补体介导的细胞毒试验

一、实验原理带有特异抗原的靶细胞(如正常细胞、肿瘤细胞、病毒感染细胞)与相应抗体结合后,在补体的参与下,引起靶细胞膜损伤,导致细胞膜的通透性增加、细胞死亡。染料(例如:伊红-Y、台盼蓝)可通过细胞膜进入细胞内使细胞着色,故可用于指示死细胞或濒死细胞,而活细胞不着色。此即补体依赖性细胞毒试验,利用细胞毒试验可以检查细胞膜抗原,亦可鉴定抗体的特异性。本实验中,Thy-1 抗原是小鼠胸腺T 细胞特异的表面抗原,在体外利用抗小鼠Thy-1 的单克隆抗体通过补体的协同作用,可杀伤95%以上的胸腺细胞。二、实验材料1. 解剖器械(眼科剪、眼科镊)、平皿、80~100 目不锈钢网2. 试管、lml 吸量管、尖吸管3. 载玻片、盖玻片4. C57BL/6J 小鼠5. 含5%NBS 的冷Hank's 液6. 抗小鼠Thy-1 的单克隆抗体(最适稀释度)7. 补体(豚鼠新鲜血清并经小鼠胸腺细胞吸收,预先测定效价并稀释为最佳稀释度)8. 1%......阅读全文

补体介导的细胞毒实验——补体介导法

细胞毒实验可应用于:(1)检查细胞膜抗原;(2)鉴定抗体的特异性。实验方法原理带有特异抗原的靶细胞(如正常细胞、肿瘤细胞、病毒感染细胞)与相应抗体结合后,在补体的参与下,引起靶细胞膜损伤,导致细胞膜的通透性增加、细胞死亡。染料(例如:伊红-Y、台盼蓝)可通过细胞膜进入细胞内使细胞着色,故可用于指示死

补体介导的细胞毒实验

实验方法原理带有特异抗原的靶细胞(如正常细胞、肿瘤细胞、病毒感染细胞)与相应抗体结合后,在补体的参与下,引起靶细胞膜损伤,导致细胞膜的通透性增加、细胞死亡。染料(例如:伊红-Y、台盼蓝)可通过细胞膜进入细胞内使细胞着色,故可用于指示死细胞或濒死细胞,而活细胞不着色。此即补体依赖性细胞毒试验,利用细胞

补体介导的细胞毒实验

            实验方法原理 带有特异抗原的靶细胞(如正常细胞、肿瘤细胞、病毒感染细胞)与相应抗体结合后,在补体的参与下,引起靶细胞膜损伤,导致细胞膜的通透性增加、细胞死亡。染料(例如:伊红-Y、台盼蓝)可通过细胞膜进入细胞内使细胞着色,故可用于指示死细胞或

补体介导的细胞毒试验

1、实验原理带有特异抗原的靶细胞(如正常细胞、肿瘤细胞、病毒感染细胞)与相应抗体结合后,在补体的参与下,引起靶细胞膜损伤,导致细胞膜的通透性增加、细胞死亡。染料(例如:伊红-Y、台盼蓝)可通过细胞膜进入细胞内使细胞着色,故可用于指示死细胞或濒死细胞,而活细胞不着色。此即补体依赖性细胞毒试验,利用细胞

补体介导的细胞毒试验

一、实验原理带有特异抗原的靶细胞(如正常细胞、肿瘤细胞、病毒感染细胞)与相应抗体结合后,在补体的参与下,引起靶细胞膜损伤,导致细胞膜的通透性增加、细胞死亡。染料(例如:伊红-Y、台盼蓝)可通过细胞膜进入细胞内使细胞着色,故可用于指示死细胞或濒死细胞,而活细胞不着色。此即补体依赖性细胞毒试验,利用细胞

补体介导的细胞毒实验

            实验方法原理 带有特异抗原的靶细胞(如正常细胞、肿瘤细胞、病毒感染细胞)与相应抗体结合后,在补体的参与下,引起靶细胞膜损伤,导致细胞膜的通透性增加、细胞死亡。染料(例如:伊红-Y、台盼蓝)可通过细胞膜进入细胞内使细胞着色,故可用于指示死细胞或

补体介导的细胞毒试验

【原理】  补体介导的细胞毒试验(complement  dependent  cytotoxicity   test)的原理是特异性抗体与细胞膜上相应抗原结合后,在补体的参与下,可产生细胞膜损伤,细胞死亡;不带相应抗原的细胞仍然存活。利用染料排斥实验判定淋巴细胞死活状态,活细胞不着色,具有折光性,

补体介导的细胞毒实验

实验方法原理 带有特异抗原的靶细胞(如正常细胞、肿瘤细胞、病毒感染细胞)与相应抗体结合后,在补体的参与下,引起靶细胞膜损伤,导致细胞膜的通透性增加、细胞死亡。染料(例如:伊红-Y、台盼蓝)可通过细胞膜进入细胞内使细胞着色,故可用于指示死细胞或濒死细胞,而活细胞不着色。此即补体依赖性细胞毒试验,利用细

细胞技术专题:补体介导的细胞毒试验

1、实验原理带有特异抗原的靶细胞(如正常细胞、肿瘤细胞、病毒感染细胞)与相应抗体结合后,在补体的参与下,引起靶细胞膜损伤,导致细胞膜的通透性增加、细胞死亡。染料(例如:伊红-Y、台盼蓝)可通过细胞膜进入细胞内使细胞着色,故可用于指示死细胞或濒死细胞,而活细胞不着色。此即补体依赖性细胞毒试验,利用细胞

补体测定

实验材料 血清试剂、试剂盒 磷酸盐缓冲液生理盐水NaClNa2HPO4KH2PO4硫酸镁溶液仪器、耗材 水平离心机水浴箱分光光度计实验步骤 一、材料准备 浓度为1×10 g/ml 的绵羊红细胞配制(1)取经稀释洗涤后的绵羊红细胞配成较5%稍浓的细胞悬液。(2)取50%细胞悬液1ml,加于14ml蒸馏

什么是补体?

补体是一种血清蛋白质,存在于人和脊椎动物血清及组织液中,不耐热,活化后具有酶活性、可介导免疫应答和炎症反应。可被抗原-抗体复合物或微生物所激活,导致病原微生物裂解或被吞噬。可通过三条既独立又交叉的途径被激活,即经典途径、旁路途径和凝集素途径。

补体型概述

   位于HLA-Ⅲ类中的补体基因,不仅两个C4基因紧密连锁,构成C4单体型,而且与另外两个补体基因BF*与C2*也紧密连锁,构成更大的单体型,Alper等命名其为补体型(complotype)。Alper等人提出,在不足100kb的DNA分段上居有4个补体基因,从理论上计算,基因间的随机交换率在1

补体的介绍

  补体(complement,C)是存在于正常人和动物血清与 组织液中的一组经活化后具有酶活性的蛋白质。早在19世纪末Bordet即证实,新鲜血液中含有一种不耐热的成分,可辅助和补充特异性抗体,介导免疫溶菌、溶血作用,故称为补体。补体是由30余种可溶性蛋白、膜结合性蛋白和补体受体组成的多分子系统,

补体的介绍

  补体(complement,C)是存在于正常人和动物血清与组织液中的一组经活化后具有酶活性的蛋白质。10%的补体在血清中的含量相对稳定,不因免疫应答而增加,仅在某些病理情况下才会发生波动。补体系统的基本组成包括9种血清蛋白成分,按发现的先后顺序而分别命名为C1~C9。补体第4成分(C4)是补体经

补体激活途径

①经典途径是以结合抗原后的IgG或IgM类抗体为主要激活剂,补体C1~C9共11种成分全部参与了激活途径。除了抗原抗体复合物外,还有许多因子可激活此途径,如非特异性凝集的Ig、细菌脂多糖、一些RNA肿瘤病毒、双链DNA等。②替代途径又称旁路途径。由病原微生物等细胞壁成分提供接触面直接激活补体C3,然

补体的结构

  补体的 分子生物学进展迅猛,对补体系统的活化机理和功能得到了分子水平的解释。各种补体分子的cDNA  已克隆成功,绝大多数补体蛋白的基因在染色体上的定位已被确定,并通过对它们的核苷酸序列和 氨基酸序列的分析,发现许多补体蛋白的基因在染色体上相连锁,在结构上具有共同性。 补体蛋白结构的共同性  通

补体的特征

  补体的遗传学特征学特征表现为多种补体分子具有遗传的多态性在染色体上密切连锁的,形成不同的基因家族。  补体的遗传多态性  补体的 遗传多态性(genetic polymorphism)是指在同一集团中,两个或两个以上非连续性突变体或 基因型(称型态),以极小的频率有规律地同时发生的现象。补体成分

抗补体(anticomplement)实验检测与补体结合的CIC

血清中有免疫复合物存在时,可与其本身的C1(内源性C1)结合。将被检血清56℃加热1h,能破坏结合的C1,空出补体结合位点。当加入豚鼠血清(外源性C1)及指示系统(致敏SRBC)时,CIC又可与外源性C1结合,使致敏SRBC的溶血被抑制。 1、试剂 (1)缓冲生理盐水 NaCl l7.00g,Naa

补体激活途径介绍

补体激活途径之一。指微生物或外源异物直接激活C3,在B因子、D因子和备解素参与下,形成C3转化酶与C5转化酶,最终形成攻膜复合物。

原发性补体缺陷

原发性补体缺陷病是临床医学检验技士/技师/主管技师考试复习需要了解的检验基础知识,医学|教育网搜集整理了相关内容与考生分享,希望给予大家帮助! 在五类原发性免疫缺陷病中,补体缺陷的发病率最低。补体系统的各种成分均可发生缺陷,其中以C1q缺陷、C2缺陷(常染色体隐性遗传)和C1抑制剂缺陷(常染色

补体的活化途径

1.经典途径:以抗原-抗体复合物结合C1q启动激活,是抗体介导的体液免疫应答的主要效应方式。2.MBL途径:是甘露聚糖结合凝集素(MBL)结合至细菌启动的途径。其诱导物或激活剂是机体的炎症反应急性期时相性蛋白产生的MBL和C反应蛋白等,后者与病原体结合而启动绕过C1的MBL途径。3.旁路途径:是通过

补体的灭活

  使血液制品,特别是血清中的补体失去活性,不灭活补体的血液制品具有溶血作用,通过56度30分钟灭活后,补体失去活性,对细胞就没有破坏作用了。

补体结合试验

 补体结合试验(complementfixationtest,CFT)是用免疫溶血机制做指示系统,来检测另一反应系统抗原或抗体的试验。早在1906年Wasermann就将其应用于梅毒的诊断,即著名的华氏反应。这一传统的试验经不断改进,除了用于传染病诊断和流行病学调查以外,在一些自身抗体、肿瘤相关以原

关于补体缺乏症性补体缺乏(非常少见)的简介

  C1、C2、C3缺乏的临床综合征类似于系统性红斑狼疮,或某些其他结缔组织病,所不同者是不出现抗DNA抗体。患者对感染易感性并无明显增高,如果发生肺炎,则多继发于败血症。C1q缺乏常伴随于低丙种球蛋白血症。C1抑制物缺乏很常见,临床表现为遗传性血管性水肿,呼吸道黏膜水肿可以是致命性的。与感染有关的

病毒介导基因转移

病毒介导基因转移:前述的化学和物理方法都是通过传染方式基因转移。病毒介导基因转移(viral mediatedgene transfer)是通过转换方式完成基因转移,即以病毒为载体(vector),将外源目的基因通过基因重组技术,将其组装于病毒上,让这种重组病毒去感染受体宿主细胞,这种病毒称为病毒运

脂质体介导的真核细胞转染实验——质体介导短暂表达

用脂质体将DNA导人各种真核细胞的效率比其他转染方法更高,重复性更好。实验材料哺乳动物细胞试剂、试剂盒质粒DNA完全培养基氯化铯DMEM仪器、耗材培养皿培养箱聚苯乙烯管实验步骤1.  按5×105细胞/孔的量在六孔板中接种指数期生长的细胞,在37℃ 5%CO2培养箱中 培养过夜,直至细胞80%汇片。

补体旁路的概念

中文名称补体旁路英文名称alternative complement pathway定  义不经C1、C4、C2活化,而是在B因子、D因子和P因子参与下,直接由C3b与激活物结合启动补体酶促连锁反应,产生一系列生物学效应和最终发生细胞溶解作用的补体活化途径。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞免疫(

什么是补体活化途径?

补体活化途径(activating pathway of complements),也称作补体系统。补体的各成分为抗原抗体复合体以及其他成分,离子等相继会合连锁被活化,结果引起免疫细胞溶解(immune cytolysis)和免疫溶血(immune haemolysis),也就是细胞和细菌、红血球等

补体结合反应(2)

由于在实际应用时补体有一部分损失,故需酌量增加一些,通常取其次高的一管补体量称为1个使用单位。在下例中:   1 个确定单位 =0.1ml 1:30 稀释的补体。 1 个使用单位 =0.12ml1:30 稀释的补体。 4 )补体的稀释 若使每 0.2ml 补体含 2 个使用单位,可照

补体受体的概念

中文名补体受体外文名complement receptor存在于多形核白血球、巨噬细胞途    径补体活化途径的第一途径补体受体 complement receptor存在于不同细胞膜表面,能与补体激活过程所形成的活性片段相结合,介导多种生物效应的受体分子。对补体第三成分(C3)的受体,存在于多形核