镍离子金属鳌合亲和层析介质（NiNTA）说明书（二）
1、 标准蛋白， 2、上样液， 3、流穿液， 4：20mM洗脱液， 5：50mM洗脱液，6：100mM洗脱液， 7：200mM洗脱液， 8：300mM洗脱液， 9：400mM洗脱液。 （2）使用Ni-NTA Agarose纯化His标签重组蛋白包涵体 条件和前面的方法基本相同，只是缓冲液中加了8M的脲，溶液配方如下表，其纯化色谱图和电泳图分见图3、图4。 要注意的是不同的包涵体溶解度不同，也可以用6M盐酸胍代替8M脲，因为盐酸胍溶解包涵体更完全。 缓冲液组成： 缓冲液1：50mM ......阅读全文
镍离子金属鳌合亲和层析介质（NiNTA）说明书（二）
1、 标准蛋白， 2、上样液， 3、流穿液， 4：20mM洗脱液， 5：50mM洗脱液，6：100mM洗脱液， 7：200mM洗脱液， 8：300mM洗脱液， 9：400mM洗脱液。 （2）使用Ni-NTA Agarose纯化His标签重组蛋白包涵体 条件和前面的方
镍离子金属鳌合亲和层析介质（NiNTA）说明书（一）
一、 简介 金属螯合亲和层析介质，又称固定金属离子亲和色谱，其原理是利用蛋白质表面的一些氨基酸，如组氨酸能与多种过渡金属离子如Cu2+，Zn2+，Ni2+，Co2+，Fe3+发生特殊的相互作用，能够吸附富含这类氨基酸的蛋白质，从而达到分离纯化的目的。因此，偶联这些金属离子的琼脂糖凝胶就能够选择性地分
金属螯合亲和层析实验（二）
实验材料蛋白质试剂、试剂盒GuMCAC-EDTA缓冲液盐酸胍仪器、耗材转子离心机实验步骤1. 制备表达带组氨酸尾的融合蛋白的大肠杆菌菌体沉淀。2. 准备NTA介质层析柱，但柱子最后以GuMCAC-0缓冲液洗涤.3. 在冰浴中冻融菌体沉淀。加5 ml GuMCAC-0缓冲液，用吸管抽吸重悬，超声
金属螯合亲和层析实验
天然MCAC纯化带组氨酸尾的可溶性融合蛋白 变性条件下用MCAC纯化带组氨酸尾的不溶性融合蛋白 实验材料 蛋白质
金属螯合亲和层析实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 IPTGNiSO4蛋白酶抑制剂MCAC-EDTATriton仪器、耗材 层析柱转子实验步骤 1. 接种含以pET载体表达带组氨酸尾融合蛋白的大肠扦菌BL21（DE3）pLyaS菌株于10 ml M9ZB/氨苄青霉素/氯霉素培养基。于37℃摇荡培养过夜。2. 转接1
蛋白纯化的首选标签Histag的优势及应用
His标签蛋白纯化工具-蛋白纯化必备在大肠杆菌和别的原核系统中表达的多组氨酸标签重组蛋白一般运用固定的金属离子亲和色谱来纯化或称为 IMAC. 在这个进程中，支撑物 (一般是珠状琼脂糖凝胶或磁珠颗粒) 用适宜的耦合试剂来进行衍生，比方氨三乙酸 nitrilotriacetic acid (NTA
使用NTAIDA填料纯化蛋白的常见问题解析
Ni Tanrose 6FF（NTA）亲和介质是将金属离子Ni2+螯合在以氨三乙酸（NTA）为配基的琼脂糖凝胶上形成的亲和层析介质，较 IDA 结合Ni2+牢固一些。具有吸附量大、选择好、易于再生、成本低等特点，广泛用于生物制药和生物工程下游蛋白质和多肽的分离纯化，尤其是组氨酸标签蛋白质的高效纯化。
亲和层析法（aflinity－chromatography）纯化蛋白质
若表现蛋白质上含有一段六个His 的片段，而亲和吸着剂胶体上接有镍离子，此蛋白质会专一性地结合到吸着胶体；洗去杂质后可用imidazole 溶离纯质蛋白质（Pharmacia 操作手册， Affinity Chromatography）。一、仪器设备：1.亲和层析管柱 （Bio-Rad 731-15
蛋白质纯化亲和层析法
若表达蛋白质上含有一段六个His 的片段，而亲和吸附胶上接有镍离子，此蛋白质会特异性地结合到吸着胶体；洗去杂质后可imidazole 洗脱目标蛋白质。（Pharmacia 操作手册， Affinity Chromatography）。仪器设备：亲和层析管柱 （Bio-Rad 731-1550 Pol
纳微科技发布6款“新一代蛋白质分离纯化层析介质”
分析测试百科网讯 2017年6月20日，第十七届世界制药原料中国展（Cphi China 2017）在上海新国际博览中心召开。为了满足制药分离纯化环节的迫切需求并解决应用中的棘手问题，纳微科技发布了6款“新一代蛋白质分离纯化层析介质”，包括Uni®与Nano品牌系列的离子交换、疏水、Protei
方案3－固定化金属离子亲和介质对磷酸化多肽进行分析
实验材料牛小肠碱性磷酸酶羧肽酶Y目标磷酸化蛋白TPCK 修饰的膜蛋白酶试剂、试剂盒乙酸EDTAFeCl3NH4HCO3MALDI 基质镍-次氨基三乙酸（Ni-NTA)树脂柠檬酸钠仪器、耗材致密的反应柱子（CRC)过滤器孵育器MALDI 质谱仪MALDI 靶板微量离心管实验步骤一、固定化金属离子亲和柱
GE推出新款亲和层析介质CaptoL
用电气医疗集团(GE Healthcare)近日推出了一款新的亲和层析介质Capto L，适用于抗体和抗体片段的捕获。它结合了刚性的高流速琼脂糖基质及与免疫球蛋白结合的重组蛋白L配体，这种配体对于抗体K轻链(Kappa light chain)上的可变区有很强的亲合力。因此，Capto
常见蛋白标签6xHis标签
6xHis标签，也称为多组氨酸标签（polyhistidine ），His6标签或hexa组氨酸标签，这是一种在转染的细胞中目标蛋白的C端或N端上由至少6个组氨酸残基链接上所组成的氨基酸序列，它的序列如下所示：相对小的分子量，低的免疫原性，亲水性和在去污剂和其他添加剂存在的情况下的易变性，因此在天然
概述几种典型层析方法概念
吸附层析 利用吸附层析介质表面的活性分子或活性基团，对流动相中不同溶质产生吸附作用，利用其对不同溶质吸附能力的强弱而进行分离的一种方法，称之为吸附层析。 分配层析 被分离组分在固定相和流动相中不断发生吸附和解吸附的作用，在移动的过程中物质在两相之间进行分配。利用被分离物质在两相中分配系数的
关于层析分离法的不同类型介绍
吸附层析 利用吸附层析介质表面的活性分子或活性基团，对流动相中不同溶质产生吸附作用，利用其对不同溶质吸附能力的强弱而进行分离的一种方法，称之为吸附层析。 分配层析 被分离组分在固定相和流动相中不断发生吸附和解吸附的作用，在移动的过程中物质在两相之间进行分配。利用被分离物质在两相中分配系数的
磁性金属物测定仪在金属测定上的应用
微量金属的金属测定在国外早就开始进行了测定，但是国内目前还是处在研究的初级阶段，技术方面还是不如国外先进，但是我们也开始向智能化方向发展了，磁性金属物测定仪主要就是对金属进行测定的。主要是想通过一些有机物质对金属的合成，然后再通过我们的超强分辨力将色谱进行分离检测。从而达到一次同时测定几种
关于分离纯化多肽、蛋白质的分析方法亲和层析的介绍
AC 是利用连接在固定相基质上的配基与可以和其特异性产生作用的配体之间的特异亲和性而分离物质的层析方法。自1968 年Cuatrecasas 提出亲和层析概念以来，在寻找特异亲和作用物质上发现了许多组合，如抗原-抗体、酶-催化底物、凝集素-多糖、寡核苷酸与其互补链等等。对多肽类物质分离目前主要应
重磅！纳微科技Protein－A－亲和层析介质新品发布
新春伊始，马力全开！纳微科技为您重磅推出Protein A 亲和层析介质新品，让您领略纳微新一代层析介质的超凡魅力！ 纳微科研人员经过多年的积累，利用自主知识产权研发出新一代Protein A 亲和层析介质Uni®Mab系列。该亲和层析介质专为大规模抗体纯化而设计，是由高纯度的Protein
纯化全长/高纯度蛋白方法（－Doubletag）
Double-tag在蛋白纯化过程中的应用Protein表达是一个非常复杂的过程，因此很难预测表达的蛋白是否是可溶性的、包涵体形式还是部分降解的。为了预防各种可能的困难条件，在重组蛋白上导入两种Tag可以提供获得高纯度均质蛋白的灵活性。蛋白含有两种不同亲和纯化Tag的重要原因：纯化全长的蛋白获得最高
Doubletag在蛋白纯化(Protein－Purification)过程中的应用
Protein表达是一个非常复杂的过程，因此很难预测表达的蛋白是否是可溶性的、包涵体形式还是部分降解的。为了预防各种可能的困难条件，在重组蛋白上导入两种Tag可以提供获得高纯度均质蛋白的灵活性。 蛋白含有两种不同亲和纯化Tag的重要原因： 纯化全长的蛋白 获得最高纯化的蛋白 适合变性
纯化全长/高纯度蛋白方法（－Doubletag）
Double-tag在蛋白纯化过程中的应用 Protein表达是一个非常复杂的过程，因此很难预测表达的蛋白是否是可溶性的、包涵体形式还是部分降解的。为了预防各种可能的困难条件，在重组蛋白上导入两种Tag可以提供获得高纯度均质蛋白的灵活性。
纯化全长/高纯度蛋白方法（Doubletag）
Protein表达是一个非常复杂的过程，因此很难预测表达的蛋白是否是可溶性的、包涵体形式还是部分降解的。为了预防各种可能的困难条件，在重组蛋白上导入两种Tag可以提供获得高纯度均质蛋白的灵活性。蛋白含有两种不同亲和纯化Tag的重要原因：纯化全长的蛋白获得最高纯化的蛋白适合变性或生理条件下纯化优化的操
金属螯合亲和层析实验——MCAC纯化带组氨酸尾可溶融合蛋白
经遗传工程改造的使其氨基端或羧基端带上6个连续的组氨酸残基的重组蛋白，可用一种通过共价偶连的次氨基三乙酸（NTA）使镍离子固相化的层析介质加以提纯，是为金属螯合亲和层析。实验材料蛋白质试剂、试剂盒IPTGNiSO4蛋白酶抑制剂MCAC-EDTATriton仪器、耗材层析柱转子实验步骤1. 接种含以
免疫亲和层析的具体应用有哪些
亲和层析是通过层析介质表面键合的配基与目标物质特异性吸附，然后非目标物流穿，再改变流动相是目标物质的特异性吸附消失，从而达到纯化目的。凝胶层析是通过层析介质孔径的设定，使分子量大小相差比较大的物质通过的路径不一样，从而达到分离效果。离子交换是通过层析介质表面的带电荷的基团与目标之间产生吸附，通过改变
离子交换层析介质的技术数据
关于离子交换层析实验的介绍，对于常用到的层析介质的一些基本技术数据罗列如下： 离子交换介质名称
如何选择凝胶？（一）
生物分子下游纯化的对象一般包括蛋白、酶、重组蛋白、单抗、抗体及抗原、肽类、病毒、核酸等。纯化前首先需要测定生物分子的各物理和化学特性，然后通过实验选择出最有效的纯化流程。测定------分子量、PI 当目标蛋白的物理特性如分子量、PI等都不清楚时，可用PAGE电泳方法或层析方法加以测定。分离范围
金属亲和层析的概念和应用
中文名称金属亲和层析英文名称metal affinity chromatography定 义利用固相化的金属离子介质进行的亲和层析技术。欲分离的物质与金属离子形成共配位复合物而结合，再通过降低pH、加入竞争物(如咪唑、组氨基酸等)、使用螯合剂(如乙二胺四乙酸)等方法洗脱。常用于蛋白质的纯化分离，如
蛋白质的理化性质有哪些
蛋白质主要的理化性质以及对应的分离纯化方法如下： 电荷 Charge：等电聚焦 isoelectricfocussing离子交换 Ion-Exchange等电点沉淀 Isoelectric precipitation疏水性 Hydrophobicity：反相层析 Reverse phase chro
溶剂萃取的基本原理
溶剂萃取是基于有机溶剂对不同的金属离子具有不同的溶解因而对溶液中的金属离子可以进行富集与分离。例如含有机剂的有机相与含有金属离子的溶液相（也称水相）互相接触时，由于金属离子在两相中的溶解度不同而重新分配，从而实现一种金属在有机相中的富集并与其他杂质分离。 现以一种名为N-510的萃取剂
总镍（镍离子）在线分析仪－总镍在线分析仪
测量方法：丁二酮肟(二甲基乙二醛肟)分光光度法 测试量程：（0 -0.5）mg/l,（0-2）mg/l,（0-5）mg/l,（0-20）mg/l四档量程自动切换 检测下线：0.005mg/l 分辨率：