氨基酸分离与鉴定——双向层析法(twodimensionalchromatograp...

实验原理纸层析是以滤纸作支持物,用一定的溶剂系统展开,使混合样品达到分离分析的层析方法。其一般操作是将样品溶解在适当溶剂中,点样在滤纸的一端;再选用适当的溶剂系统,从点样的一端通过毛细现象向另一端展开,展开完毕,取出滤纸晾干或烘干,再以适当的显色剂或紫外灯、荧光灯下观察其图谱。样品经展开后某一物质在纸层析谱上的位置常用比移值Rf来表示。Rf=纸层析可看作是溶质(样品)在固定相与流动相之间的连续抽提,由于溶质在两相之间的分配系数不同而达到分离。一定的物质在两相间有固定的分配系数,因而在恒定条件(液剂、PH、温度)下,各物质有固定的Rf值,据此可达到分析鉴定的目的。由于滤纸纤维可吸收20~25%的水分;且其中6~7%以氢键形式与纤维素上羟基结合,一般条件下难脱去;所以纸层析实际上是以水相作固定相,展开的溶剂作流动相。纸层析操作按溶剂展开方向可分为上行、下行和径向三种。氨基酸分离一般用上行法。上行法又分单向(成分较为简单的样品)和双向......阅读全文

氨基酸的分离鉴定

一、目的通过氨基酸的分离,学习纸层析法的基本原理及操作方法。二、原理纸层析法是用滤纸作为惰性支持物的分配层析法。层析溶剂由有机溶剂和水组成。物质被分离后在纸层析图谱上的位置是用Rf 值(比移)来表示的:R=原点到层析点中心的距离原点到溶剂前沿的距离在一定的条件下某种物质的Rf 值是常数。Rf 值的大

利用双向层析法对氨基酸进行分离与鉴定

实验概要本实验介绍了氨基酸分离与鉴定——双向层析法(two-dimensional chromatography)的原理及操作步骤等。实验原理纸层析是以滤纸作支持物,用一定的溶剂系统展开,使混合样品达到分离分析的层析方法。其一般操作是将样品溶解在适当溶剂中,点样在滤纸的一端;再选用适当的溶剂系统,从

氨基酸分离与鉴定——双向层析法(twodimensional-chromatograp...

实验原理纸层析是以滤纸作支持物,用一定的溶剂系统展开,使混合样品达到分离分析的层析方法。其一般操作是将样品溶解在适当溶剂中,点样在滤纸的一端;再选用适当的溶剂系统,从点样的一端通过毛细现象向另一端展开,展开完毕,取出滤纸晾干或烘干,再以适当的显色剂或紫外灯、荧光灯下观察其图谱。样品经展开后某一物质在

氨基酸的定性鉴定原理

  实验原理:  纸层析法(paper chromatography)是生物化学上分离、鉴定氨基酸混合物的常用技术,可用于蛋白质的氨基酸成分的定性鉴定和定量测定。  纸层析法又称纸色谱法,是用滤纸为支持物,所用展层溶剂大多由水和有机溶剂组成,滤纸纤维与水的亲和力强,与有机溶剂的亲和力弱,因此在展层时

干细胞鉴定和分离

干细胞鉴定干细胞的功能是明确的。因此,分离和表征这种独立的细胞群体成为一项具有挑战性的任务。胚胎干细胞(ES)是植入前胚胎的内细胞群体,属于多能干细胞群体。干细胞研究主要有两种技术:一种是在体外成功培养人类胚胎干细胞。另一个重大突破是成人干细胞的侧向分化。干细胞的分离理想的分离干细胞群体应在体内确定

支原体的分离培养鉴定

支原体的分离培养鉴定溶脲脲原体(Uu)和人型支原体(Mh)是常见的致病性泌尿道支原体。根据支原体不同生化反应特性和对特定物质的不同抵抗力可用于分离鉴定支原体。【原理】标本分别接种于支原体鉴别培养液内。溶脲脲原体可产生脲酶,使分糖产氨,培养液呈碱性,指示剂由黄色变为粉红色。人型支原体能分解精氨酸产氮,

正粘病毒分离和鉴定

正粘病毒诊断 根据流感的典型临床症状及其高度的接触传染性、急性发作和迅速传播等特点,常可作出初步诊断。但为了弄清是由哪一型或哪一亚型病毒引起的,则必须进行实验诊断,即必须进行病毒分离和鉴定或作血清学检查,才能获得确诊,尤其是在首次发现疫情的地区。 (1)病毒的分离和鉴定 A.标本的采集和处理〓

支原体的分离培养鉴定

支原体的分离培养鉴定用于(1)检测支原体不同生化反应特(2)分离鉴定支原体。实验方法原理标本分别接种于支原体鉴别培养液内。溶脲脲原体可产生脲酶,使分糖产氨,培养液呈碱性,指示剂由黄色变为粉红色。人型支原体能分解精氨酸产氮,使含有精氨酸肉汤培养液呈碱性而呈粉红色。实验材料细菌样本试剂、试剂盒支原体分离

支原体的分离培养鉴定

溶脲脲原体(Uu)和人型支原体(Mh)是常见的致病性泌尿道支原体。根据支原体不同生化反应特性和对特定物质的不同抵抗力可用于分离鉴定支原体。【原理】标本分别接种于支原体鉴别培养液内。溶脲脲原体可产生脲酶,使分糖产氨,培养液呈碱性,指示剂由黄色变为粉红色。人型支原体能分解精氨酸产氮,使含有精氨酸肉汤培养

支原体的分离培养鉴定

溶脲脲原体(Uu)和人型支原体(Mh)是常见的致病性泌尿道支原体。根据支原体不同生化反应特性和对特定物质的不同抵抗力可用于分离鉴定支原体。【原理】标本分别接种于支原体鉴别培养液内。溶脲脲原体可产生脲酶,使分糖产氨,培养液呈碱性,指示剂由黄色变为粉红色。人型支原体能分解精氨酸产氮,使含有精氨酸肉汤培养

噬菌体的分离和鉴定

部分菌株对应的噬菌体分离过程步骤:1、噬菌体分离(1) 以新鲜鸽粪4g 加入100ml 普通液体培养基内,放入37 ℃温箱培养24h。(2) 次日从中取出10ml70 ℃加热30min ,离心2000r/ 10min ,上清液用滤器过滤后保存于4 ℃冰箱备用。(3) 在普通琼脂平板底面分别注明1

真菌的分离与鉴定的简介

  真菌的分离与鉴定是对真菌进行分离培养然后根据菌落的特征和镜下形态,结构以确定菌种。必要时通过生化反应、鉴别试验、动物接种等方法,以明确菌种

微生物分离培养和鉴定

1.培养基的选择用自动血培养分析仪时选用相应的血培养瓶,如需氧+厌氧,需氧+高渗等。2.分离和鉴定 当观察有细菌生长时或血培养仪阳性报警时,应及时作如下检验:(1)涂片染色镜检,结果及时与临床联系;(2)转种血平板、巧克力平板、厌氧血平板或其他特殊培养基等分离培养纯菌再进行鉴定;(3)同时做药敏试验

酵母菌如何分离及鉴定

酵母菌能够进行有氧呼吸和无氧呼吸,因此它在有氧和无氧的环境下都能存活,可以利用这一点把它分离出来。再者酵母菌是真核生物,可以用抗生素把它和细菌分离开来。

新城疫病原分离与鉴定

当临床诊断有新城疫发生时,应从发病禽或死亡禽采集病料,进行病原分离、鉴定和毒力测定。1 样品的采集、保存及运输1.1 样品采集1.1.1 采集原则。采集样品时,必须严格按照无菌程序操作。采自于不同发病禽或死亡禽的病料应分别保存和标记。每群至少采集5只发病禽或死亡禽的样品。1.1.2 样品内容发病禽:

腺病毒的病毒分离与鉴定

  1、分离培养 标本应尽早从感染部位采集。采集患者咽喉、眼分泌物,粪便和尿液等,加抗生素处理过夜,离心取上清接种敏感细胞(293、Hep-2或HeLa细胞等),37℃孵育后可观察到典型CPE,即细胞变圆、团聚、有拉丝现象,最突出的表现是许多病变细胞聚在一起呈葡萄串状。  2、病毒鉴定 用荧光标记的

质粒DNA的分离、纯化和鉴定

材料、设备及试剂  一、材料  含质粒的E. coli DH5α或JM系列菌株,1.5ml塑料离心管(又称eppendorf管),离心管架。  二、设备  微量取液器(20μl,200μl,1000μl), 台式高速离心机,恒温振荡摇床, 高压蒸汽消毒器(灭菌锅), 涡旋振荡器, 电泳仪,琼脂糖平板

皮肤干细胞的分离与鉴定

  皮肤干细胞的分离  皮肤干细胞的分离主要利用发现的相对特异的表面标志(如整合素家族成员和角蛋白家族成员)结合流式细胞术进行。  皮肤干细胞的鉴定  利用皮肤干细胞一些相对特异的标志建立了一系列的皮肤干细胞鉴别方法。最初,一些学者是从研究细胞黏附特性入手的。他们发现,在表皮基底细胞定向分化时,它会

厌氧菌的分离、培养及鉴定(二)

4.1.3 分离 (1)编号 取五支无菌水试管,分别用记号笔标明10-1、10-2……10-5。 (2)稀释 在无氧无菌的超净厌氧手套箱中的条件下,用无菌注射器吸取1mL混合均匀的液体样品,加入装有预还原生理盐水的厌氧试管中,用震荡器将其混合均匀,制成10-1稀释液。用无菌注射器吸取1mL10-1稀

厌氧菌的分离、培养及鉴定(一)

一 摘要: 1.1 实验内容: 厌氧菌的分离、培养及鉴定; 1.2 目的: 1 掌握厌氧菌的分离、培养及活菌计数的一般方法。 了解厌氧菌菌鉴定的一般方法。 2 复习并巩固平时所学的微生物知识与技能。 3 培养独立思考、设计和动手实验的能力。 二 介绍: 厌氧微生物在自然界分布广泛,种类繁多,其生理作

离子交换层析法分离氨基酸

实验概要本实验介绍了离子交换柱层析法的基本操作技术,采用离子交换树脂分离了氨基酸。实验原理离子交换层析法主要是根据物质的解离性质的差异而选用不同的离子交换剂进行分离的方法。各种氨基酸分子的结构不同,在同一pH时与离子交换树脂的亲和力有差异,因此可依据亲和力从小到大的顺序被洗脱液洗脱下来,达到分离的效

蛋白鉴定方法之氨基酸组分分析

  1977年首次作为鉴定蛋白质的一种工具,是一种独特的“脚印”技术。 利用蛋白质异质性的氨基酸组分特征,成为一种独立于序列的属性,不同于肽质量或序列标签。 Latter首次表明氨基酸组分的数据能用于从2-DE凝胶上鉴定蛋白质。 通过放射标记的氨基酸来测定蛋白质的组分,或者将蛋白质印迹到PVDF膜上

质粒DNA的分离、纯化和鉴定-(三)

操作步骤    一、 细菌的培养和收集    将含有质粒pBS的DH5α菌种接种在LB固体培养基(含50μg/ml Amp)中, 37℃培养12-24小时。用无菌牙签挑取单菌落接种到5ml LB液体培养基(含50μg/ml Amp)中,37℃振荡培养约12小时至对数生长后期。    二、 质粒DNA

双歧杆菌的分离、培养及鉴定

园友sakuyaandy:我们培养双歧杆菌是在厌氧培养箱中进行培养,如果没有的话,用厌氧瓶或厌氧缸都可以。培养基你用的是怎么改良的呢?我们是在MRS里面加入了L-半胱氨酸,不过这都是培养用的培养基,如果你需要区分菌落可以用X-GAL改良MRS可以起到鉴别做用,具体文献名称为园友jerrycs:厌氧微

疱疹病毒的病毒分离和鉴定

  病毒分离培养是当今临床上明确诊断疱疹病毒感染的可靠依据。可采集皮肤、生殖器等病变部位的水疱液、脑脊液、角膜刮取物、唾液等标本,接种人二倍体成纤维细胞株WI38及其它传代细胞株如Vero、BHK等,经24~48小时后,细胞则出现肿胀、变圆、细胞融合等病变。然后用HSV-1和HSV-2的单克隆抗体作

亚细胞结构的分离与鉴定1

细胞由各种亚细胞结构组成。其重要的研究手段之一是分离纯化亚细胞组分,观察它们的结构或进行生化分析。离心技术是实现这一目标的基本手段。一般认为,转速为10~25Kr/min的离心机称为高速离心机;转速超过25Kr/min,离心力大于89Kg者称为超速离心机。目前超速离心机的最高转速可达100Kr/mi

血浆清蛋白的分离纯化与鉴定

实验概要1.掌握蛋白质的分离技术2.掌握分段盐析、凝胶层析及蛋白质醋酸纤维薄膜电泳的原理及操作方法3.掌握电泳方法检测分离效果实验原理          不同的蛋白质的分子量、溶解度、以及在一定条件下带电的情况有所不同,可以更据这些性质的差别,分离及提纯各种蛋白质。利用硫酸铵分段盐析法将血清中的清蛋

亚细胞结构的分离与鉴定2

第三节 微粒体的分离细胞通过匀浆破碎时,细胞质膜碎成片段,这些膜片段的末端融合形成的直径小于100nm的小泡。来自不同细胞器(细胞核、线粒体、质膜、内质网等)的小泡有不同的特性,所以可以将这些小泡相互分离。由内膜系统衍生而来的小膜泡形成相似大小的膜泡异质性集合体,称微粒体(microsome)。分离

病原性球菌(pathogenic-cocci)的分离鉴定

病原性球菌主要包括3个属,即葡萄球菌属、链球菌属、和奈瑟球菌属。目的要求1、掌握葡萄球菌属的分离培养与鉴定方法 、菌落特点、菌体形态及染色性2、掌握链球菌属的分离培养与鉴定方法 、菌落特点、菌体形态及染色性材料浓汁标本(痰、分泌物、穿刺物)或血、尿、胆汁标本等革兰染液,血液培养基,兔血浆、生理盐水等

双歧杆菌的分离、培养及鉴定

  我们培养双歧杆菌是在厌氧培养箱中进行培养,如果没有的话,用厌氧瓶或厌氧缸都可以.培养基你用的是怎么改良的呢?我们是在MRS里面加入了L-半胱氨酸,不过这都是培养用的培养基,如果你需要区分菌落可以用X-GAL改良MRS可以起到鉴别做用,具体文献名称为园友jerrycs:    厌氧微生物在自然