凝胶阻滞

一、原理 电泳迁移率分析,也可称作迁移电泳,凝胶电泳分析,凝胶迁移率分析,条带移动分析或者凝胶阻滞分析,这种方法常用来研究蛋白质-DNA,蛋白质-RNA的相互作用,对照泳道(不含蛋白质的DNA/RNA探针)将出现单一的条带。如果蛋白质与片段结合,形成大的复合物,因此在凝胶上迁移的速度慢从来迁移率减低。 二、材料和试剂 1. DTT(Promega) 2. poly-dIdC(Sigma) 3. 32P-labeledprobe 4. BSA(Sigma) 5. 常用化学品试剂(Sigma) 6. 滤纸(GEHeathcare) 三、步骤 1. 制备聚丙烯酰胺凝胶 (1)装配板,垫片,及夹具。用1%琼脂糖封闭底部与侧面,防止胶漏。 (2)5%聚丙烯酰胺凝胶的制备 Platesize Large ......阅读全文

凝胶阻滞

一、原理 电泳迁移率分析,也可称作迁移电泳,凝胶电泳分析,凝胶迁移率分析,条带移动分析或者凝胶阻滞分析,这种方法常用来研究蛋白质-DNA,蛋白质-RNA的相互作用,对照泳道(不含蛋白质的DNA/RNA探针)将出现单一的条带。如果蛋白质与片段结合,形成大的复合物,因此在凝胶上迁移的速度慢从来迁移率减

DNA-结合蛋白的凝胶阻滞分析实验

实验材料 作为对照的核提取物或蛋白组分核提取物或蛋白组分试剂、试剂盒 Ficoll 400聚乙烯醇蔗糖染色液10X Tris-氨基乙酸或Tris-硼酸-EDTA(TBE)缓冲液4%~7% 中性聚丙烯酰胺凝胶poly(dI-dC)32P标记的对照DNA32P标记的靶DNA仪器、耗材 杂交膜实验步骤 材

DNA-结合蛋白的凝胶阻滞分析实验

凝胶阻滞试验分析 DNA 结合蛋白的方法是 Fried 和 Crothers(1981) 发明的,它是第一次为大肠杆菌乳糖阻抑物与其 DNA 结合位点的相互作用提供了动态的分析方法。本实验来源于分子克隆实验指南(第三版)下册,作者:〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验材料作为对照的核提取物

DNA-结合蛋白的凝胶阻滞分析实验

            实验材料 作为对照的核提取物或蛋白组分 核提取物或蛋白组分 试剂、试剂盒 Ficoll 400 聚

凝胶阻滞实验分析RNA蛋白质作用常数实验

凝胶阻滞实验(gel reiardadon assay,又称为 mobthty shift assay)方法简单、灵敏,可以定量的特性使它在研究转录和基因调控中广泛的应用。目前通常用于 RNA ( 或 DNA ) 结合蛋白的纯化,确定一种已知或可能的 RNA 结合蛋白所识别的序列,建立反应常数(如亲

凝胶阻滞实验分析RNA蛋白质作用常数实验

            实验方法原理 凝胶阻滞实验(gel reiardadon assay,又称为 mobthty shift assay)方法简单、灵敏,可以定量的特性使它在研究转录和基因调控中广泛的应用。目前通常用于 RNA ( 或 DNA ) 结合蛋

凝胶阻滞实验分析RNA蛋白质作用常数实验

实验方法原理 凝胶阻滞实验(gel reiardadon assay,又称为 mobthty shift assay)方法简单、灵敏,可以定量的特性使它在研究转录和基因调控中广泛的应用。目前通常用于 RNA ( 或 DNA ) 结合蛋白的纯化,确定一种已知或可能的 RNA 结合蛋白所识别

离子阻滞的定义

中文名称离子阻滞英文名称ion retardation定  义混合物通过特别制备的离子交换剂而使非电解质与电解质分离的过程。离子交换剂选择性吸附电解质,而非电解质不被吸附。应用学科生物化学与分子生物学(一级学科),方法与技术(二级学科)

室内传导阻滞

室内传导阻滞(intraventricularblock)又称室内阻滞,是指希氏束分叉以下部位的传导阻滞。室内传导系统由三个部分组成:右束支、左前分支和左后分支,室内传导系统的病变可波及单支、双支或三支。右束支阻滞较为常见,常发生于粉丝性心脏病、高血压性心脏病、冠心病、心肌病与先天性心血管病,

房室传导阻滞

房室传导阻滞(atrioventricularblock)又称房室阻滞,是指房室交界区脱离了生理不应期后,心房冲动传导延迟或不能传导致心室。房室阻滞可以发生在房室结、希氏束以及束支等不同的部位。【诊断要点】(1)第一度房室阻滞患者通常无症状。第二度房室阻滞可引起心搏脱漏,可有心悸症状,也可无症

阻滞椎的简介

  阻滞椎是脊柱畸形在影像学上的一种表现,其确切的发病率尚不清楚。先天性的颈椎融合是胚胎第3到8周时颈部体节没能正常分节的结果,早期在胚胎发育期的血管破裂可能是导致颈椎融合以及相关畸形的原因,部分患者为遗传所致。

心电图知识:窦房阻滞

窦房阻滞一、背景知识窦房阻滞(sinoatrialblock,SAB)又称窦房传导阻滞。窦房阻滞与窦性停搏相似,也是以一段时间内的P-QRS-T波脱落为特征。1979年Bigger认为,窦房阻滞可由自律性、传导性或两者均受损引起。Ⅰ、Ⅲ度窦房阻滞在体表心电图上无法诊断。Ⅱ度窦房阻滞因心房的节律

阻滞椎的诊断

  阻滞椎的诊断主要依据影像学检查,X线检查为首选,可以发现颈椎体的融合及其他脊  柱畸形。CT 扫描分辨力高,可通过多种重建方法来清晰显示畸形,对寰枕、寰枢关节的显示优于平片。合并脑、脊髓病变的患者,应首选MRI 检查。亦需结合患者具体的临床表现进行诊断。

一例臂丛神经阻滞致高位硬膜外阻滞病例分析

 患者,男,44岁,78kg,因“右桡骨骨折内固定术后16个月”,于2014年3月6日14时在臂丛神经阻滞麻醉下,行“骨折内固定物取出术”。 入手术室后,建立静脉通道,常规行ECG、血流动力学监测,各项指标正常。采用1%利多卡因、0.3%盐酸罗哌卡因行肌间沟法臂丛神经阻滞,穿刺部位相当于第6颈椎横突

酚妥拉明阻滞试验的概述

  酚妥拉明阻滞试验(Regitin试验)是通过下述原理进行的,酚妥拉明(即苄胺唑啉)是一种α-肾上腺素能受体阻滞剂,可阻滞儿茶酚胺的α-受体效应,使因儿茶酚胺水平增高引起的持续性或阵发性高血压迅速下降。因此通过对酚妥拉明的反应,可以判断高血压与嗜铬细胞瘤的关系。

心电图病例分析:完全性右束支阻滞合并左前分支阻滞...

心电图病例分析:完全性右束支阻滞合并左前分支阻滞伴I度房室传导阻滞实例解析: 一、图例资料: 患者男性,22岁,以心悸胸闷2天前来就诊。自诉于14岁时因"先天性心脏病(室间隔缺损)"做手术治疗,具体情况不明。     心电图诊断: 窦性心律 完全性右束支阻滞合并左前分支阻滞 I度房室传导阻

酚妥拉明阻滞试验发的概述

  酚妥拉明阻滞试验(Regitin试验)是通过下述原理进行的,酚妥拉明(即苄胺唑啉)是一种α-肾上腺素能受体阻滞剂,可阻滞儿茶酚胺的α-受体效应,使因儿茶酚胺水平增高引起的持续性或阵发性高血压迅速下降。因此通过对酚妥拉明的反应,可以判断高血压与嗜铬细胞瘤的关系。

酚妥拉明阻滞试验注意事项

  不合宜人群:暂时不明  检查前禁忌:  (1) 试验前停用镇静剂至少2天,降压药至少3天,利血平至少14天。  (2) 试验前患者平卧休息,周围环境应安静。  (3) 每分钟测量血压一次,直至血压平稳,持续在22.7/14.7kpa(170/110mmHg)以上,方可进行试验。  检查时要求:积

心脏传导阻滞的分类介绍

  分为:房室传导阻滞、室内传导阻滞。  1.房室传导阻滞  房室传导阻滞又称房室阻滞,是指房室交界区脱离了生理不应期后,心房冲动传导延迟或不能传导至心室。房室阻滞可以发生在房室结、希氏束以及束支等不同的部位。  2.室内传导阻滞  室内传导阻滞又称室内阻滞,是指希氏束分叉以下部位的传导阻滞。室内传

如何诊断窦房传导阻滞?

  主要依靠心电图来诊断。窦房传导阻滞可根据心电图特点分为一度、二度、高度及三度窦房传导阻滞。  一度窦房阻滞表现为窦房传导时间的延长,在体表心电图上难以诊断;二度窦房传导阻滞可根据病史、症状和心电图表现来确诊;三度窦房阻滞表现为窦性P波消失,与窦性停搏鉴别困难。

挑战心电图:这是哪种传导阻滞?

76岁男性,因偶发疲劳和头昏来诊。无晕厥和其他心脏症状,就诊时仍有头昏。既往有高血压、高脂血症病史,超声心动图显示舒张功能不全。12导联心电图如图1,提示什么?图1A.窦性心律,2:1房室阻滞,Mobitz II型B.窦性心律,2:1房室阻滞,Mobitz I型C.窦性心律,完全性心脏传导阻滞D.窦

阻滞椎的临床表现

  Klippel-Feil综合征是先天性颈椎融合畸形的特例。有如下表现:  1.颈部外观畸形:颈部短、后发际线低、颈部活动受限为典型三联征, 但同时具有以上3种征象者不到50%。此外斜颈、翼状颈蹼、面部不对称也可见于部分患者;  2. 神经症状:除寰枢关节直接受累外,所有神经损害在紧邻融合区上下的

下肢神经阻滞治疗骨科疼痛

椎管**物注射一直是外科手术或损伤下肢急性疼痛的首选治疗方法。虽然毫无疑问这些技术的有效性,但使用周围神经阻滞和留置导管可提供更大的灵活性。需要抗凝或血栓预防药物治疗的患者可能不适合进行椎管内手术。此外,周围神经阻滞不会出现尿潴留,双侧运动无力,恶心和呕吐,瘙痒和呼吸抑制。随着区域麻醉领域的不断发展

一度房室传导阻滞的阻滞部位在心电图上的表现

  (1)发生于心房内引起的一度房室传导阻滞的心电图特点:①P波增宽,有切迹,P-R间期延长,但P-R段大多不延长。而房室结的一度房室传导阻滞是P-R段延长,可伴或不伴有P波增宽。P-R间期延长的程度显著者(>0.40s)大多为房室结内一度阻滞,其次是由于心房内阻滞。②只有P-R间期延长,而无P波增

超声引导下双侧胸椎旁阻滞联合左侧迷走神经阻滞用于...

超声引导下双侧胸椎旁阻滞联合左侧迷走神经阻滞用于开腹胃造瘘术病例分析晚期肿瘤患者常常极度衰弱,且合并有多种疾病,使得麻醉风险明显增加,麻醉方式的选择也受到很多限制。因此,对患者进行仔细评估,选择适合的麻醉方式尤为重要。我们采用超声引导下双侧胸椎旁多点阻滞联合颈部左侧迷走神经阻滞,成功地应用于一例肺癌

2:1房室阻滞合并完全性右束支阻滞心电图解析

2:1房室阻滞是一种特殊类型的二度房室传导阻滞,指P波每隔一次被阻滞而不能下传。由于文氏型阻滞和莫氏型阻滞均可引起2:1房室阻滞,且PR间期固定,有时不易区别2:1房室阻滞是属于二度Ⅰ型还是二度Ⅱ型。一般来说二度Ⅱ型较为常见。 心电图表现: 1、可见P波按顺序地发出。 2、P波每间隔一次被阻滞不能下

酚妥拉明阻滞试验的正常值

  患者注射酚妥拉明后2分钟血压无明显下降,直至7分钟后血压仍无明显下降,故试验结果为阴性,结合病人临床表现嗜铬细胞瘤可能性不大。

酚妥拉明阻滞试验的检查过程

  [方法]  (1) 试验前停用镇静剂至少2天,降压药至少3天,利血平至少14天。  (2) 试验前患者平卧休息,周围环境应安静。  (3) 建立静脉通道,缓慢滴注生理盐水。  (4) 每分钟测量血压一次,直至血压平稳,持续在22.7/14.7kpa(170/110mmHg)以上,方可进行试验。 

窦房传导阻滞的病因分析

  1.大多见于器质性心脏病患者,冠心病是最常见的病因,约占40%,因心肌缺血导致窦房结周围器质性损害。其中,急性下后壁心肌梗死时窦房阻滞发生率为3.5%,比窦性心动过缓要少得多,其发病原因可以是继发于迷走神经张力增高,但窦房结缺血或梗死亦常见。此外,也见于高血压性心脏损害、风湿性心脏病、心肌病、先

酚妥拉明阻滞试验的正常值

  患者注射酚妥拉明后2分钟血压无明显下降,直至7分钟后血压仍无明显下降,故试验结果为阴性,结合病人临床表现嗜铬细胞瘤可能性不大。