细胞培养用液的配制具体步骤与消毒方法2

六.血清的灭活细胞培养常用的是小牛血清,新买来的血清要在56℃ 水浴中灭火30分钟后,再经过抽滤方可加入培养基中使用。七.HEPES溶液HEPES的化学全称位羟乙基呱嗪乙硫磺酸(N’-a-hydroxythylpiperazine-N’- ethanesulfanic acid )。对细胞无毒性作用。它是一种氢离子缓冲剂,能较长时间控制恒定的pH范围。使用终浓度为10-50mmol/L,一般培养液内含20mmol /LHEPES即可达到缓冲能力。 1mol/L HEPE缓冲液配制方法如下: 准确称取HEPTS 238.3g,加入新鲜三蒸水定容至1L。过滤除菌,分装后4℃保存。 注意:因为现在市售HEPES为约10g包装的小瓶,所以可根据实际情况灵活配制,但是要保证培养液内HEPES的终浓度仍然为20m mol/L 。如:称取4.766克HEPES溶于20ml三蒸水中,过滤除菌后可完全(20ml)加入......阅读全文

细胞培养实验——悬浮细胞培养

实验材料冻存 HeLa S3 细胞试剂、试剂盒70% 乙醇完全 MEM-10胰酶/EDTA仪器、耗材旋转瓶完全培养基-525 cm2 组织培养瓶C02 培养箱Sorvall H-6000A 转子100 ml 或 200 ml 通气旋转瓶和带滤膜的瓶盖实验步骤1. 将含有冻存 HeLa S3 细胞的安

动物细胞培养——细胞培养介绍

实验方法原理目的细胞培养的评判性检查。应用检查常规维持的一致性;在复苏、传代、冻存前培养状况的评估;对新的或实验性情形反应的评估;确认明显的污染物。训练目标熟悉不同类型和不同密度的细胞培养的外观;数码或胶片相机的使用;灭菌物品和污染物间的区别,健康的和不健康的培养物间的区别;培养物生长阶段的评估。监

细胞培养技术的细胞培养方式

高等生物是由多细胞构成的整体,在整体条件下要研究单个细胞或某一群细胞在体内(in vivo)的功能活动是十分困难的。但是如果把活细胞拿到体外(in vitro)培养进行观察和研究,则要方便得多。活细胞离体后要在一定的生理条件下才能存活和进行生理活动,特别是高等动植物细胞要求的生存条件极其严格,稍有不

细胞培养实验——贴壁细胞培养

实验材料冻存细胞试剂、试剂盒70% 乙醇PBS胰酶/EDTA仪器、耗材25 cm2 和 150 cm2 组织培养瓶CO2 培养箱实验步骤1. 将含有冻存细胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解冻。2. 用 70% 乙醇对安瓿的顶端进行消毒,打开安瓿,用吸管将细胞转移到含有 5 ml 起始培养基的 25 cm

细胞培养

细胞培养是一种常用的实验室技术,其中原核或真核细胞在受控条件下生长。大规模哺乳动物细胞培养被广泛用于生物技术中,特别是用于生产疫苗,蛋白质,酶,抗体和激素。细胞培养还用于许多研究**域,特别是在制药**域,其中将细胞用作研究许多疾病(例如癌症或心脏病)的模型。细胞用于靶标鉴定和验证,基于细胞的测定法

巨噬细胞培养常用细胞培养器皿介绍

常用细胞培养器皿有培养瓶、培养板、培养皿等。常准备量是使用量的三倍。器皿应选择透明度好,无毒,利于细胞粘附和生长的材料,常用一次性聚苯乙烯材料制品或中性硬度玻璃制品。常用的器皿有下面几种。巨噬细胞1、液体储存瓶:用于储存各种配制好的培养液、血清等液体,常用规格有500ml、250ml、100ml等几

细胞培养细胞培养的具体步骤

一、细胞复苏将冻存细胞从液氮中取出后,在37℃水浴锅内不断摇动促进其融化。移入15ml离心管中,加入10ml预热的DMEM完全培养基,轻轻吹匀,离心,2000rpmX2min,弃上清液。加入10ml DMEM培养基清洗,弃上清液。加入10ml DMEM完全培养基,轻轻吹打,接种于10cm盘中,在含5

小鼠肝细胞培养实验——细胞培养技术

实验方法原理直接从生物体内获取组织细胞进行的首次培养称为原代细胞培养。原代培养是建立各种细胞系的第一步,是从事培养工作的人员应熟悉和掌握的最基本的技术。根据培养方法不同分为组织块培养法和单层细胞培养法。实验材料小鼠试剂、试剂盒DMEMDMEM胰酶PBS仪器、耗材饭盒纱布小剪子小镊子大镊子大烧杯平皿研

猪甲状腺细胞培养实验_细胞培养技术

实验方法原理由于甲状腺富含纤维性组织,所以甲状腺的消化分离一般采用胶原酶与胰蛋白酶联合消化法,用单一的胰蛋白酶消化效果一般;促甲状腺激素(TSH)是培养甲状腺细胞必备的,它能够起到促进甲状腺细胞生长的作用。实验材料猪甲状腺试剂、试剂盒F-12培养基胎牛血清胰蛋白酶胶原酶Ⅳ牛 TSH仪器、耗材眼科剪滴

骨骼肌细胞培养和肌细胞培养

骨骼肌细胞培养 1.杀死动物,无菌取大腿肌组织,切成0.3~0.5厘米小块。 2.用不含钙镁离子的Hanks液配的0.25%胰蛋白酶消化,无菌纱网或纱布滤过,合成培养基加10%小牛血清培养,为促进分化可加1%的胎汁。 3.细胞接种量为2×106/皿,接种在胶原或明胶的底物上能促进细胞分化

特殊细胞培养实验_球体细胞培养实验

实验方法原理大多数培养细胞都具有贴附在底物上生长成单层细胞的性质,如细胞长成片之后,让细胞片与底物脱离,更换到使细胞不易贴附的底物上继续生长时,则细胞片能卷聚成球体形,成为球体培养。实验材料细胞试剂、试剂盒Hanks培养液胰蛋白酶仪器、耗材吸管实验步骤1.  琼脂铺底的培养瓶30 ml无菌培养瓶,每

大鼠肝星状细胞培养实验——细胞培养技术

大鼠肝星状细胞原代培养可以:(1)用于细胞保种;(2)用于分子生物学研究;(3)用于基因治疗研究。实验方法原理将小鼠的肝细胞从机体中取出,经胰酶、螯合剂(常用EDTA)处理,分散成单细胞,置合适的培养基中培养,使细胞得以生存、生长和繁殖。实验材料雄性 SD 大鼠试剂、试剂盒戊巴比妥钠小牛血清DMEM

细胞培养细胞培养的一般过程

一、准备工作准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,准备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试,具体内容可参阅有关文献。二、取材在无菌

细胞培养实验

贴壁细胞培养 悬浮细胞培养             实验方法原理 实验材料

细胞培养方法

一、准备工作 准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试,具体内容可参阅有关文献。 二、取材

细胞培养实验

贴壁细胞培养 悬浮细胞培养             实验方法原理 实验材料 冻存细胞

LSCM细胞培养

细胞培养上述生化介导的质粒转染方法是瞬时导入。这种方法使细胞能暂时但高水平表达目的蛋白。一般在转染后 1 ~ 4d 内可获得大量的表达蛋白。此外还有物理方法(电转方法和显微注射)和病毒介导的方法。当细胞用常规方法很难转染(如原代细胞),或转染试剂的毒性较大,这时可使用显微注射 (microinjec

细胞培养FAQ

1 冷冻管应如何解冻? 取出冷冻管后, 须立即放入37 °C 水槽中快速解冻, 轻摇冷冻管使其在1 分钟内全部融化, 并注意水面不可超过冷冻管盖沿, 否则易发生污染情形。另冷冻管由液氮桶中取出解冻时, 必须注意安全, 预防冷冻管之爆裂。2 细胞冷冻管解冻培养时, 是否应马上去除DMSO? 除少数特别

细胞培养方法

一、准备工作   准备工作对开展细胞培养异常重要,工作量也较大,应给予足够的重视,推备工作中某一环节的疏忽可导致实验失败或无法进行。准备工作的内容包括器皿的清洗、干燥与消毒,培养基与其他试剂的配制、分装及灭菌,无菌室或超净台的清洁与消毒,培养箱及其他仪器的检查与调试,具体内容可参阅有关文献。 二、取

细胞培养实验

实验方法原理 实验材料 冻存细胞试剂、试剂盒 70% 乙醇PBS胰酶/EDTA仪器、耗材 25 cm2 和 150 cm2 组织培养瓶CO2 培养箱实验步骤 1. 将含有冻存细胞的安瓿放入 37℃ 水浴中解冻。2. 用 70% 乙醇对安瓿的顶端进行消毒,打开安瓿,用吸管将细胞转移到含有 5 ml 起

细胞培养资料

第一章 细胞培养的基本原理与技术现代生物技术一般认为包括基因工程技术、细胞工程技术、酶工程技术和发酵工程技术,而这些技术的发展几乎都与细胞培养有密切关系,特别是在医药领域的发展,细胞培养更具有特殊的作用和价值。比如基因工程药物或疫苗在研究生产过程中很多是通过细胞培养来实现的。基因工程乙肝疫苗很多是以

胶质细胞培养

取材及胶质细胞的混合培养1、P2 SD大鼠经低温麻醉后以碘酒和75%乙醇消毒,无菌操作下,断头放入预冷的D-Hanks液中,在解剖显微镜下取大脑皮层并除去脑膜。2、剪碎组织成1mm3大小,加入胰酶-EDTA消化液并放入37℃孵箱内消化20min,中间摇晃一次。3、随后用滴管吸出组织转移到装有预冷的M

细胞培养用途

  基础细胞培养基通常指基础合成培养基,主要成分为氨基酸、维生素、碳水化合物、无机盐、辅助物质。据不同细胞和研究目的,选用合适培养基,还可补加新成分。如杂交瘤中常用DMEM加丙酮酸钠、2-巯基以醇(相当于胎牛血清可透析组分的作用)。细胞培养的用途包括:1、科学研究:药物研究开发与基础研究药物研究与开

巨噬细胞培养

巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群,在条件适宜下可生活2-3周,多用做原代培养,难以长期生存。巨噬细胞也建有无限细胞系,大多来自小鼠,如P331、S774A.1、RAW309Cr.l等,均获

HUVEC细胞培养

1、实验室设计细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响,要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养工作包括:工作液配制、无菌操作(采样)、温育、无菌处理,细胞和用品贮存等。细胞培养室的设计实

细胞培养方法

细胞培养方法:1.玻璃吸管和玻璃培养瓶的消毒:高压蒸汽灭菌15分钟以上;2)干烤消毒140度2小时以上;2.无菌工作台先清洗后用75%酒精擦拭干净,紫外线照射40分钟以上;各种培养板照射3小时以上;3.培养基(pH7.2)和血清配制好后要做无菌试验:将血清按10%加入培养基内,用无菌的玻璃离心管或玻

细胞培养技术

实验概要细胞培养是指从体内组织取出细胞摹拟体内出现环境,在无菌、适当温度及酸碱度和一定营养条件下,使期生长繁殖,并维持其结构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物为单个细胞或细胞群。主要设备细胞培养设施和基本条件  1、实验室设计  细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染

MDCK细胞培养

本人具有数年的细胞培养经验,期间经历了无数次的失败和成功,回想起来有苦也有甜,现在把中国疾病预防控制中心和我自己的经验结合起来,制作成MDCK细胞培养SOP,欢迎大家参阅:一、目的MDCK细胞培养是分离流感病毒及相关研究实验的基本技术。疾控中心的所有技术人员,必须按照本文件相关的操作规程进行操作。二

细胞培养用水

在组织或细胞培养过程的许多步骤中都使用水。它是缓冲液和介质的主要成分,用于溶解添加剂和药物,以及冲洗生物反应器,塑料制品和玻璃制品。因此,水质可能在细胞培养实验结果中起重要作用。细菌,酵母或霉菌对细胞培养物的污染一直是一个令人担忧的问题,科学家竭尽全力避免它们。这些污染通常是肉眼或通过光学显微镜可见

羊水细胞培养

羊水中含有胎儿脱落的上皮细胞,可在体外培养用以分析胎儿染色体核型。目前国内外大都采用腹腔羊膜穿刺术,妊娠12-30周的羊水细胞均可培养成功。羊膜腔穿刺取羊水行染色体分析,最佳孕周为16周左右。因此时羊水增长快,羊水中细胞较多,细胞培养易于生长,而且不易损伤胎儿。国内多数选择的穿刺时间在妊娠的第16-