报告基因:β半乳糖苷酶的原位染色实验

原位染色技术 实验方法原理 β-半乳糖苷酶是一种常用的报告基因分子,通过原位染色,在普通的光学显微镜下就可以用于检测到β-半乳糖苷酶的表达。 实验材料 β-gal表达质粒转染细胞 试剂、试剂盒 D-PBSA 染色液 仪器、耗材 6 孔培养板 恒温箱 倒置显微镜 ......阅读全文

报告基因:β半乳糖苷酶的原位染色实验——原位染色技术

β-半乳糖苷酶的原位染色可应用于:(1)确定导人的DNA是否已被整合到宿主细胞;(2)来示踪细胞与细胞相互作用。实验方法原理β-半乳糖苷酶是一种常用的报告基因分子,通过原位染色,在普通的光学显微镜下就可以用于检测到β-半乳糖苷酶的表达。实验材料β-gal表达质粒转染细胞试剂、试剂盒D-PBSA染色液

报告基因:β半乳糖苷酶的原位染色实验

原位染色技术             实验方法原理 β-半乳糖苷酶是一种常用的报告基因分子,通过原位染色,在普通的光学显微镜下就可以用于检测到β-半乳糖苷酶的表达。

报告基因:β半乳糖苷酶的原位染色实验

试剂、试剂盒 D-PBSA 染色液质粒实验步骤 一、材料非消毒物品 1. D-PBSA2. 底物:X-gal(nvitrogen),以二甲基甲酰胺配成 20 mg/mL,用多聚丙烯管-20℃ 避光保存,最长可达 6 个月 3. 固定液:1.8% 的甲醛和 0.05% 戊二醛,均以 PBSA 液配制;

报告基因:β半乳糖苷酶的原位染色实验

原位染色技术             实验方法原理 β-半乳糖苷酶是一种常用的报告基因分子,通过原位染色,在普通的光学显微镜下就可以用于检测到β-半乳糖苷酶的表达。

荧光原位杂交用于基因染色体定位和基因图谱绘制

  目前应用的基因定位的主要方法是FISH。分离到的DNA序列直接通过FISH,同时采用多种颜色荧光素的标记探针,结合中期染色体和间期细胞方面的信息,可快速确定一-系列DNA序列之间的相互次序和距离,完成基因制图。用不同颜色炎光索标记2个不同的DNA链,而且他们在染色体上的距离大于1Mbp时,可以依

利用单拷贝基因组探针及染色体彩绘方法进行荧光原位...

利用单拷贝基因组探针及染色体彩绘方法进行荧光原位杂交(FISH)实验材料 SSCD-PBSA糖原RNase多聚甲醛甲酰胺试剂、试剂盒 固定液乙醇杂交缓冲液标记探针橡胶乳黏剂封固剂实验步骤 含有重复序列探针的沉淀:大分子量黏粒探针往往含有重复序列,如果在杂交前不能封闭这些序列,将导致严重的非特异性杂交

荧光原位杂交染色体分析技术

  FISH是上世纪80年代中期发展起来并直到现在仍在不断改进、完善的技术。其基本过程是:首先制成染色体标本,和与所感兴趣的目的基因(或染色体片段)互补的探针,并在探针上标记荧光色素,当探针与染色体标本上的靶序列杂交后,利用荧光显微镜观察荧光信号从而获得染色体核型的信息。此技术具有灵敏度强、背景低、

荧光原位杂交的染色体分析

荧光原位杂交的染色体分析(一)标本的制备1.室温下,依次用70%、90%和100%的乙醇脱水5min。2.空气干燥载玻片。3.若短期使用,载玻片可在室温贮存数天。若载玻片要长期保存,应在室温下过夜使组织“老化”(aged),然后放入容器中,该容器密封于含干燥剂的塑料袋内,-70℃保存。根据作者的经验

染色体荧光原位杂交技术简介

一、定义:在细胞遗传学,分子生物学和免疫学相结合基础上发展的一种新科学,他利用已知的核酸序列作为探针,以荧光素直接标记或以非放射性物质标记后与靶DNA结合,在通过荧光素标记,最后在荧光显微镜下观察杂交信号,从而对标本中的待测核苷酸进行定性,定位和定量分析。二、原理:利用DNA变性后双链解开变成单链,

羊水细胞染色体制备方法(原位法)

细胞培养1. 将羊水(约20ml)转移到无菌的离心管中,1000rpm离心10分钟;2. 去除上清液,用于其它分析,保留细胞悬液约0.5~1ml,用培养基混匀到2~2.5ml左右;3. 将细胞悬液平分到3只Chromslide培养皿中;4. 培养24/48小时后,向每只Chromslide培养皿中加

荧光原位杂交染色体分析技术

  FISH是上世纪80年代中期发展起来并直到现在仍在不断改进、完善的技术。其基本过程是:首先制成染色体标本,和与所感兴趣的目的基因(或染色体片段)互补的探针,并在探针上标记荧光色素,当探针与染色体标本上的靶序列杂交后,利用荧光显微镜观察荧光信号从而获得染色体核型的信息。此技术具有灵敏度强、背景低、

单拷贝基因组探针及染色体彩绘方法进行荧光原位杂交

            实验材料 SSC D-PBSA 糖原 RNase 多聚甲醛 甲酰胺 试剂、试剂

利用单拷贝基因组探针及染色体彩绘方法荧光原位杂交

            实验材料 SSC D-PBSA 糖原 RNase 多聚甲醛 甲酰胺 试剂、试剂

利用单拷贝基因组探针及染色体彩绘进行荧光原位杂交

            实验材料 SSC D-PBSA 糖原 RNase 多聚甲醛 甲酰胺 试剂、试剂

利用单拷贝基因组探针及染色体彩绘进行荧光原位杂交

实验材料SSCD-PBSA糖原RNase多聚甲醛甲酰胺试剂、试剂盒固定液乙醇杂交缓冲液标记探针橡胶乳黏剂封固剂实验步骤含有重复序列探针的沉淀:大分子量黏粒探针往往含有重复序列,如果在杂交前不能封闭这些序列,将导致严重的非特异性杂交背景。人 Cot1 DNA 富含重复序列,可对黏粒的重复序列产生竞争性

染色体荧光原位杂交和染色体核型分析一样吗

  从定义来看:  荧光原位杂交方法是一种物理图谱绘制方法,使用荧光素标记探针,以检测探针和分裂中期的染色体或分裂间期的染色质的杂交。  染色体核型分析是将待测细胞的染色体依照该生物固有的染色体形态结构特征,按照一定的规定,人为的对其进行配对、编号和分组,并进行形态分析的过程。  从运用场景来看: 

基因组原位杂交的概念

中文名称基因组原位杂交英文名称genomic in situ hybridization;GISH定  义用核酸探针进行原位杂交,确定与探针互补的DNA序列在基因组上的位置。应用学科遗传学(一级学科),基因组学(二级学科)

原位合成的基因芯片制备技术

生物芯片制备中材料的固定方式主要包括原位合成法和点样法两种,点样法又分为接触式点样法和非接触式点样法。原位合成法主要用于基因芯片的制备,点样法可用于基因芯片和蛋白质芯片的制备。细胞芯片主要是通过细胞本身的贴壁生长来完成固定。组织芯片通过一些黏性溶剂(如石蜡)使组织切片固定在载体上。某些微流体芯片不需

中期染色体和间期核的原位杂交实验

实验材料含有人类中期染色体的载玻片或盖玻片试剂、试剂盒变性液乙醇Cot-1 DNA非同位素标记的 DNA 探针去离子甲醜胺基本杂交混合液甲酰胺SSC生物素检测溶液DAPI适当的抗褪色剂仪器、耗材玻片染色缸水浴箱相差显微镜盖玻片橡皮泥湿盒干燥的玻片盒指甲油实验步骤展开

原位PCR和原位RT

(一)、仪器设备 英国Thermo Hybaid原位PCR仪 。(二)、操作流程1、原位PCR 步骤1)预处理:(1)切片常规脱蜡;(2)0.2mol/L HCl处理10min;(3)5μg/ml蛋白酶K消化组织37℃10min;(4)Nase消化组织37℃ 30min;(5)梯度酒精脱水,室温干燥

染色体外基因的定义

染色体外基因:也叫细胞质基因,是细胞器和细胞质颗粒中的遗传物质统称。质粒、卡巴粒、叶绿体基因、线粒体基因等。

什么是染色体外基因?

染色体外基因:也叫细胞质基因,是细胞器和细胞质颗粒中的遗传物质统称。质粒、卡巴粒、叶绿体基因、线粒体基因等。

基因检测染色体分析

  染色体分析直接检测染色体数目及结构的异常,而不是检查某条染色体上某个基因的突变或异常。通常用来诊断胎儿的异常。  常见的染色体异常是多一条染色体,检测用的细胞来自血液样本,若是胎儿,则通过羊膜穿刺或绒毛膜绒毛取样获得细胞。将之染色,让染色体凸显出来,然后用高倍显微镜观察是否有异常。

染色体基因定位实验

实验方法原理基因是由平均1000~3000核苷酸组成的序列,在光学显微镜下是难以识别的。为显示染色体上特定基因必须具备以下三个重要条件:1.  需要具有能与目的基因相特异接合(互补)的核苷酸序列即探针(Probe);2.  需要有能与探针相结合的标记物(常用同位素和荧光素);3.  制备出良好的染色

染色体基因定位实验

实验方法原理 基因是由平均1000~3000核苷酸组成的序列,在光学显微镜下是难以识别的。为显示染色体上特定基因必须具备以下三个重要条件:1.  需要具有能与目的基因相特异接合(互补)的核苷酸序列即探针(Probe);2.  需要有能与探针相结合的标记物(常用同位素和荧光素);3.  制备出良好的染

原位基因扩增仪的功能特点和应用范围

原位基因扩增仪:用于从细胞内靶DNA的定位分析的细胞内基因扩增仪,如病源基因在细胞的位置或目的基因在细胞内的作用位置等。是保持细胞或组织的完整性,使PCR反应体系渗透到组织和细胞中,在细胞的靶DNA所在的位置上进行基因扩增,不但可以检测到靶DNA,又能标出靶序列在细胞内的位置,于分子和细胞水平上研究

放射自显影原位杂交玻片的压片固定_苏木精/伊红染色

实验材料水化并显影的原位杂交玻片试剂、试剂盒苏木精染料(用乙酸处理的Harris改进苏木精 无汞)0. 1%氢氧化铵伊红染料仪器、耗材玻璃染色盘实验步骤1) 将显影过的载玻片(在玻片架中)放入盛有水的染色盘中。2) 在染色盘中准备以下各组液体:1个盘: 苏木精染液2个盘: 水1个盘: 0.1%氢氧化

放射自显影原位杂交玻片的压片固定实验_姆萨-染色

实验材料水化并显影的原位杂交玻片试剂、试剂盒吉姆萨染色液(Fisher)710 mmol L磷酸钠缓冲液pH 6.8 (500 mmol L原液按1:50稀释)50%、70%、95% 和100% 乙醇、二甲苯封片介质为Permount (Fisher)或 Gelvatol (现称 Airvol来自A

冰冻切片组织蛋白酶B(CATHEPSIN-B)活性原位荧光染色检...

主要用途冰冻切片组织蛋白酶B(CATHEPSIN B)活性原位荧光染色检测试剂是一种旨在通过荧光染料甲酚紫标记的多肽底物作为探针,自由进入细胞内,受到组织蛋白酶B水解后,呈现荧光现象,以分析样品酶活性的权威而经典的技术方法。该技术经过精心研制、成功实验证明的。其适用于各种冰冻组织内组织蛋白酶B的

Y染色体上有哪些基因

  雄性基因,SRY基因,约78个编码蛋白质的基因,内部存在一些“回文结构”,可能有着基因修复作用,生育基因 (Y染色体上的重要功能基因都有两份拷贝,其中之一发生突变时,另一份就会发生作用)