国际学术界研究的热点。 上海交大人兽共患病与比较医学团队通过研究,在国际上率先发现并报道鸽冠状病毒感染,揭示了相关冠状病毒的进化与变异、跨种间感染与传播机理等,从而间接证明SARS是由冠状病毒变异引起的。 华修国、......阅读全文

真核细胞总RNA的提取与鉴定

【原理】RNA的制备与分析对于了解基因表达在转录水平上的调节是必不可少的,也是最常使用的通过cDNA途径分析细胞基因表达的前提。通常一个典型的哺乳动物细胞约含10-5μg RNA,但其中大部分为rRNA及由tRNA,而mRNA仅占1%~5%。虽然mRNA大小和序列各不相同,但在多数真核细胞m

外源性RNA的转录反应预测RNA病毒的广谱抗病毒药

  所有RNA病毒都通过与正常运输细胞RNA转录本不同的过程将其基因组传递到目标宿主细胞中。来自正常的细胞RNA转录的运输。病毒RNA的传递最多。进入大多数细胞的病毒DNA的运输因此触发了先天的抗病毒防御机制,将病毒RNA识别为异物。反过来,病毒已经进化出了破坏这些防御的机制,让它们在其中茁壮成长。

真菌的分离与鉴定的简介

  真菌的分离与鉴定是对真菌进行分离培养然后根据菌落的特征和镜下形态,结构以确定菌种。必要时通过生化反应、鉴别试验、动物接种等方法,以明确菌种

微生物分离培养和鉴定

1.培养基的选择用自动血培养分析仪时选用相应的血培养瓶,如需氧+厌氧,需氧+高渗等。2.分离和鉴定 当观察有细菌生长时或血培养仪阳性报警时,应及时作如下检验:(1)涂片染色镜检,结果及时与临床联系;(2)转种血平板、巧克力平板、厌氧血平板或其他特殊培养基等分离培养纯菌再进行鉴定;(3)同时做药敏试验

质粒DNA的分离、纯化和鉴定

材料、设备及试剂  一、材料  含质粒的E. coli DH5α或JM系列菌株,1.5ml塑料离心管(又称eppendorf管),离心管架。  二、设备  微量取液器(20μl,200μl,1000μl), 台式高速离心机,恒温振荡摇床, 高压蒸汽消毒器(灭菌锅), 涡旋振荡器, 电泳仪,琼脂糖平板

厌氧菌的分离、培养及鉴定(二)

4.1.3 分离 (1)编号 取五支无菌水试管,分别用记号笔标明10-1、10-2……10-5。 (2)稀释 在无氧无菌的超净厌氧手套箱中的条件下,用无菌注射器吸取1mL混合均匀的液体样品,加入装有预还原生理盐水的厌氧试管中,用震荡器将其混合均匀,制成10-1稀释液。用无菌注射器吸取1mL10-1稀

酵母菌如何分离及鉴定

酵母菌能够进行有氧呼吸和无氧呼吸,因此它在有氧和无氧的环境下都能存活,可以利用这一点把它分离出来。再者酵母菌是真核生物,可以用抗生素把它和细菌分离开来。

新城疫病原分离与鉴定

当临床诊断有新城疫发生时,应从发病禽或死亡禽采集病料,进行病原分离、鉴定和毒力测定。1 样品的采集、保存及运输1.1 样品采集1.1.1 采集原则。采集样品时,必须严格按照无菌程序操作。采自于不同发病禽或死亡禽的病料应分别保存和标记。每群至少采集5只发病禽或死亡禽的样品。1.1.2 样品内容发病禽:

厌氧菌的分离、培养及鉴定(一)

一 摘要: 1.1 实验内容: 厌氧菌的分离、培养及鉴定; 1.2 目的: 1 掌握厌氧菌的分离、培养及活菌计数的一般方法。 了解厌氧菌菌鉴定的一般方法。 2 复习并巩固平时所学的微生物知识与技能。 3 培养独立思考、设计和动手实验的能力。 二 介绍: 厌氧微生物在自然界分布广泛,种类繁多,其生理作

皮肤干细胞的分离与鉴定

  皮肤干细胞的分离  皮肤干细胞的分离主要利用发现的相对特异的表面标志(如整合素家族成员和角蛋白家族成员)结合流式细胞术进行。  皮肤干细胞的鉴定  利用皮肤干细胞一些相对特异的标志建立了一系列的皮肤干细胞鉴别方法。最初,一些学者是从研究细胞黏附特性入手的。他们发现,在表皮基底细胞定向分化时,它会

信使RNA的mRNA提取分离纯化

真核细胞的mRNA分子最显著的结构特征是具有5’端帽子结构(m7G)和3’端的Poly(A)尾巴。绝大多数哺乳类动物细胞mRNA的3’端存在20-30个腺苷酸组成的Poly(A)尾,通常用Poly(A+)表示。这种结构为真核mRNA的提取 ,提供了极为方便的选择性标志,寡聚(dT)纤维素或寡聚(U)

真核细胞总RNA的分离提取

RNA是基因表达产物,由以下几类分子组成,rRNA(占细胞总RNA的80%~85%)、tRNA和核内小分子RNA(占10~15%)、mRNA(占1~5%)。其中mRNA是分子生物学的主要研究对象,分离制备mRNA是克隆基因,分析基因表达以及建立cDNA文库的首要步骤。真核细胞总RNA分离提取的目的是

信使RNA的提取、分离和纯化

真核细胞的mRNA分子最显著的结构特征是具有5’端帽子结构(m7G)和3’端的Poly(A)尾巴。绝大多数哺乳类动物细胞mRNA的3’端存在20-30个腺苷酸组成的Poly(A)尾,通常用Poly(A+)表示。这种结构为真核mRNA的提取,提供了极为方便的选择性标志,寡聚(dT)纤维素或寡聚(U)琼

病毒RNA复制的主要方式

  一病毒含正链RNA,先合成复制酶,复制后合成其他蛋白质进行装配。如噬菌体Qb及灰质炎病毒。  二病毒含负链和复制酶,先合成正链,再合成病毒蛋白和复制病毒RNA。如狂犬病毒。  三病毒含双链RNA和复制酶,如呼肠孤病毒。先复制正链,再翻译成病毒蛋白,最后合成负链,形成双链RNA分子。  四致癌RN

病毒-RNA复制的方式介绍

( 1)含正链RNA(+)的病毒(例如,噬菌体Q):(+)RNA充当mRNA,合成蛋白质。以(+)RNA为模板进行复制合成(-)RNA,再以(-)RNA为模板合成(+)RNA组装成病毒颗粒。( 2)含负链RNA(-)的病毒(例如狂犬病毒):由(-)RNA合成(+)RNA,再由(+)RNA合成蛋白质、

植物病毒(plant-viruses)RNA提取

   大多植物病毒RNA为单链RNA,并且其极性与mRNA极性相同,植物病毒RNA提取较为简单,一般使用酚氯仿即可获得满意结果。   一、材料   提纯TMV病毒液(10mg/ml)。   二、设备   冷冻台式离心机,低温真空干燥仪,电泳仪,电泳槽。   三、试剂   TE

病毒RNA提取实验方法

1,用异硫氰酸胍提取提病毒的详细步骤,可参考(我提过N次做定量PCR都没问题):1.取 200ul样品数+阴性对照+阳性对照个1.5ml灭菌eppendorf管2.加600ul异硫氰酸胍,然后加入对照和样品,再加200ul氯仿,颠倒混匀3.13000rpm离心15min4.在第3步离心快结束时,另取

病毒-RNA复制的几种方式

( 1)含正链RNA(+)的病毒(例如,噬菌体Q):(+)RNA充当mRNA,合成蛋白质。以(+)RNA为模板进行复制合成(-)RNA,再以(-)RNA为模板合成(+)RNA组装成病毒颗粒。( 2)含负链RNA(-)的病毒(例如狂犬病毒):由(-)RNA合成(+)RNA,再由(+)RNA合成蛋白质、

病毒-RNA复制的几种方式

( 1)含正链RNA(+)的病毒(例如,噬菌体Q):(+)RNA充当mRNA,合成蛋白质。以(+)RNA为模板进行复制合成(-)RNA,再以(-)RNA为模板合成(+)RNA组装成病毒颗粒。( 2)含负链RNA(-)的病毒(例如狂犬病毒):由(-)RNA合成(+)RNA,再由(+)RNA合成蛋白质、

​双链RNA病毒的特点

双链RNA病毒有两个特点:一是它的基因组为10-12条双链RNA分子;二是它有双层衣壳,而没有囊膜。病毒的RNA-RNA 聚合酶存在于髓核中,在该聚合酶的作用下病毒基因组转录正链RNA,它们自髓核逸出。它们既能作为mRNA,又能作为病毒基因组的模板。MRNA翻译结构蛋白,装配内层衣壳后,正链RNA进

RNA病毒的基本概念

RNA病毒是病毒的一种,属于一级。 它们的遗传物质是核糖核酸(RNA ribonucleic acid)。通常其核酸是单链的(ssRNA single-stranded RNA),也有双链的(dsRNA double-stranded RNA).单链RNA病毒根据他们的翻译意义可分为正译、负译和双译

2.8.2-乙型脑炎病毒-RNA-提取

试剂、试剂盒酚氯仿异戊醇乙醚KAc乙醇DEPC 处理水TBE 缓冲液上样液KCI。仪器、耗材透析袋实验步骤一 材料与设备1) 酚:氯仿:异戊醇 (25:24:1),2) 乙醚3)2.5mol/LKAc4) 乙醇5)DEPC 处理水6)TBE 缓冲液7〕上样液:40% 甘油,0.4% 啡叮溴红的 TB

双链RNA病毒的特点

双链RNA病毒有两个特点:一是它的基因组为10-12条双链RNA分子;二是它有双层衣壳,而没有囊膜。病毒的RNA-RNA 聚合酶存在于髓核中,在该聚合酶的作用下病毒基因组转录正链RNA,它们自髓核逸出。它们既能作为mRNA,又能作为病毒基因组的模板。MRNA翻译结构蛋白,装配内层衣壳后,正链RNA进

病毒RNA提取实验方法

实验概要本实验旨在掌握病毒RNA提取的实验方法,包括用异硫氰酸胍提取禽流感病毒RNA、TRIzol LS提取病毒RNA及Trizol法提禽流感病毒RNA。实验步骤1. 用异硫氰酸胍提取禽流感病毒RNA1) 取200ul样品数 阴性对照 阳性对照个1.5ml灭菌eppendorf管; 2) 加600u

2.8.1-流感病毒-RNA-提取

试剂、试剂盒10×RSB 溶液10%SDS蛋白酶 KlOXLiCI 溶液RSB 饱和的酚氯仿异戊醇2mol L 乙酸钠 无水乙醇TSE 溶液LiCl 缓冲液平衡酚TSE 饱和酚4mol LLiCL实验步骤一 材料与设备1. 酚提法1)10×RSB 溶液:O.Olmol/LTris,O.OOlmol/

2.8.3-甲型肝炎病毒-RNA-提取

试剂、试剂盒TSES 缓冲液TSES 缓冲液饱和酚氯仿辛醇乙酸钾乙醇缓冲液 Almol LNaH2P04 缓冲液氯胺 T 溶液Na125I5 mmol LNa2S2O5lOOmmol LKINET 缓冲液酵母 tRNA蔗糖纤维素柱平衡液三重蒸馏水0.1mol LNaOH5 mmol LEDTA0.1

RNA和DNA病毒的区别

DNA病毒和RNA病毒的区别,主要是病毒核酸的类型不同,DNA病毒的病毒核酸是DNA,RNA病毒的病毒核酸是RNA。RNA病毒的复制过程比较独特,由于遗传信息直接保存在RNA上,因此复制过程通常发生在细胞质内。RNA病毒是用它们自己的RNA复制酶来对基因组进行复制,但是DNA病毒基因组的复制发生在细

双链RNA病毒的复制

虽然同为双链核酸分子,但双链RNA的复制方式和双链DNA不同,双链RNA不是半保留复制,而是全保留复制,复制需要经过mRNA中间体。双链RNA病毒有两个特点,一是它的基因组为10-12条双链RNA分子;二是它有多层衣壳,而没有囊膜。病毒的RNA-RNA 聚合酶存在于髓核中,在该聚合酶的作用下病毒双链

一种快速鉴定RNA-质量的方法

提 要: 目的 建立一种快速鉴定RNA 完整性的方法。方法 在常规琼脂糖凝胶电泳的基础上,结合甲醛变性琼脂糖凝胶电泳加以改进而成。结果 提取的总RNA 用此方法电泳后可得到28S、18S、5. 8S(5S) 三条清晰的rRNA 条带。结论 此方法可以达到对RNA 完整性进行快速鉴定的目的。 随着分子

双歧杆菌的分离、培养及鉴定

园友sakuyaandy:我们培养双歧杆菌是在厌氧培养箱中进行培养,如果没有的话,用厌氧瓶或厌氧缸都可以。培养基你用的是怎么改良的呢?我们是在MRS里面加入了L-半胱氨酸,不过这都是培养用的培养基,如果你需要区分菌落可以用X-GAL改良MRS可以起到鉴别做用,具体文献名称为园友jerrycs:厌氧微