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美国Wealtec公司是一家实验室科学仪器的专业研发生产商，其最新研发的基因枪GDS-80，是一款创新的基因传递工具。因其低压传送基因细胞损害小、可不用金粉直接传送裸DNA方便又费用低、还有便携及噪音低等优点，刚推向市场即受到热捧，迅速成为广大转基因科研工作者的首选。 产品特点： -低压 (10-80psi)可执行,对细胞损害极小. -可传送毋需载体 (Naked-DNA)及金粉微载体形式 -氦气或氮气均可完成 -粒子分布均匀 -便携式可于现场进行转殖工作 -不用金粉可极大地降低运行成本 -低噪音，不用戴耳罩，方便于活体动物转殖 -可高压灭菌 应用： 1.基因转殖于目标细胞, 组织, 器官或活体 2.基因功能短暂表现之研究 3.功能稳定性表现之研究 4.遗传或癌症相关之研究 5.DNA疫苗的研究与应用 6.基因......阅读全文
基因枪介导pVax-Dsred-IRES-EGFP质粒转染体外培养细胞系的实验研究 张 亮1 阎瑾琦1马继尧2 王 浩1 刘 宁1 贾锐1 韩 刚2 董金凯2 田仁礼2 于继云[1] 1.军事医学科学院 基础医学研究所，北京 100850； 2.解放军总医院 泌尿外科，北京 1008
[摘要] 目的：建立基因枪子弹制备以及转染体外培养cos-7细胞系的方法，观察基因枪介导真核表达质粒pVax-Dsred-IRES-EGFP在细胞内的表达情况。 方法：亚精氨、氯化钙沉淀法制备子弹，利用原子力显微镜观察子弹制备（DNA+金颗粒）情况；以基因枪的方法分别转染对照组和实
2讨论 基因枪技术, 又称为微粒轰击技术( Particle Bombardment Technology),其基本原理就是将外源基因包裹到比重较大而化学性质很稳定的微米级的金或钨上,然后用微粒加速装置打入靶细胞或组织。早期多用于在植物中转移基因。它通过提供给包裹有DNA的金颗粒很高的
1.2 其它的基因附加工程在水稻、棉花、马铃薯、番茄和其它作物上也进行了δ-内毒素工程，获得昆虫抗性也不仅仅是指有着一种方法。蛋白酶抑制剂也是较好的选择，它可以一只昆虫肠道内的蛋白酶活性，阻止或减缓害虫生长，许多植物能产生蛋白酶抑制剂，如豇豆和common bean, 他们的基因
基因枪介导pVax-Dsred-IRES-EGFP质粒转染体外培养细胞系的实验研究张 亮1 阎瑾琦1马继尧2 王 浩1 刘 宁1 贾锐1 韩 刚2 董金凯2 田仁礼2 于继云[1]1.军事医学科学院 基础医学研究所，北京 100850； 2.解放军总医院 泌尿外科，北京 100853 [摘
4. 粒子轰击幼胚(1) 幼胚渗透处理轰击前，取分离 1 天后的幼胚，放在高渗培养基中处理 4 h。每皿 20~30 枚幼胚，置于培养皿中心 1.6 cm2 范围内，盾片朝上。胚可以放得紧密一些，但相互之间不要碰到。轰击之后幼胚继续高渗处理 16 h。(2) 基因枪准备① 基因枪所有组件和内部的枪体
实验材料麦穗试剂、试剂盒植物凝胶乙醇次氯酸钠蒸馏水亚精胺仪器、耗材EP 管移液枪实验步骤1. 组织培养基的准备( 1 ) 首先准备所需浓度 2 倍的植物凝胶，高压灭菌（见注 2 ) 。( 2 ) 所有的组织培养基都要过滤灭菌，因此除了无菌的储备液，其他培养基成分按所需浓度 2 倍的量混匀
实验材料麦穗 &nb
中国农科院棉花研究所针对 20 多个棉花品种，成功建立了高效、稳定的规模化转化体系，以流水线的操作方式，建立了高效、工厂化的棉花转基因技术体系。本文援引中国农业科学院棉花研究所的发明专利内容，以制备转 GAPDH 基因棉花的具体方法为例，以应用实例演示棉花转基因技术的具体应用案例。土壤盐渍化是一个全
介绍了用表达抗原的 DNA 增强免疫应答的途径。介绍了核酸免疫的两种方法：①注射含有 DNA 表达载体的生理盐水；② 用 基 因 枪 注 射 DNA。还包括了基因枪方法中使用的 DNA 包被金珠的制备和保存方法。实验步骤基 本 方 案 1 小 鼠 注 射 接 种DNA在免疫前应先阅读动物处理（附 录
1、材料准备 在9cm2培养皿上铺一薄层培养基，把材料(一般用未成熟胚、成熟胚、小愈伤组织、悬浮细胞、原生质体等)平铺于培养皿中心，直径在3cm范围内。 2、金粉的处理 取60mg金粉或钨粉置于离心管中，加入lml无水乙醇，充分振荡3min，以9615g离心1rain，去上清，
基 本 方 案 1 小 鼠 注 射 接 种DNA在免疫前应先阅读动物处理（附 录 2C) 和 接 种 的（附 录 2E) 指导说明。在正式实验之前需先进行肌肉和皮下注射练习； D N A 的精准注射对于免疫成功起关键作用。可以 用 India ink (或相同的染料）来定位注射的部位是否正确。材料2
1。材料准备在9cm2培养皿上铺一薄层培养基，把材料(一般用未成熟胚、成熟胚、小愈伤组织、悬浮细胞、原生质体等)平铺于培养皿中心，直径在3cm范围内。2．金粉的处理取60mg金粉或钨粉置于离心管中，加入lml无水乙醇，充分振荡3min，以9615g离心1rain，去上清，再加入lml无菌水充分混匀后
下面是拫据 Horch 等（1999)、Sanford 等（1993)、主要基因枪生产商的出版物（US/EG Bulletins 1688 and 2087;Bio-Rad) 以及 Steve Finkbeiner(University of California,San Francisco) 建立
实验概要本实验子在构建了中间载体pA7-CFP和pA7-YFP的基础上，构建了pA7- CFP- AtCOP1，pA7-AtCRY1-YFP，pA7- CFP-OsCOPl和pA7-OsCRY1b-YFP载体。利用基因枪将重组质粒轰击入洋葱内表皮。主要试剂高保真聚合酶(pfu ultra)，限制性内
生物粒子介导的 DNA 转染实验
试剂、试剂盒 CaCl2乙醇甘油亚精胺质粒DNA细胞生长培养基仪器、耗材 基因枪金或钨粒子镜头纸微量离心管需转染的细胞或组织实验步骤 材料缓冲液与溶液贮存液、缓冲液与试剂的成分见附录1。稀释贮存液至所需浓度CaCl2(2.5mol/L)乙醇未曾打开过的纯乙醇一瓶。乙醇有吸湿性，在空气中会吸收水分。在
2019年3月27日，“第十七届中国国际科学仪器及实验室装备展览会”（简称CISILE 2019）在北京开幕（相关报道：CISILE 2019在京隆重召开 万人参展）。宁波新芝生物科技股份有限公司携超声波细胞粉碎机、超声波DNA打断仪、高通量组织研磨器、拍打式均质器、高压气体基因枪、超声波清洗机
实验材料金粉试剂、试剂盒乙醇消毒液实验步骤注意：由于基因枪通过高压使粒子加速到极高的速度，故操作基因枪时应采取适当的安全措施并且佩戴安全眼镜。在任何使用基因枪转化的实验中，必须设置对照检测分化和选择效率（见注 40) 。( 1 ) 根据 PDS-1000/He (见图 4.2 ) 基因枪
本实验所用基因传递系统（基因枪）原理：低压基因递送系统（GDS-80 基因枪 U.S. Patent Number: 6,436,709 B1），根据火箭喷嘴原理和空气动力学原理设计，是用于传递生物微粒进入靶细胞的一种新型系统。如图1中所示，当左侧出现输入气体压力时（如：氦气），两个腔室之间将形成巨
实验试剂 高保真聚合酶(pfu ultra)，限制性内切酶(XhoI、SpeI、BamHI、SpeI、SacI)，金粉，无水乙醇，2.5MCaCl2 ，20ul 0.1M亚精胺实验设备 PCR扩增仪，PDS-1000/He型基因枪，激光共聚焦显微镜(Carl Zeiss
2 结果 2.1 重组质粒pVax-DsRed-IRES-EGFP的酶切鉴定 pVax载体是被美国药品及食物鉴定委员会承认的用于疫苗临床使用的真核表达载体，它具有卡那霉素抗性，非常适合于人体的应用。制备基因枪子弹之前，
细胞转染是指将外源分子如DNA，RNA等导入真核细胞的技术,它是研究基因表达调控，突变分析等的常规工具。细胞转染分为瞬时转染和稳定转染。瞬时转染是指外源基因进入受体细胞后，存在于游离的载体上，不整合到细胞的染色体上。稳定转染是指DNA整合到宿主细胞的染色体中。细胞转染途径（一） 物理介导：
干旱等非生物胁迫因素导致作物在形态、生理、生物化学及细胞水平上产生一些不利于其生长的反应，严重地阻碍着现代农业的发展。随着全球气候变暖和人类活动加剧，干旱有明显加重的趋势。棉花生产是纺织工业及国防建设的重要物质基础，也是中国农业重要组成部分，对中国国民经济的发展有着重要的影响，而且在世界棉花贸易市场
1、确定目标对象：也就是你所有转的目的物是什么东西？ 细胞系和细胞类型 细胞类型包括人类、哺乳动物、细菌、植物、藻类、霉菌、寄生虫等 细胞系包括CHO, COS, Jurkat, Saccharomyce
借助 CRISPR/Cas 系统介导的 HDR，实现优异等位基因替换和基因定点插入，进而创制农作物新种质，是农作物基因组编辑研究的热点和重要课题之一。但目前这一技术的广泛应用仍十分具有挑战性，主要原因在于：1）CRISPR/Cas系统引起的基因组靶位点DNA序列双链断裂（Double-stran
实验概要本实验在构建了OsAGAP瞬时表达载体的基础上，采用基因枪轰击洋葱表皮观察了GFP的瞬时表达。主要试剂高渗培养液(MS无机盐、40g/L甘露醇)，高渗固体培养基(MS无机盐、40g/L甘露醇、0.7% agar)，无水乙醇，无菌去离子水，12.5 M CaCl2，0.1 M亚精胺，等渗培养基
自从人类学会蓄养动物、耕作植物以来，我们的祖先就从未停止过对物种的遗传改良。过去的几千年里改良物种的主要方式：针对自然环境造成的突变或无意的人为因素所产生的优良基因和重组个体进行选育和利用，从而通过随机和自然的积累优化基因。然而这种极低几率且无人类控制性的被动模式大大阻碍了农业的发展，迫切地需要
自从人类学会蓄养动物、耕作植物以来，我们的祖先就从未停止过对物种的遗传改良。过去的几千年里改良物种的主要方式：针对自然环境造成的突变或无意的人为因素所产生的优良基因和重组个体进行选育和利用，从而通过随机和自然的积累优化基因。然而这种极低几率且无人类控制性的被动模式大大阻碍了农业的发展，迫切地需要
体细胞核移植是近些年来新出现的一种转基因技术。该方法是先把外源基因与供体细胞在培养基中培养，使外源基因整合到供体细胞上，然后将供体细胞细胞核移植到受体细胞——去核卵母细胞，构成重建胚，再把其移植到假孕母体，待其妊娠、分娩，便可得到转基因的克隆动物。在这一技术中，外源基因的稳定表达和重建胚的良好发育是