上海交通大学华修国等首次分离出鸽冠状病毒
来自健康报的消息，上海交通大学农业与生物学院人兽共患病与比较医学团队博士生周俊芳、硕士生钱华冬等，在华修国教授指导下，率先从患胰腺炎的鸽子身上分离出冠状病毒并加以鉴定。该论文《胰腺炎鸽冠状病毒的分离与鉴定》继2006年在美国兽医学会会刊《美国兽医研究》杂志发表后，又被推选在该杂志2007 年第一期封面刊登。 冠状病毒家族属RNA病毒，可对人类和动物健康造成较大危害，如人类的SARS根据其血清学特点和核苷酸序列差异，分为冠状病毒和环曲病毒两个属。冠状病毒共同的特点是基因重组率非常高，常导致病毒的毒力和宿主特异性发生变化，是国际学术界研究的热点。 上海交大人兽共患病与比较医学团队通过研究，在国际上率先发现并报道鸽冠状病毒感染，揭示了相关冠状病毒的进化与变异、跨种间感染与传播机理等，从而间接证明SARS是由冠状病毒变异引起的。 华修国、......阅读全文
质粒DNA的分离、纯化和鉴定－（三）
操作步骤 一、 细菌的培养和收集 将含有质粒pBS的DH5α菌种接种在LB固体培养基（含50μg/ml Amp）中, 37℃培养12-24小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB液体培养基（含50μg/ml Amp）中,37℃振荡培养约12小时至对数生长后期。 二、 质粒DNA
病原性球菌(pathogenic－cocci)的分离鉴定
病原性球菌主要包括3个属，即葡萄球菌属、链球菌属、和奈瑟球菌属。目的要求1、掌握葡萄球菌属的分离培养与鉴定方法 、菌落特点、菌体形态及染色性2、掌握链球菌属的分离培养与鉴定方法 、菌落特点、菌体形态及染色性材料浓汁标本（痰、分泌物、穿刺物）或血、尿、胆汁标本等革兰染液，血液培养基，兔血浆、生理盐水等
血浆清蛋白的分离纯化与鉴定
实验概要1．掌握蛋白质的分离技术2．掌握分段盐析、凝胶层析及蛋白质醋酸纤维薄膜电泳的原理及操作方法3．掌握电泳方法检测分离效果实验原理 不同的蛋白质的分子量、溶解度、以及在一定条件下带电的情况有所不同，可以更据这些性质的差别，分离及提纯各种蛋白质。利用硫酸铵分段盐析法将血清中的清蛋
亚细胞结构的分离与鉴定1
细胞由各种亚细胞结构组成。其重要的研究手段之一是分离纯化亚细胞组分，观察它们的结构或进行生化分析。离心技术是实现这一目标的基本手段。一般认为，转速为10～25Kr/min的离心机称为高速离心机；转速超过25Kr/min，离心力大于89Kg者称为超速离心机。目前超速离心机的最高转速可达100Kr/mi
双歧杆菌的分离、培养及鉴定
我们培养双歧杆菌是在厌氧培养箱中进行培养,如果没有的话,用厌氧瓶或厌氧缸都可以.培养基你用的是怎么改良的呢?我们是在MRS里面加入了L-半胱氨酸,不过这都是培养用的培养基,如果你需要区分菌落可以用X-GAL改良MRS可以起到鉴别做用,具体文献名称为园友jerrycs: 厌氧微生物在自然
核酸纯化仪－应用领域
几乎在每个实验室，与生物分子相关的分离纯化工作都是十分重要，且必不可少的。但要对多个样品进行纯化还是相当困难的，不仅需要选择合适的纯化技术，而且工作量也特别大，很难满足当前飞速发展对高通量样品进行提取纯化的需求。TIANLONG NP968磁珠提取纯化系统是使用磁珠法技术，可同时操作1-32个样品，
RNA的制备(mRNA的分离和RNA酶活性的控制)3
A、细胞裂解a．单层细胞的裂解a)吸出培养液，以7ml用冰预冷的无钙镁离子磷酸缓冲盐溶液PBS冲洗细胞培养皿内的单层细胞，重复1次，将平板置于冰上直至所有单层细胞冲洗完毕。也可将平板放在一块铝板上，再将铝板置于冰盘上。b)直径为90mm的培养皿需加0.5ml RNA提取缓冲液， 并使之遍布整个平板的
RNA的制备(mRNA的分离和RNA酶活性的控制)2
（一）实验程序如不谨慎操作，外源性RNA酶可以通过下述途径污染RNA制品：（１）玻璃制品、塑料制品和电泳槽 灭菌的一次性使用的塑料制品基本上无RNA〈, /SPAN〉酶，可以不经预处理直接用于制备和贮存RNA。实验室用的普通玻璃器皿和塑料制品经常有RNA酶法染，使用前必须于180℃干烤８小时或更
RNA分离与分析实验_用丙烯酰胺尿素凝胶纯化RNA
实验材料RNA试剂、试剂盒TBE 缓冲液丙烯酰铵溶液过硫酸铵水溶液RNA 染色液仪器、耗材玻璃板实验步骤1. 准备下列溶液：TBE 缓冲液：Tris 碱 54 g，硼酸 27.5 g，0.5 mol/L EDTA ( pH 8.0) 20 ml，溶解并加水至 1000 ml。当发现贮存液有白色沉淀
RNA的免疫共沉淀分离及检测
RNA的免疫共沉淀分离及检测非编码RNA的发现使得RNA领域再次成为了生命科学研究关注的焦点。因为RNA是一种不稳定的生物大分子，绝大多数的RNA都需要与特定的RNA结合蛋白质结合形成RNA/蛋白复合物才能稳定存在于细胞中；不仅如此，RNA与RNA结合蛋白之间的动态关联贯穿和伴随了RNA的转录合成、
TRlzol－试剂一步分离－RNA－实验
实验方法原理 TRIzol 试剂是分离细胞和组织总 RNA 的即用型试剂，该试剂含有酚和硫氰酸胍单相溶液是 Chomczynski 和 Sacchi 进一步分离 RNA 方法的进一步改进。在匀浆或裂解样本过程屮，TRIzol 试剂不仅可裂解细胞，而且可保持 RNA 的完整。加入氯仿后离心
从革兰氏阳性菌中分离RNA
实验材料 10 ml 细菌培养物 试剂、试剂盒 DEPC 处理的水 裂解缓冲液 酚
信使RNA提取分离的操作步骤介绍
1．将0.5-1.0g寡聚（dT）-纤维悬浮于0.1M的NaOH溶液中。 2．用DEPC处理的1ml注射器或适当的吸管，将寡聚（dT）-纤维素装柱0.5-1ml，用3倍柱床体积的DEPC H2O洗柱。 3．使用1×上样缓冲液洗柱，直至洗出液pH值小于8.0。 4．将RNA溶解于DEPC H
RNA的免疫共沉淀分离及检测
RNA的免疫共沉淀分离及检测非编码RNA的发现使得RNA领域再次成为了生命科学研究关注的焦点。因为RNA是一种不稳定的生物大分子，绝大多数的RNA都需要与特定的RNA结合蛋白质结合形成RNA/蛋白复合物才能稳定存在于细胞中；不仅如此，RNA与RNA结合蛋白之间的动态关联贯穿和伴随了RNA的转录合成、
分离DNA和RNA主要方法有哪些
盐析法 DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度的NaCl溶液中溶解度不同 利用这一特点 选择适当的盐浓度就能使DNA充分溶解 而使杂质沉淀 或者相反 以达到分离目的 DNA在NaCl溶液中的溶解度先增大后减小 在DNA溶解度最低时 DNA从溶液中析出 而其他杂质还留在溶液中 达到粗提取的目的酶水解法 采
绿色叶片植物叶线粒体RNA的分离
实验方法原理 利用差速离心，将线粒体从其他亚细胞结构中分离出来，再用蔗糖梯度离心进一步纯化得到线粒体。用核糖核酸酶 A 处理从中去除叶绿体 RNA，然后加入高浓度硫氰酸胍灭活核糖核酸酶 A，硫氰酸胍作为一种蛋白变性剂可非常有效的灭活核糖核
TRlzol－试剂一步分离－RNA－实验
实验方法原理 TRIzol 试剂是分离细胞和组织总 RNA 的即用型试剂，该试剂含有酚和硫氰酸胍单相溶液是 Chomczynski 和 Sacchi 进一步分离 RNA 方法的进一步改进。在匀浆或裂解样本过程屮，TRIzol 试剂不仅可裂
RNA的免疫共沉淀分离及检测
RNA的免疫共沉淀分离及检测 非编码RNA的发现使得RNA领域再次成为了生命科学研究关注的焦点。因为RNA是一种不稳定的生物大分子，绝大多数的RNA都需要与特定的RNA结合蛋白质结合形成RNA/蛋白复合物才能稳定存在于细胞中；不仅如此，RNA与RNA结合蛋白之间的动态关联贯穿和伴随了RNA的转录合
绿色叶片植物叶线粒体RNA的分离
实验方法原理 利用差速离心，将线粒体从其他亚细胞结构中分离出来，再用蔗糖梯度离心进一步纯化得到线粒体。用核糖核酸酶 A 处理从中去除叶绿体 RNA，然后加入高浓度硫氰酸胍灭活核糖核酸酶 A，硫氰酸胍作为一种蛋白变性剂可非常有效的灭活核糖核酸酶 A。通过 CsCl 梯度离心，线粒体 RNA 沉
TRlzol－试剂一步分离－RNA－实验
实验方法原理TRIzol 试剂是分离细胞和组织总 RNA 的即用型试剂，该试剂含有酚和硫氰酸胍单相溶液是 Chomczynski 和 Sacchi 进一步分离 RNA 方法的进一步改进。在匀浆或裂解样本过程屮，TRIzol 试剂不仅可裂解细胞，而且可保持 RNA 的完整。加入氯仿后离心，溶液则分为水
从革兰氏阳性菌中分离RNA
实验材料 10 ml 细菌培养物试剂、试剂盒 DEPC 处理的水 裂解缓冲液 酚氯仿异戊醇 5mol LNaCl 冰冷的无水乙醇 70% 乙醇 DNA 酶消化缓冲液 TE 缓冲液仪器、耗材 离心机 带微探头的超声仪实验步骤 一 材料与设备1)10 ml 细菌培养物，2)DEPC 处理的水。3) 裂解
关于小RNA病毒的基本介绍
重要的有脊髓灰质炎病毒 [1] ，又称小儿麻痹病毒，大多引起隐性感染，只有约1%产生明显的临床症状；甲型肝炎病毒(HAV)，又称72型病毒，病毒由粪便排出，有传染性；猪水疱病病毒(SVDV)，引起猪口腔粘膜、鼻头、乳房、蹄部发生水疱；猪脑脊髓炎病毒(PEV)，主要病变为中枢神经灰质坏死，病死率9
为什么RNA病毒疫苗较难开发
RNA的复制过程中，其错误修复机制的酶的活性很低很低，几乎是没有的，所以其编译很快；而疫苗是要根据病毒的固定基因或蛋白进行开发制作的。所以RNA病毒疫苗较难开发！
为什么RNA病毒疫苗较难开发
因为RNA不稳定，很容易变异。而且很多RNA病毒的聚合酶没有校正功能，就更容易变异了。
禽流感病毒RNA提取protocol
1，用异硫氰酸胍提取1.取200ul样品数+阴性对照+阳性对照个1.5ml灭菌eppendorf管2.加600ul异硫氰酸胍，然后加入对照和样品，再加200ul氯仿，颠倒混匀3.13000rpm离心15min4.在第3步离心快结束时，另取同样多eppendorf管，加入400ul -20度预冷的异丙
双链RNA病毒的复制介绍
双链RNA病毒有两个特点，一是它的基因组为10-12条双链RNA分子；二是它有双层衣壳，而没有囊膜。病毒的RNA-RNA 聚合酶存在于髓核中，在该聚合酶的作用下病毒基因组转录正链RNA，它们自髓核逸出。它们既能作为mRNA，又能作为病毒基因组的模板。MRNA翻译结构蛋白，装配内层衣壳后，正链RN
病毒RNA提取实验方法（protocol）
1，用异硫氰酸胍提取提禽流感病毒的详细步骤，可参考（我提过N次做定量PCR都没问题）：1.取200ul样品数+阴性对照+阳性对照个1.5ml灭菌eppendorf管2.加600ul异硫氰酸胍，然后加入对照和样品，再加200ul氯仿，颠倒混匀3.13000rpm离心15min4.在第3步离心快结束时，
中国农业科学院Journal－of－Virology解析传染性法氏囊病病毒
来自中国农业科学院哈尔滨兽医研究所的研究人员发表了题为“Voltage-dependent anion channel 1 interacts with ribonucleoprotein complexes to enhance infectious bursal disease virus
甲醛变性凝胶电泳鉴定RNA实验
凝胶电泳法 实验方法原理 琼脂糖凝胶电泳作为鉴定大分子物质经常被使用, 但含有RNase 酶活性, 因此要使RNase 变性而不使RNA 变性的, 故采用甲
甲醛变性凝胶电泳鉴定RNA实验
实验方法原理 琼脂糖凝胶电泳作为鉴定大分子物质经常被使用, 但含有RNase 酶活性, 因此要使RNase 变性而不使RNA 变性的, 故采用甲醛变性凝胶电泳鉴定RNA。实验材料 RNA试剂、试剂盒 MOPS乙酸钠EDTA蔗糖EDTA溴酚蓝二甲苯青甲醛仪器、耗材 电泳槽电泳仪实验步骤 1. 制备凝