慢病毒载体相关知识问答大总结

慢病毒包装技术专题Q:什么是慢病毒 ?A: 慢病毒载体 (Lenti vector)是用于感染细胞以实现稳定导入基因或siRNA的病毒载体系统,其感染效率可以达到100%。慢病毒和细胞结合后通过包装蛋白将含有目的基因或者干扰序列释放到细胞内。慢病毒RNA通过逆转录酶转录为DNA。DNA整合前复合体进入细胞核并整合到靶细胞的染色体DNA。由于靶基因或基因干扰序列整合到染色体上并且伴随着细胞分裂时DNA的复制一起复制,基因的导入能够获得稳定的表达。慢病毒的显著优势在于其可以整合到非分裂细胞,而其他载体(如非病毒载体、腺病毒载体、腺相关病毒载体)不具备整合到靶细胞染色体的特性,或者只能整合到分裂细胞的染色体(如常规的逆转录病毒)。目前我们使用的慢病毒载体是基于HIV-1改造而来,该载体使用最为广泛,经过科学家的多次改造在包装滴度和使用安全性等方面都非常理想。在实际的使用中我们可以用来表达目的基因或目的基因加上报告基因,近年来随着R......阅读全文

腺相关病毒载体的应用简介

  经过十几年的研究,重组腺相关病毒的生物学特性已被深入了解,尤其是其在各种细胞、组织和体内实验中的应用效果方面已经积累了许多资料。在医学研究中,rAAV被用于多种疾病的基因治疗的研究(包括体内、体外实验);同时作为一种有特点的基因转移载体,还广泛用于基因功能研究、构建疾病模型、制备基因敲除鼠等方面

简述腺相关病毒载体的应用

  经过十几年的研究,重组腺相关病毒的生物学特性已被深入了解,尤其是其在各种细胞、组织和体内实验中的应用效果方面已经积累了许多资料。在医学研究中,rAAV被用于多种疾病的基因治疗的研究(包括体内、体外实验);同时作为一种有特点的基因转移载体,还广泛用于基因功能研究、构建疾病模型、制备基因敲除鼠等方面

腺相关病毒载体的基本介绍

  腺相关病毒载体是利用天然存在的腺相关病毒某些特性经过基因工程改造后产生的一种可供人工转基因的载体。腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)是简单的非致病性单链DNA病毒,需要辅助病毒参与生活周期,辅助病毒通常为腺病毒(Ad)或者单纯疱疹病毒(HSV)。基因组两端为末端反

简述腺相关病毒的载体特点

  1、安全性好  2、对肌肉、肝脏、神经组织等感染效率高  3、载体自身免疫原性低  4、长期表达  5、比较稳定,易于保存和运输  

应用慢病毒载体检测CRISPRCAS9和TALEN脱靶

  近日,国际生物学期刊nature biotechnology在线刊登了美国科学家的一项最新研究成果,他们应用整合酶缺陷的慢病毒载体(IDLV)检测CRISPR-CAS9和TALEN对基因组造成的脱靶效应,最低可检测1%的脱靶频率。这项研究或对推广CRISPR-CAS9和TALEN技术,保证基因操

关于恒温摇床知识问答

恒温摇床不转了怎么回事 1、检查恒温摇床是否整机通电 2、控制面板是否显示正确 3、摇床电机滚轮上的皮带是否断裂,请及时更换 4、电机是否已损坏 5、启动电容是否已损坏,特别是恒温摇床需要手动摇一下才能正常摇动的情况, 恒温摇床生产企业提供恒温摇床售后保修三年,可信吗? 现在市场竞争激烈,价格

饮用水知识问答

1. 什么是生活饮用水,有什么卫生要求?生活饮用水是指供人生活的饮水和生活用水。我国现行的《生活饮用水卫生标准》(GB5749-2006)对生活饮用水水质规定了严格的卫生要求,即感官性状良好,透明、无色、无异味和异臭,无肉眼可见物,不含有病原微生物,水中所含的化学物质对人体不造成急性中毒、慢性中毒和

饮用水知识问答

1. 什么是生活饮用水,有什么卫生要求?生活饮用水是指供人生活的饮水和生活用水。我国现行的《生活饮用水卫生标准》(GB5749-2006)对生活饮用水水质规定了严格的卫生要求,即感官性状良好,透明、无色、无异味和异臭,无肉眼可见物,不含有病原微生物,水中所含的化学物质对人体不造成急性中毒、慢性中毒和

慢病毒脑炎和脑病的相关介绍

  已知者有:亚急性硬化性全脑炎、进行性多灶性白质脑炎、皮质纹状体脊髓变性、Kuru病。  慢病毒感染的特点为:感染与发病的潜伏期长,由数月到数年甚至数十年。亚急性或慢性发病。患者有免疫缺陷,主要为细胞免疫缺陷。中枢神经系统病变比较弥散呈多灶性。

黄病毒相关知识点

黄病毒是指一大群通过吸血的节肢动物而传播疾病的病毒。小球形,+ssRNA, 有季节性、地方性和自然疫源性。致病性强,病情重。流行性乙型脑炎病毒——生物学性状形态结构:简称乙脑病毒,基因组为单正链RNA。培养特点:出生2~3d的乳鼠脑内接种后3~5d即可发病;可在地鼠肾,幼猪肾等原代培养细胞内增殖,并

重组腺相关病毒载体的生产实验

瞬时转染 293 细胞制备无腺病毒重组腺相关病毒载体实验材料293组织培养细胞系pSub201质粒pXX2质粒pXX6质粒试剂、试剂盒完全DMEM 10%FBS培养基完全IMDM 10%FBS培养基CaCl2纯DMEM 2%FBS 培养基干冰 乙醇浴硫酸铵饱和硫酸铵乙醇PBS仪器、耗材组织培养板—次

SIRION将为Denali开发腺相关病毒载体

  近日,SIRION Biotech与Denali Therapeutics宣布,两家公司签订了一项研发许可和合作协议,SIRION将为Denali开发腺相关病毒载体(AAV),让基因疗法可以跨越血脑屏障,应用于治疗帕金森病(PD)、阿兹海默病(AD)、肌萎缩性侧索硬化症(ALS)、及其它神经退行

关于腺相关病毒载体的基本介绍

  腺病毒相关病毒(adeno-associated virus,AAV)是一类单链线状DNA缺陷型病毒。其基因组DNA小于5 kb,无包膜,外形为裸露的20面体颗粒。AAV不能独立复制,只有在辅助病毒(如腺病毒、单纯疱疹病毒、痘苗病毒)存在时,才能进行复制和溶细胞性感染,否则只能建立溶源性潜伏感染

腺相关病毒载体的基本构建介绍

  1、AAV病毒的感染细胞  AAV载体对于骨骼肌、视网膜、肝细胞、心脏平滑肌细胞、神经元细胞、胰岛B细胞、关节滑膜细胞等具有良好的感染效果,而对于淋巴细胞、造血干细胞、神经胶质细胞、成纤维细胞等感染效果较差。  2、病毒的加样量  病毒量为10-10V.P/Cell时最佳。如果太低,基本检测不出

简述腺相关病毒载体的基本特点

  一、优点  在辅助腺病毒存在下,AAV可以高效定点整合至人染色体中;而现在的AAV载体已经不需要腺病毒辅助,不插入宿主的基因组,而是游离于宿主细胞基因之外,呈卫星状稳定表达。  腺相关病毒载体(AAV)体内的感染效率极高。不同血清型可以相对特异性的感染心脏,肝脏,骨骼肌等。  腺相关病毒是RG1

总结Hyclone胎牛血清的相关知识点

 在细胞培养过程中,经常加入5%-20%的Hyclone胎牛血清澳洲,常使用的Hyclone澳洲胎牛血清浓度是10%。高浓度的血清可能改变细胞的基因表达谱,影响后续实验的结果,我们在实验中使用10%的Hyclone澳洲胎牛血清培养293T细胞,效果非常好。但是有些细胞也会使用5%的Hyclone F

手足口病防治知识问答

  1.什么是手足口病?得病后有什么表现?  答:手足口病是一种常见多发传染病,以婴幼儿发病为主,多种肠道病毒都能引起,EV71病毒是其中的一种。一般全年均有发生,5—7月为高发期。  手足口病一般症状较轻,大多数患者发病时,往往先出现发烧症状,手掌心、脚掌心出现斑丘疹和疱疹(疹子周围可发红),口腔

明尼克钝化产品知识问答

问题一:请对明尼克钝化产品总体情况作一下介绍?答:北京明尼克是美国专有技术产品SilcoTek®中国区核心代理商,我们在硅表面钝化处理领域为全国行业客户提供各方面技术支持和服务。 SilcoTek®是化学气相沉积(CVD)高性能表面材料的供应商,涂覆了钝化涂层的钝化产品具有超强的惰性、超高的

电热套基础小知识问答

提问:烧瓶能接触电热套壁吗,会不会有受热不均的问题?回答:可以,我们经常在电热套里加热蒸馏!不过温度不超过180度。应该会有加热不均匀的问题,毕竟不是水浴。提问:平底烧瓶是否可用电热套长时间加热?(通常都用圆底烧瓶进行加热,因为其受热均匀、耐压高。但我看到几篇“分析烟丝挥发性成分”的文章里,将烟丝和

生物安全柜知识问答

Q:我需要购买的是生物安全柜还是超净工作台   A:超净工作台提供的是对样品的保护,对操作者和环境是不提供保护的;广义上的生物安全柜同时提供对操作者、环境和样品的保护。所以,从您需要的保护情况上,可以得出正确的选择;   Q:我应该购买哪种类型、防护级别的生物安全柜   A:一般来说,除非需要做一些

塑化剂(DEHP)知识问答

  什么是塑化剂DEHP?  塑化剂DEHP是指“邻苯二甲酸(2─乙基己基)二酯”,是一种有毒的化工业用塑料软化剂,属无色、无味液体,添加后可让微粒分子更均匀散布,因此能增加延展性、弹性及柔软度,常作为沙发、汽车座椅、橡胶管、化妆品及玩具的原料,属于工业添加剂。  起云剂为何会有塑化剂成分?  起云

QPCR的基础知识问答

问:什么是QPCR?答:QPCR的英文全名是Real-time Quantitative PCR Detecting System。即实时荧光定量核酸扩增检测系统,也叫实时定量基因扩增荧光检测系统,简称QPCR。问:QPCR、DNA检测、PCR之间的关系?答:聚合酶链式反应(Polymerase C

石油产品基础知识问答

1、什么是油品的馏程     馏程是指以油品在规定条件下蒸馏所得到的以初馏点到终馏点表示蒸发特征的温度范围。主要用来判定油品轻、重馏分组成的多少,控制产品质量和使用性能等。 2、什么是辛烷值     代表点燃式发动机燃料抗爆性的一个约定数值。在规定条件下的标准发动机试验中,通过和标准燃料进行比较来测

Zeta电位知识总结

   Zeta电位是对颗粒之间相互排斥或吸引力的强度的度量。zeta电位的测量使我们能够详细了解分散机理,它对静电分散控制至关重要。对于酿造、陶瓷、制药、药品、矿物处理和水处理等各个行业,zeta电位 是极其重要的参数。    Zeta电位可用于测定分散体系颗粒物的固-液界面电性(ζ电位),也可用于

慢病毒实验程序

含有目的基因的慢病毒 RNAi 干扰载体的构建和质粒纯化,提取慢病毒载体,包装系统共转染病毒包装细胞293T等。 3) 培养 48hrs - 72hrs 左右,收集含有病毒的上清培养液。 4) 病毒的纯化和浓缩。 5) 分装、- 80 ℃保存。 6) 滴度测定目的基因检定,并出具检测报告。

慢病毒包装实验

实验材料 病毒试剂、试剂盒 无血清培养基脂质体胰酶含血清的培养基DMEM仪器、耗材 EP管6孔板CO2培养箱高速离心机-80°C冰箱实验步骤 以六孔板中的1孔为例,每个样品需要1×106个293T细胞。 1. 取1.5ml灭菌EP管,加入1.5μg包装混合质粒和0.5μg表达质粒以及250μl的无血

慢病毒包装实验

慢病毒载体包装之后成为假病毒颗粒后,可用于:(1)感染原代培养细胞;(2)制备稳定表达/沉默特定基因的单克隆细胞株;(3)in vivo的基因操作、转基因动物,特别是转基因大鼠的制备。实验方法原理慢病毒是反转录病毒的一种,具有反转录病毒的基本结构和特性:整合入宿主细胞基因组,长期表达,可用于转基因动

慢病毒包装实验

慢病毒包装实验             实验方法原理 慢病毒是反转录病毒的一种,具有反转录病毒的基本结构和特性:整合入宿主细胞基因组,长期表达,可用于转基因动物制备;但也有不同于反转

什么是慢病毒

慢病毒(LV)慢病毒载体(lentivirus vector,LV)属于逆转录病毒科(Retrovidae),为 RNA病毒。区别一般的逆转录病毒载体,它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。慢病毒载体的研究发展得很快,研究的也非常深入。该载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上,从而达到持久性表

腺相关病毒载体的基本信息介绍

  腺相关病毒载体是利用天然存在的腺相关病毒某些特性经过基因工程改造后产生的一种可供人工转基因的载体。腺相关病毒(adeno-associated virus,AAV)是简单的非致病性单链DNA病毒,需要辅助病毒参与生活周期,辅助病毒通常为腺病毒(Ad)或者单纯疱疹病毒(HSV)。基因组两端为末端反