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荧光定量PCRvs.恒温扩增,谁才是分子诊断的未来?

荧光定量PCR 和恒温扩增在分子诊断方面的应用日渐受关注,两种技术孰优孰劣,且听作者娓娓道来。基于核酸扩增的分子诊断,是通过引物介导特异性扩增目的基因,以检测内源性(遗传或变异)或外源性(病原体)目的基因的存在与否,从而对疾病的诊断和治疗提供信息和决策依据。其主要应用场景有传染病的诊断,血筛,肿瘤早期辅助诊断,肿瘤的分子分型,遗传病的诊断,产前诊断,组织分型等。其中在传染病的诊断和血筛方面,基于核酸扩增的分子诊断能缩短诊断的“窗口期”,并且可以定量对病原体进行检测。相比于传统的免疫诊断方式而言,有不可替代的优势。一方面,由于PCR技术的不断成熟,特别是实时荧光定量PCR (qPCR)的出现,使得基于qPCR的分子诊断产品日渐成为主流。这一块有几个明星产品:赛沛(Cepheid)的GeneXpert PCR分析仪,BioFire的ilmArray,IQuum的cobas Liat PCR System 以及Atlas Geneti......阅读全文

湖北新冠病毒检测试剂可先用后申报 这81家企业已可提供

  19、武汉中帜生物科技股份有限公司(027-59368696)  武汉中帜生物科技股份有限公司是一家专业从事分子生物检测及临床医学诊断新技术新产品研发、生产和销售为一体的医疗器械类高新技术企业。  公司主打产品多重呼吸道病原体核酸检测试剂基于自有核心专利技术——T7RNA恒温扩增和多生物素信号放

兽医体外诊断的趋势——分子诊断

宠物已成为现代人的重要家庭成员,围绕其吃穿用度、生老病死,形成了一条千亿级的“经济”产业链。其中,需求刚性大、消费支出高的宠物医疗更占据了产业链中的核心地位,成了宠物消费中的“大头”。宠物医疗服务包括为宠物提供疾病诊疗和日常保健服务,是宠物行业中仅次于宠物食品的第二大细分行业。按疾病种类划分,宠物医

MDx 2021:新冠快检/HBV/结核等病原检测技术平台的升级

  分析测试百科网讯 2021年5月20-21日,MDx 2021第七届中国先进分子诊断技术与应用论坛在上海新发展亚太JW万豪酒店开幕。本次论坛深度探讨分子诊断技术升级及产品申报与临床落地等前沿走向、基于测序的mNGS临床落地方案、纳米孔/单分子/固态纳米孔技术平台进展、PCR/RAA/dPCR等技

技术剖析| 分子诊断之争:LAMP VS. PCR

基于核酸扩增的分子诊断是通过引物介导特异性扩增目的基因以检测内源性(遗传或变异)或外源性(病原体)目的基因的存在与否,进而对疾病的诊断和治疗提供信息和决策依据。其主要的应用场景有传染病的诊断,血筛,肿瘤早期辅助诊断,肿瘤的分子分型,遗传病的诊断,产前诊断,组织分型等。其中在传染病的诊断和血筛方面,基

等温扩增技术的原理及应用

等温扩增技术(isothermal amplification technology,ITA)是近年来发展起来的基于恒温扩增的新型核酸扩增技术,主要包括环介导等温扩增(loop-mediated isothermal amplification,LAMP)[1]、交叉引物扩增(crossing pr

养殖场病原诊断新技术—基因试纸卡

  畜禽养殖场作为动物疫病传播的源头,在疫病发生时及时进行病原诊断,采取相应的应对措施,是目前动物疫病防控的关键环节。   目前国内动物疫病的病原学诊断试剂选择范围有限。而在通用的血清学检测试剂中,绝大多数是检测血清中抗体的免疫试剂,其结果更多反应了疫苗免疫效果,对病原感染只能间接分析,无法确

养殖场病原诊断新技术—基因试纸卡

畜禽养殖场作为动物疫病传播的源头,在疫病发生时及时进行病原诊断,采取相应的应对措施,是目前动物疫病防控的关键环节。 目前国内动物疫病的病原学诊断试剂选择范围有限。而在通用的血清学检测试剂中,绝大多数是检测血清中抗体的免疫试剂,其结果更多反应了疫苗免疫效果,对病原感染只能间接分析,无法确诊,

实验室HIV检测技术概述及进展

艾滋病(AIDS)又称获得性免疫缺陷综合征,是由人类免疫缺陷病毒(HIV)感染所引起的一种免疫缺陷性疾病。HIV感染的诊断是艾滋病预防控制 工作的重要组成部分,建立敏感实用的检测方法对于监测、诊断或血液筛查,控制艾滋病的流行显得尤为重要。以下本文就HIV的检测技术现状及进展做一综述。1 

微流控技术在临床检测中的应用

微流控技术是一种对微尺度流体(微升到皮升量级)进行精确控制和操纵的技术。近二三十年来,得益于纳米制造技术的成熟与生化技术对操纵微量液体的需求,微流控技术取得了飞速的发展。与传统的检测方法相比,基于微流控平台的检测技术具有节省样本与试剂用量,反应速度更快,高通量,易便携,自动化潜力高等优势。1998年

分子生物学常用实验技术(page 3)

分子杂交技术    互补的核苷酸序列通过Walson-Crick 碱基配对形成稳定的杂合双链分子DNA 分子的过程称为杂交。杂交过程是高度特异性的,可以根据所使用的探针已知序列进行特异性的靶序列检测。杂交的双方是所使用探针和要检测的核酸。该检测对象可以是克隆化的基因组DNA,也可以是细胞总DN

总统推荐、FDA特批的ID NOW 5分钟检测新冠病毒是啥原理?

根据雅培所说,其ID NOW COVID-19检测仪非常轻巧,只有6.6磅重,相当于一台面包机大小。无需将其送到中心实验室进行分析,而是直接在急救室或紧急护理诊所进行,这能减少部分患者所面临的长达数天的检测结果等待时间。医生将采集到病人鼻咽拭子的棉签直接插入机器,测试新冠病毒阳性反应只需要5分钟时间

盘点:分子诊断常用技术50年的沿革与进步

  一、基于分子杂交的分子诊断技术  上世纪60年代至80年代是分子杂交技术发展最为迅猛的20年,由于当时尚无法对样本中靶基因进行人为扩增,人们只能通过已知基因序列的探针对靶序列进行捕获检测。其中液相和固相杂交基础理论、探针固定包被技术与cDNA探针人工合成的出现,为基于分子杂交的体外诊断方法进行了

RT-PCR之外的新冠肺炎诊断方法

  目前关于新冠肺炎的检测方法主要以核酸检测为主,而核酸检测主要为传统的荧光定量PCR方法,需要进行反转录、荧光定量等操作步骤,操作过程繁琐,且有出现检测结果假阴性的概率。而在针对保证灵敏度和特异性的基础上,关于新冠病毒的核酸检测技术也在进一步优化。   恒温扩增   2月12日,中国新闻网报道

RPA(重组酶聚合酶扩增)技术原理及RPA与LAMP对比

英国TwistDx公司(前身为ASM科技有限公司)成立于1999年,基于英国剑桥Babraham研究院建立的生物技术公司。该公司通过突破等温DNA扩增,开发的重组酶聚合酶扩增专利技术(RPA),被誉为DNA诊断领域的革命性创新。(http://www.twistdx.co.uk) &nbs

一文读懂分子诊断常用技术(二)

二核酸序列测定测序反应是直接获得核酸序列信息的唯一技术手段,是分子诊断技术的一项重要分支。虽然分子杂交、分子构象变异或定量PCR技术在近几年已得到了长足的发展,但其对于核酸的鉴定都仅仅停留在间接推断的假设上,因此对基于特定基因序列检测的分子诊断,核酸测序仍是技术上的金标准。(一)第1代测序1975年

分子诊断常用技术(三)

二、核酸序列测定测序反应是直接获得核酸序列信息的唯一技术手段,是分子诊断技术的一项重要分支。虽然分子杂交、分子构象变异或定量PCR 技术在近几年已得到了长足的发展,但其对于核酸的鉴定都仅仅停留在间接推断的假设上,因此对基于特定基因序列检测的分子诊断,核酸测序仍是技术上的金标准。( 一) 第1 代测序

变性梯度凝胶电泳(DGGE)

简  介  这个方法是应用最早也是最常用的突变筛查方法之一,在过去的十年中经历了很大的改进,并被诊断室所广泛使用,最近有篇关于该问题的综述(Fodde>和 Losekoot 1994 年)。原  理  如果 DNA 双链分子全长不断增加温度或用化学变性剂处理,两条链就会开始

让孩子远离黑名单:PGD的前世今生

2000年,Katie与David相遇相爱了,他们很快就结婚并打算要一个属于他们的宝宝,然而医生告诉他们,David的父亲死于一种运动神经元病,也就是霍金所患的那种MND病,而他们的孩子也有一半的几率会患上这种疾病。当看到MND家谱列表上David的名字的时候,Katie感到十分绝望,“我们感到心寒

PCR原理分类应用及国内外主要品牌汇总

PCR概念PCR,中文名是聚合酶链反应(基因扩增)基本原理 类似于DNA的天然复制过程,其特异性依赖于与靶序列两端互补的寡核苷酸引物。PCR是模拟体内DNA复制过程,在体外特异性扩增DNA片段的一种技术。PCR的应用领域:1、遗传病和某些疑难病的诊断2、病原体的检测。某些恶性疾病一般用微生

血液病的分子生物学检查及其应用

血液分子生物学检验技术主要包括PCR技术、DNA测序技术、限制性片段长度多态性(RFLP)、转基因技术及基因芯片(DNA-chip)技术等分子生物学技术。目前,这些技术在血液学检验领域已得到广泛应用,如应用于血液病基因分析、基因诊断、白血病分型、指导治疗、判断预后和微小残留病检测等方面。随着分子生物

浅谈食品监测中微生物技术应用分析

   摘 要:我国的食品安全令人担忧,已经到了岌岌可危的边缘,作为检测部门如何快速、有效的检测食品中的有害物质,建立食品微生物快速检测方法,对食品质量进行监控尤为重要。本文详细的阐述了运用较多和较新的微生物快速检测技术的特点和发展。   一、前言   随着食品工业的快速发展,对食

感染性疾病诊断中即时检测(POCT)的应用

近年来,感染性疾病的新发突发不断威胁人类健康,非典型肺炎、中东呼吸综合征、流感、埃博拉、寨卡病毒、黄热病、裂谷热等传染性疾病的传播,成为全球公共卫生问题。随着城市化的发展、全球贸易往来的增加,环境改变加剧自然疫源性传染病的传播风险,感染性疾病的预防控制刻不容缓。因此,开展传染病的即时快速检测,对于感

感染性疾病基因诊断进展

感染性疾病有病原微生物引起,致病的病原微生物主要有病毒、细菌、衣原体、支原体和螺旋体等。这些病原体的传统检测方法通常采用形态学检查,体外培养和免疫学试验。但对某些难以培养的病原体,抗原抗体检测不能判断体内病原体 DNA 或 RNAde 复制情况,或存在检测灵敏度低等问题。自聚合酶链反应( PCR )

一文读懂分子诊断常用技术

  基于分子构象的分子诊断技术  (一)变性梯度凝胶电泳(denaturing gradient gel electrophoresis,DGGE)与单链构象多态性(single strand conformation polymorphism,SSCP)  1970~1980年间,Fischer等

十九大!看看分子病理领域,未来发展方向!

  今天党的十九大召开,习近平大大指出:中国特色社会主义进入新时代,我国社会主要矛盾已经转化为人民日益增长的美好生活需要和不平衡不充分的发展之间的矛盾。想想都觉得高中政治课本过时了,而考研又多了一道大题。然而这些年,医疗领域进展可不止一点!就让我们一起看看这些年,分子病理领域的发展!  其实相对于其

实时荧光定量PCR

聚合酶链式反应(Polymerase Chain Reaction,PCR)可对特定核苷酸片断进行指数级的扩增。在扩增反应结束之后,我们可以通过凝胶电泳的方法对扩增产物进行定性的分析,也可以通过放射性核素掺入标记后的光密度扫描来进行定量的分析。无论定性还是定量分析,分析的都是PCR终产物。但是在许多

实时荧光定量PCR

Real Time PCR实时荧光定量PCR   其定量的基本原理是在 PCR 反应体系中加入非特异性的荧光染料(如: SYBR GREEN I )或特异性的荧光探针(如: Taqman 探针),实时检测荧光量的变化,获得不同样品达到一定的荧光信号(阈值)时所

从新冠疫情看分子诊断POCT的发展

     疾病检测技术一直处于高速发展的过程中,越来越多的手段使人类对疾病的诊断日渐精准。但是,准确率更高的检测手段通常意味着更高的成本、更长的时间、更繁复且条件苛刻的诊断流程,这使得临床往往在面对高度传染性疾病时陷入两难的境地,即大规模确诊病人的紧迫性与捉襟见肘的高端

尖锐湿疣的病原学诊断试验

[摘要]目的探讨荧光定量聚合酶链反应(FQ-PCR)在尖锐湿疣诊断方面的作用。方法:第一阶段用FQ-PCR检测病理确诊的CA组15份标本和健康对照组35份标本;第二阶段用FQ-PCR及病理诊断同期检测临床送检病例53份标本,并做诊断性试验评价。结果第一阶段15例病理确诊的尖锐湿疣患者HPV611DN

实时荧光定量PCR技术在分子生物学和医学研究等领域的...

  定量PCR是在定性PCR技术基础上发展起来的核酸定量技术。实时荧光定量PCR技术于1996年由美国Applied biosystems公司推出,它是一种在PCR反应体系中加入荧光基团,利用对荧光信号积累的实时检测来监测整个PCR进程,最后通过标准曲线对未知模板进行定量分析的方法。该