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更新教科书:Cell揭示端粒酶内在工作机制

“我们现在不仅看到了时钟的表面,而且也看到了内部机械运作,”UCLA化学和生物化学教授Juli Feigon说。“我们不断放大端粒酶以观察越来越多细节。如今,我们终于有能力开始推断这种酶如何发挥作用了。”Juli Feigon 文章报道了迄今所见的最高水平端粒酶催化核心结构,下图首次展示了在生成DNA链过程中研究人员捕获的端粒酶。主要研究手段是冷冻电子显微术(cryo-electron microscopy),再利用计算机模型解析数据。研究小组成员在生物化学、分子生物学、计算生物学和生物物理学等领域各有专长。 “这是我们创建的第一个端粒酶框架,”文章一作、Feigon实验室的博后学者Lukas Susac说。“过去,我们知道端粒酶突变会使人患病,但我们除了知道患者的端粒酶不起作用以外,并不知道出了什么差错。但是,为了治疗疾病,我们必须知道究竟发生了什么。” 端粒酶的主要作用是维持端粒DNA(人类染色体末端结构)。当端粒......阅读全文

Nature:端粒酶结构解析工作最新研究进展

  端粒酶(Telomerase)主要负责合成能够保护染色体末端完整性的DNA片段。最近发现的端粒酶复合体的组装机制有望帮助我们更好地认识其结构以及相关的功能。  早期有关DNA复制机制的研究发现了一个惊人的现象,即细胞在每一轮分裂的时候都会让染色体DNA的末端缩短一点点,如果放任不管,那么终究有一

RT-PCR实验方法大全

RT-PCR实验有三步:抽提RNA,RT,PCR。 要求:1.做RT前必需测RNA浓度,逆转录体系对RNA量还是有一些要求,常用500ng或1ug。2. RT按要求做,一般不会出太大问题。 3. PCR,按常规。但如需扩长片段,则对前两步要求较高,需要有完整的cDNA存在,不是单

端粒酶研究领域的重要成果!

  本文中,小编整理了多篇研究报告,共同聚焦科学家们在端粒酶研究领域取得的重要成果,分享给大家!图片来源:Vimeo  【1】PNAS:促进癌症的端粒酶也能保护健康细胞  doi:10.1073/pnas.1907199116  马里兰大学和美国国立卫生研究院的新研究揭示了端粒酶的新作用。端粒酶在正

TRAP法端粒酶活性检测实验操作方法及疑难解答

Kim应当不会预测到,他在1994年发明的TRAP会那么受欢迎,被一代又一代的研究者奉为端粒酶 活性检测首选方法。不过,TRAP法虽然灵敏度高,却同样存在瑕疵。下面为大家介绍的是根据TRAP法适当改良的研究专用试剂盒具体情况和使用方法以及常见问题解答。本品与通常的端粒 酶活性测定法相比较,具有以下特

端粒酶活性检测操作必知

近几年来端粒酶由于与长寿、癌症等的研究相关联而备受关注,而端粒酶活性检测具体方法又有那些呢?小编整理了端粒酶活性检测的原理、基本操作技巧 、结果判断、扩增片段检测等方面内容,以飨读者。端粒酶 (Telomerase)是由RNA和蛋白质组成的一种核糖核蛋白酶。人端粒酶RNA组分(hTR)于1995年被

RT-PCR实验方法总结大全

生物谷: RT-PCR实验有三步:抽提RNA,RT,PCR。 要求:1.做RT前必需测RNA浓度,逆转录体系对RNA量还是有一些要求,常用500ng或1ug。2. RT按要求做,一般不会出太大问题。 3. PCR,按常规。但如需扩长片段,则对前两步要求较高,需要有完整的cDNA存

诺贝尔奖得主Cell发布端粒酶重要发现

  随着染色体绳索的复制,它的两端会遭到磨损。然而由于染色体的末端有着额外的细绳,磨损不会触及重要信息所在的绳索主体部分。这一额外的细绳被称作为“端粒”。随着时间的推移及经历多轮复制,这一端粒细绳会分解直至染色体丧失它的保护末端,这种“磨损”触及绳索,破坏染色体导致了细胞死亡。  这样当然好——最终

RNA提取和RT-PCR

真核生物的基因组是DNA,为什么不直接从DNA PCR得到我们需要的基因呢?因为真核生物的基因含有大量的非编码区,称为内元(intron),真正编码蛋白的区段是被这些内元隔开的,这些编码区叫做外元(exon)。真核生物的DNA转录成为RNA之后,经过剪切和拼接,去掉这些非编码区,才形成成熟

PCR仪的用途及使用方法

 PCR的用途及使用方法真核生物的基因组是DNA,为什么不直接从DNA PCR得到我们需要的基因呢?因为真核生物的基因含有大量的非编码区,称为内元(intron),真正编码蛋白的区段是被这些内元隔开的,这些编码区叫做外元(exon)。真核生物的DNA转录成为RNA之后,经过剪切和拼接,去掉

上海生科院揭示端粒酶蛋白亚基与RNA亚基的相互作用

  国际学术期刊Nature Structural and Molecular Biology于5月4日在线发表了中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所/国家蛋白质科学中心·上海(筹)雷鸣研究组的最新研究成果Structural basis for protein-RNA recog

RNA提取与RT-PCR

 1.RNA的提取  RNA的提取其实原理很简单:通过变性剂破碎细胞或者组织,然后经过氯仿等有机溶剂抽提RNA,再经过沉淀,洗涤,晾干,zui后溶解。但是由于RNA酶无处不在,随时可能将RNA降解,所以实验中有很多地方需要注意,稍有疏忽就会前功尽弃。  1.1分离高质量RNA  成功的cDNA合成来

动物RNA提取实验原理

RNA提取技术不仅是分子生物学技术的重要组成部分,也是功能基因组 学科研技术的重要基础。从RNA水平研究生物体内基因的调控机制,已成为分子生物学研究的一个重要手段。对某一生物或组织进行性状研究,首先要获得该性状基因,从组织细胞中分离完整的RNA对于分子克隆 和基因表达分析等实验是至关

肝脏细胞RNA的提取操作方法

一.原理RNA提取技术不仅是分子生物学技术的重要组成部分,也是功能基因组 学科研技术的重要基础。从RNA水平研究生物体内基因的调控机制,已成为分子生物学研究的一个重要手段。对某一生物或组织进行性状研究,首先要获得该性状基因,从组织细胞中分离完整的RNA对于分子克隆 和基因表达分析等实验是

肝脏细胞RNA的提取原理、材料和方法

一.原理 RNA提取技术不仅是分子生物学技术的重要组成部分,也是功能基因组学科研技术的重要基础。从RNA水平研究生物体内基因的调控机制,已成为分子生物学研究的一个重要手段。对某一生物或组织进行性状研究,首先要获得该性状基因,从组织细胞中分离完整的RNA对于分子克隆和基因表达分析等实验是至关

动物RNA提取实验

SV总RNA试剂盒提取法 Trizol试剂提取法             实验方法原理 SV Total RN

上海交通大学教授最新Cell文章:端粒酶如何被召集

  端粒酶被许多科学家认为是永生化(immortalization)的关键,原因在于这种酶可以把DNA复制损失的端粒填补起来,修复延长端粒,可以让端粒不会因细胞分裂而有所损耗,使得细胞分裂的次数增加。但认识端粒酶的作用机制并不容易,近期来自上海交通大学医学院第九人民医院,上海精准医学研究院等处的研究

动物RNA提取实验——SV总RNA试剂盒提取法

动物RNA提取可用于:(1)研究生物体基因调控机制;(2)分子克隆和基因表达以获得该性状基因;(3)可以对特定的基因表达进行定量的检测,从分子水平精确的了解细胞生命活动的规律。实验方法原理SV Total RNA Isolation System (SV 总RNA 纯化系统)可在1小时内从组织、培养

PCR仪的用途及使用方法

PCR仪的用途及使用方法真核生物的基因组是DNA,为什么不直接从DNA PCR得到我们需要的基因呢?因为真核生物的基因含有大量的非编码区,称为内元(intron),真正编码蛋白的区段是被这些内元隔开的,这些编码区叫做外元(exon)。真核生物的DNA转录成为RNA之后,经过剪切和拼接,去掉这些非编码

Science发布端粒酶重大发现

  端粒酶在衰老和大多数癌症中都起着重要的作用,但直到现在都无法清楚地看到端粒酶结构的许多方面。  现在,来自加州大学洛杉矶分校和伯克利分校的科学家,以比以往更高的分辨率生成了端粒酶的图像,提供了有关该酶的一些重要新认识。他们的研究结果发表在10月15日的《科学》(Science)杂志上,有可能最终

动物RNA提取实验

实验方法原理 SV Total RNA Isolation System (SV 总RNA 纯化系统)可在1小时内从组织、培养细胞和白细胞中提取纯化完整总RNA,方法简单、快速。该系统以膜为基础,根据组织类型的不同,每次最多可纯化60 mg 组织。系统包含DNase 处理步骤,直接在小离

多篇论文同时揭示“返老还童”机制

  “长生不老”、“青春永驻”是人们永恒的梦想,一直以来,抗衰老研究都是十分热门的领域。最近,《自然-结构与分子生物学》、《自然-医学》、《科学》等杂志同时刊登出4篇文章,从不同角度探讨了逆转衰老的新方法。   Nat Struct Mol Biol:端粒酶原子水平结构首次得到解析   亚利桑那

肝脏细胞RNA的提取

一.原理RNA提取技术不仅是分子生物学技术的重要组成部分,也是功能基因组 学科研技术的重要基础。从RNA水平研究生物体内基因的调控机制,已成为分子生物学研究的一个重要手段。对某一生物或组织进行性状研究,首先要获得该性状基因,从组织细胞中分离完整的RNA对于分子克隆 和基因表达分析等实验是至关重要的,

分子生物学常用实验技术(page 2)

一、RNA 制备   模板mRNA 的质量直接影响到cDNA 合成的效率。由于mRNA 分子的结构特点,容易受RNA 酶的攻击反应而降解,加上RNA 酶极为稳定且广泛存在,因而在提取过程中要严格防止RNA 酶的污染,并设法抑制其活性,这是本实验成败的关键。所有的组织中均存在RNA 酶,人

RT-PCR实验方法总结(1)

RT-PCR实验有三步:抽提RNA,RT,PCR。 要求: 1.做RT前必需测RNA浓度,逆转录体系对RNA量还是有一些要求,常用500ng或1ug。2. RT按要求做,一般不会出太大问题。 3. PCR,按常规。但如需扩长片段,则对前两步要求较高,需要有完整的cDNA

RT-PCR实验方法总结大全

生物谷: RT-PCR实验有三步:抽提RNA,RT,PCR。要求:1.做RT前必需测RNA浓度,逆转录体系对RNA量还是有一些要求,常用500ng或1ug。2. RT按要求做,一般不会出太大问题。3. PCR,按常规。但如需扩长片段,则对前两步要求较高,需要有完整的cDNA存在,不是单改变

PCR-ELISA端粒酶检测法

端粒是真核生物染色体末端的特异DNA-蛋白结构,端粒DNA是一系列重复的富含G的DNA序列,这一序列在生物进化中有高度的保守性(人重复序列为TTAGGG)。已确认端粒在保护基因组DNA不被降解、防止染色体有害的结合(如染色体末端融合、重排、染色体移位和染色体缺失)中起重要作用。由于DNA聚合酶不能复

中科院Nature子刊解开青春之泉的秘密

  来自中科院上海生命科学研究院的科学家与亚利桑那州立大学的合作者一起,首次在原子水平上解析了端粒酶的结构,解开了这一青春之泉的一些秘密。研究结果发表在5月4日的《自然结构与分子生物学》(Nature Structural and Molecular Biology)杂志上。   中科院上海生

首次成功靶定“通用”肿瘤靶标

  端粒酶是一种几乎“通用”的肿瘤靶标,因为它在绝大多数的肿瘤中是被激活的。尽管端粒酶在癌症中的重要作用,但是目前在临床上,还没有靶定这种酶的治疗方法。特别是,由于缺乏可用的结构信息,端粒酶小分子抑制剂的研究和开发,已经远远落后于任何其他方法。基于结构的药物设计,是一个强大的工具,可开发高度有效的特

分子实验方法4:RNA的提取和cDNA合成

第一节 概 述  从真核生物的组织或细胞中提取mRNA,通过酶促反应逆转录合成cDNA的第一链和第二链,将双链cDNA和载体连接,然后转化扩增, 即可获得cDNA文库,构建的cDNA文库可用于真核生物基因的结构、表达和调控的分析;比较cDNA和相应基因组DNA序列差异可确定内含子存在和了解转录后加工

苏州医工所等通过免疫沉淀和质谱技术联合使用发现PES1

  2009年,诺贝尔生理学或医学奖颁发给了端粒研究领域的三位科学家——Elizabeth H. Blackburn、Carol W. Greider和Jack W. Szostak,以表彰他们发现了端粒和端粒酶是如何保护染色体末端的机理。端粒是一种存在于真核细胞染色体末端的特殊的DNA-蛋白质复合