金属螯合亲和层析实验（二）
实验材料蛋白质试剂、试剂盒GuMCAC-EDTA缓冲液盐酸胍仪器、耗材转子离心机实验步骤1. 制备表达带组氨酸尾的融合蛋白的大肠杆菌菌体沉淀。2. 准备NTA介质层析柱，但柱子最后以GuMCAC-0缓冲液洗涤.3. 在冰浴中冻融菌体沉淀。加5 ml GuMCAC-0缓冲液，用吸管抽吸重悬，超声破菌或匀浆。在-70℃冻结10 min，室温冻融。 4. 用振摇器、旋转混合器或磁力搅拌器轻柔地混匀样品60 min，在4 ℃ 27 000 g 离心30 min 将上清吸至一个干净的容器并弃沉淀。取10 μl 小份样品留待SDS-PAGE分析。 5. 如果提取液被冻结，室温冻融，以10~15 ml/h 的流速上Ni2+-NTA柱。收集流出液，取10 μl 小份样品留待SDS-PAGE分析。6. 以20~30 ml/h 的流速用5 ml ......阅读全文
金属螯合亲和层析实验（二）
实验材料蛋白质试剂、试剂盒GuMCAC-EDTA缓冲液盐酸胍仪器、耗材转子离心机实验步骤1. 制备表达带组氨酸尾的融合蛋白的大肠杆菌菌体沉淀。2. 准备NTA介质层析柱，但柱子最后以GuMCAC-0缓冲液洗涤.3. 在冰浴中冻融菌体沉淀。加5 ml GuMCAC-0缓冲液，用吸管抽吸重悬，超声
金属螯合亲和层析实验
实验材料 蛋白质试剂、试剂盒 IPTGNiSO4蛋白酶抑制剂MCAC-EDTATriton仪器、耗材 层析柱转子实验步骤 1. 接种含以pET载体表达带组氨酸尾融合蛋白的大肠扦菌BL21（DE3）pLyaS菌株于10 ml M9ZB/氨苄青霉素/氯霉素培养基。于37℃摇荡培养过夜。2. 转接1
金属螯合亲和层析实验
天然MCAC纯化带组氨酸尾的可溶性融合蛋白 变性条件下用MCAC纯化带组氨酸尾的不溶性融合蛋白 实验材料 蛋白质
金属螯合亲和层析实验——MCAC纯化带组氨酸尾可溶融合蛋白
经遗传工程改造的使其氨基端或羧基端带上6个连续的组氨酸残基的重组蛋白，可用一种通过共价偶连的次氨基三乙酸（NTA）使镍离子固相化的层析介质加以提纯，是为金属螯合亲和层析。实验材料蛋白质试剂、试剂盒IPTGNiSO4蛋白酶抑制剂MCAC-EDTATriton仪器、耗材层析柱转子实验步骤1. 接种含以
简述螯合物的螯合反应
又称螯合作用或螯合效应。螯合配位体 (含两个或两个以上具有孤对电子原子的配位体) 与中心离子同时形成两个或更多的配位键而生成环状结构的配位化合物，即螯合 [物] 的反应。例如，乙二胺四乙酸[EDTA，(—OOCCH2)2NCH2CH2N (CH2COO—)2]能与许多金属离子如Fe、Th、Hg、
关于螯合物螯合程度的检测
如果配体和银离子结合后，紫外可见区有变化，可以用紫外光谱测定反应进行的程度；如果没有光信号变化，也可以使用电化学手段，用银-氯化银电极测定体系游离银离子浓度；如果是固体的话，只能用溶剂洗涤固体，将游离银离子洗脱，然后用原子吸收或其他手段检测银离子含量。
螯合物的螯合程度的检测
如果配体和银离子结合后，紫外可见区有变化，可以用紫外光谱测定反应进行的程度；如果没有光信号变化，也可以使用电化学手段，用银-氯化银电极测定体系游离银离子浓度；如果是固体的话，只能用溶剂洗涤固体，将游离银离子洗脱，然后用原子吸收或其他手段检测银离子含量。
什么叫螯合物，螯合物有什么特点
螯合物是具有环状结构的配合物，是通过两个或多个配位体与同一金属离子形成螯合环的螯合作用而得到。螯合物最显著的一种特性是其热力学稳定性和热稳定性。螯合环的稳定性与芳香环相似。螯合物可为不带电荷的中性分子，也可为带电的络离子，前者易溶于有机溶液中，后者可溶于水中，此性质可用于分离和分析金属离子。金属离子
慢性重金属中毒·毒性元素尿液螯合分析
由于不良生活方式与环境污染，现代人极容易出现慢性重金属在体内累积，过度的重金属累积是影响健康的重要原因。血液检测最常用于急性重金属中毒，对于慢性重金属的累积血液检测并不能有效反映出来。头发与尿液螯合分析是用来检测慢性重金属中毒的可靠指标。虽然头发检测与尿液螯合都可以反映体内元素的长期蓄积水平，但尿液
多聚螯合物酶组化实验
EPOS 法 EnVision 法 UIP 法 PowerVision 法 实验方法原理 采用一种具有惰性的多聚化合物（葡聚糖）
多聚螯合物酶组化实验
实验方法原理 采用一种具有惰性的多聚化合物（葡聚糖）为骨架，将特异性抗体和 HRP 结合在一起，形成 HRP-多聚化合物-特异性抗体巨大复合物，该复合物内不含第二抗体及亲和素。染色时，只需在组织切片上加入相应的酶标记特异性抗体 EPOS 试剂，孵育 30～60 min 即可完成。勿需再加
螯合物萃取体系
a. 螯合剂：螯合剂(应有较多的疏水基团)溶于有机相，难溶于水相，有些也(微)溶于水相，但在水相中的溶解度依赖于水相的组成特别是 pH 值(双硫腙溶于碱性水溶液)；b. 螯合剂在水相与待萃取的金属离子形成不带电荷的中性螯合物，使金属离子由亲水性转变为亲油性； c. 螯合物萃取体系广泛应用于金属阳离子
螯合物的组成
螯合物是具有环状结构的配合物，是通过两个或多个配位体与同一金属离子形成螯合环的螯合作用而得到。
乙二胺四乙酸（EDTA）及其螯合物
一. EDTA的离解平衡 在水溶液中，2个羧基 H+转移到氨基N上，形成双极离子： EDTA 常用 H4Y 表示，由于其在水及酸中的溶解度很小，常用的为其二钠盐：Na2H2Y·2H2O ，也简写为EDTA 。 当溶液的酸度很高时，两个羧基可再接受H+ ，形成H
螯合物的相关应用
在水污染化学、分析化学、有机和生化等方面的应用十分广泛，如水中金属离子的分离分析、水的软化、分级沉淀、纤维染色、清洗金属、浮选、杀菌、蛋白质的水解与合成以及稳定维生素等。工业工程螯合物在工业中用来除去金属杂质，如水的软化、去除有毒的重金属离子等。比如重金属生产和使用的工厂使用重金属捕捉剂来沉淀重金属
螯合程度的检测分析
如果配体和银离子结合后，紫外可见区有变化，可以用紫外光谱测定反应进行的程度；如果没有光信号变化，也可以使用电化学手段，用银-氯化银电极测定体系游离银离子浓度；如果是固体的话，只能用溶剂洗涤固体，将游离银离子洗脱，然后用原子吸收或其他手段检测银离子含量。
螯合物的应用介绍
在水污染化学、分析化学、有机和生化等方面的应用十分广泛，如水中金属离子的分离分析、水的软化、分级沉淀、纤维染色、清洗金属、浮选、杀菌、蛋白质的水解与合成以及稳定维生素等。工业工程螯合物在工业中用来除去金属杂质，如水的软化、去除有毒的重金属离子等。比如重金属生产和使用的工厂使用重金属捕捉剂来沉淀重金属
微量元素氨基酸螯合物的螯合物的基本结构
螯合物是指1个或多个配位基团与金属离子之间的配位反应所形成的环状结构产物，金属氨基酸螯合物是可溶性金属盐的金属离子与氨基酸以一定数量的摩尔比（通常为1∶1~3）共价化合的产物。氨基酸的氨基和羧基与金属微量元素离子螯合，是以氧和氮作配位原子，配位体2个配位原子之间相隔2个或3个以上原子与中心金属离子共
多聚螯合物酶组化实验——EPOS－法
长期以来，许多的研究者希望 IHC 方法更敏感、更稳定、更简单，要求多步检测系统简化，但敏感性要进一步提高，使这一技术面临巨大的挑战。在实践中，往往是步骤减少了，敏感性也降低，这是一对矛盾。一种新的多聚螯合物酶二步法在 1995 年被隆重推出，该方法与简单的二步法相比较，具有很高的敏感性、稳定性和特
多聚螯合物酶组化实验——PowerVision－法
实验方法原理PowerVision 系统的原理是连接抗体上紧密地连接上许许多多的酶分子，呈串珠状排列，由于利用了一种小的呈线性或很小枝状多功能试剂作为骨架分子，与酶和免疫球蛋白交联，排列紧密，形成串珠状多聚物，因此相对分子质量较小。其特点是简便、敏感。其操作流程同 EnVision 法，但一抗的稀释
多聚螯合物酶组化实验——EnVision－法
实验方法原理抗原-抗体反应结合后，第二抗体上标记有多聚化合物（葡聚糖）酶复合物（EnVision 复合物），与第一抗体结合，进而由酶作用底物进行显色定位。EnVision 复合物是利用一种多聚化合物将 HRP 或 AKP 和第二抗体（抗鼠或抗兔 IgG）同时标记在一个多聚化合物上，即形成酶-多聚化合
多聚螯合物酶组化实验——UIP－法
实验方法原理UIP（universal immuno-enzyme polymer）法，即通用免疫酶复合物法，是 Nichirei 发明的一种新型免疫组化染色方法。其基本原理及工作流程与 EnVision 法相似，不同的是 UIP 复合物为 HRF 氨基酸-抗鼠或抗兔 IgG 复合物（N-Histo
镍离子金属鳌合亲和层析介质（NiNTA）说明书（二）
1、 标准蛋白， 2、上样液， 3、流穿液， 4：20mM洗脱液， 5：50mM洗脱液，6：100mM洗脱液， 7：200mM洗脱液， 8：300mM洗脱液， 9：400mM洗脱液。 （2）使用Ni-NTA Agarose纯化His标签重组蛋白包涵体 条件和前面的方
金属螯合层析(metal－chelate－chromatography)分离纯化超氧化物歧
[原理] 金属螯合层析是利用固定相偶联的配基——亚氨基二乙酸(IDA)及金属离子发生螯合作用，该金属离子又与蛋白分子中的某些含有巯基或咪唑基的氨基酸结合。 金属螯合层析主要分为3个阶段：第一阶段是螯合介质与二价金属离子作用生成金属螯合介质；第二阶段是在一定的条件下金属螯合介质与被
用亚氨基二乙酸（铁螯合）Sepharose6B－分离磷酸肽实验
用亚氨基二乙酸（铁螯合）Sepharose6B 分离磷酸肽实验 试剂、试剂盒 EDTA 乙酸铵
用亚氨基二乙酸（铁螯合）Sepharose6B－分离磷酸肽实验
在进行蛋白质（phosphorylated protein) 的结构与功能分析时，接蛋白质水解后即能将磷酸肽与未修饰的（未磷酸化的）肽分开是很有助益的。可利用的最有效的方法之一是使用载有铁 (正铁离子）的金属螯合填料。本实验来源于蛋白质纯化与鉴定实验指南，作者：朱厚础。暂未评分点评实验，有机会获丁当
螯合物的基本信息
具有环状结构的配合物，由具有两个或多个配位体与同一金属离子形成螯合环的化学反应——螯合作用而得到。配体和金属离子间的配位键通常有两种类型：（1）配体上酸的基团离解去H+，然后与金属离子配位；（2）配体上含有孤电子对的中性基团与金属离子配位.螯合物最显著的一种特性是其热力学稳定性和热稳定性。螯合环的稳
螯合物是什么意思
螯合物是具有环状结构的配合物，是通过两个或多个配位体与同一金属离子形成螯合环的螯合作用而得到。具有环状结构的配合物，由具有两个或多个配位体与同一金属离子形成螯合环的化学反应——螯合作用而得到。螯合反应：又称螯合作用或螯合效应。螯合配位体 (含两个或两个以上具有孤对电子原子的配位体) 与中心离子同时形
螯合物的基本概念
螯合物是具有环状结构的配合物，是通过两个或多个配位体与同一金属离子形成螯合环的螯合作用而得到。
螯合萃取剂的工作机理
羟酮类萃取剂和羟醛类萃取剂属羟肟类化合物。羟肟分子中含有羟基(—OH)和肟基(=C=NOH)，由于羟肟分子结构中具有不能自由旋转的碳-氮双键(C=N)，故存在着顺反式异构体。两个羟基在双键同侧的为顺式，在异侧的则为反式。顺、反二式的含量 一般为1/7左右。羟肟萃取金属是通过羟基氧原子及肟基氮原子与金