《科学》:深度测序带来人类转录组“空前”全貌

德国科学家最近利用下一代测序技术和分析方法,得到了对于人类转录组(transcriptome)的崭新认识。相关论文7月3日在线发表于《科学》杂志。 到目前为止,人类转录组的功能复杂性尚未完全阐明。在最新研究中,通过对源自人类两大细胞系——胚肾和B细胞系的转录子(本)进行“鸟枪法测序”(shotgun sequencing,一种随机且高通量的序列测定方法),德国马普分子遗传学研究所和Genomatix测序软件公司的科学家揭示出人类转录组前所未有的复杂性和可变性。 他们发现,50%的转录子对应于特定的基因组域,其中有80%吻合已知的外显子(exon)。多聚腺苷酸化的转录组(polyadenylated transcriptome)的66%对应于已知基因,其余的34%则对应在未标注的基因组域中。很明显,还有大量的新基因候选活跃在被研究的细胞系中。而根据已知的转录子,研究人员发现,RNA测序可以比微阵列多探测到25%......阅读全文

单细胞测序数据分析中,如何避免假阳性结果?

在单细胞测序数据分析中,为避免假阳性结果,可以采取以下几种策略:  1. 严格的数据质量控制    - 对原始数据进行仔细的评估,去除低质量的细胞、测序深度不足或存在大量技术噪声的数据。    - 检查基因表达的分布是否符合预期,排除异常的数据点。  2. 合适的统计学方法和阈值设定  

中澳科学家对高粱进行全基因组测序分析

  由澳大利亚昆士兰大学、华大基因等单位的科学家对高粱进行了全基因组测序及分析,发现高粱基因组中存在大量的遗传变异,为高粱及其它粮食作物的育种改良提供了宝贵的遗传资源。8月28日,最新研究结果在《自然·通讯》杂志上发表。   中澳两国的科学家通过对44株不同来源的高粱样本,包括地方品种、改良品种和

单细胞测序的临床应用

近期精准医学的进展集中在发展基于基因组学的诊断和治疗。这些方法通常包括从患者的组织样本中生成DNA或RNA序列信息,并分析它以确定可用于诊断、预后或通知临床管理的特定特征。‘bulk’一词指的是从大量细胞中集体生成基因组数据的方法,或者在无细胞DNA的情况下,来自许多细胞的基因组材料。因此,这些基因

科学家完成小麦测序草图

    对面包型小麦基因组进行的初步测序有助于科学家的改良工作。  一些人相信,攀登农作物基因组中的珠穆朗玛峰——具有挑战性的小麦基因组——的艰巨任务已经接近完成。一个国际研究团队已经拿出了一份小麦脱氧核糖核酸(DNA)序列的草图——这份草图鉴别出了小麦的许多基因,并且可能勾勒出了有

PNAS:单细胞测序绘制大脑的细胞图谱

  斯坦福大学的著名学者Stephen Quake及其同事本周在《美国科学院院刊》(PNAS)上发表文章,介绍了人类脑细胞的单细胞转录组测序研究成果。  研究小组对近500个成人或胎儿脑细胞进行了单细胞RNA测序。利用这种方法,他们能够鉴定出大脑中所有主要的细胞类型,并确定神经元的亚型。他们还观察了

Namocell单细胞分离仪应用——单细胞测序

2018年11月,Namocell与CZ-Biohub(Chan Zuckerburg Biohub)合作,在单细胞测序领域做出了新的尝试。CZ-Biohub利用Namocell单细胞分离仪分选出目的B细胞,并且将其进行单细胞测序,为抗体新药的发现迈出了重要一步。单细胞RNA测序(scRNA-s

单细胞RNA测序发现新的免疫细胞

  最近在《Nature Immunology》发表的一项新研究,详细检测了一组新发现的免疫细胞(被称为ILC)。通过对单个扁桃体细胞的基因表达进行分析,瑞典卡罗林斯卡学院的科学家们,发现了三个以前未知的ILC子群,并揭示了关于“这些细胞在人体中如何发挥功能”的更多信息。  先天淋巴细胞(ILC)是

科学家用测序技术分析炎热潮湿环境中的古DNA

 Loltun灰岩洞凉爽的气候可能保护动物骨头中的DNA免受尤卡坦半岛高温的侵袭。  当2009年Tania Gutiérrez García将40块噬齿类动物的颌骨打包放入比鞋盒还小的包裹并带往加拿大时,她非常确信自己将失望透顶。当时,Gutiérrez是墨西哥国立自治大学生物

循环内肿瘤细胞测序与分析最新进展和挑战!

  循环肿瘤细胞(CTC)从原发性肿瘤组织脱落并被循环系统中的血液冲走。 这些CTC可以在循环系统中长存或殖民于新位置,并在远端器官形成转移性克隆。 目前,CTC分析已经成为临床上有效检测肿瘤进展和预后的工具。随着下一代测序(NGS)和单细胞测序(SCS)技术的进步,科学家可以获得CTC的完整基因组

单细胞测序数据分析软件的准确性如何评估?

评估单细胞测序数据分析软件的准确性可以通过以下几种方法:使用模拟数据基于已知的生物学模型生成模拟的单细胞测序数据,其中包含预设的细胞类型、基因表达模式和差异表达基因等。然后用待评估的软件分析这些模拟数据,并将结果与预设的真实情况进行比较。基准数据集利用已有的经过精心标注和广泛认可的基准单细胞测序数据

分享一些单细胞测序数据分析的实际案例

以下是一些单细胞测序数据分析的实际案例:癌症研究对肿瘤组织进行单细胞测序,揭示肿瘤细胞的异质性、肿瘤微环境中免疫细胞的组成和状态,以及发现新的治疗靶点。例如,在黑色素瘤的研究中,单细胞测序帮助确定了具有不同耐药性特征的肿瘤细胞亚群。神经科学分析大脑中的细胞类型和神经元连接,理解神经系统的发育和功能。

单细胞基因组测序如何实现:从实验到分析,步步解析

  随着生命科学研究的微观化,基于细胞群体的研究方法已不适用于某些研究领域(如肿瘤异质性、早期胚胎发育等)。单细胞基因组测序通过在单个细胞水平上进行测序,解决了用组织样本无法获得不同细胞间的异质性信息或样本量太少无法进行常规测序的难题,为科学家研究单个细胞的行为、机制等提供了新的方向。  【应用概览

单细胞测序数据分析软件的性能评估指标有哪些?

以下是一些用于评估单细胞测序数据分析软件的性能指标:细胞类型分类准确性计算软件所识别的细胞类型与已知的真实细胞类型之间的一致性,常用指标如准确率、召回率、F1 值等。聚类准确性评估软件对细胞聚类的效果,例如通过调整兰德系数(Adjusted Rand Index)、归一化互信息(Normalized

单细胞测序数据分析常用软件的功能有哪些?

以下是单细胞测序数据分析常用软件的一些常见功能:Seurat:数据预处理:包括数据标准化、归一化、过滤低质量细胞和基因。降维:如主成分分析(PCA)、t-SNE、UMAP 等。聚类:识别不同的细胞群体。差异表达分析:比较不同细胞簇之间的基因表达差异。细胞类型注释:基于已知标记基因或数据库进行细胞类型

PCR后测序结果怎样分析

首先,看测序峰图,如果结果的彩图显示峰型是尖锐单一的,碱基所对应的编码是一致的,那么可以判断序列是可以使用的.如果出现双峰,信号中断等异常现象,那么需要重新制备或者克隆后再测序.其次,将PCR产物在NCBI上blast,看是否与你预期想要的片段符合,如果是匹配度一致,那么可以进行下一步,例如克隆,表

PCR后测序结果怎样分析

首先,看测序峰图,如果结果的彩图显示峰型是尖锐单一的,碱基所对应的编码是一致的,那么可以判断序列是可以使用的.如果出现双峰,信号中断等异常现象,那么需要重新制备或者克隆后再测序.其次,将PCR产物在NCBI上blast,看是否与你预期想要的片段符合,如果是匹配度一致,那么可以进行下一步,例如克隆,表

PCR后测序结果怎样分析

首先,看测序峰图,如果结果的彩图显示峰型是尖锐单一的,碱基所对应的编码是一致的,那么可以判断序列是可以使用的。如果出现双峰,信号中断等异常现象,那么需要重新制备或者克隆后再测序。其次,将PCR产物在NCBI上blast,看是否与你预期想要的片段符合,如果是匹配度一致,那么可以进行下一步,例如克隆,表

PCR后测序结果怎样分析

首先,看测序峰图,如果结果的彩图显示峰型是尖锐单一的,碱基所对应的编码是一致的,那么可以判断序列是可以使用的。如果出现双峰,信号中断等异常现象,那么需要重新制备或者克隆后再测序。其次,将PCR产物在NCBI上blast,看是否与你预期想要的片段符合,如果是匹配度一致,那么可以进行下一步,例如克隆,表

全基因测序法分析STEC

产志贺毒素大肠杆菌(STEC)是引起人类疾病的重要食源性致病菌之一,该分离菌能引起溶血性尿毒综合症(HUS),导致人体肾衰竭。2011年7月,由STEC引发的疫情曾在德国北部造成了至少22人死亡。事件爆发后,科研人员借助于快速全基因组测序方法分析疫情,并开发出一种实时荧光定量PCR检测试剂,精

PCR后测序结果怎样分析

首先,看测序峰图,如果结果的彩图显示峰型是尖锐单一的,碱基所对应的编码是一致的,那么可以判断序列是可以使用的.如果出现双峰,信号中断等异常现象,那么需要重新制备或者克隆后再测序.其次,将PCR产物在NCBI上blast,看是否与你预期想要的片段符合,如果是匹配度一致,那么可以进行下一步,例如克隆,表

测序常见问题及其分析

  1、PCR 产物测序时出现重叠峰   问题图1(模板中有碱基缺失,往往是单一位点(1-1)或两个位点(1-2)碱基缺失导致测序   结果移码)   解决方法:将PCR 产物克隆到质粒(如T 载体)中挑单克隆测序,或将PCR 产物进行PAGE   纯化(至少琼脂糖充分电泳后切胶纯化)后再进

测序常见问题及其分析

  1、PCR 产物测序时出现重叠峰   问题图1(模板中有碱基缺失,往往是单一位点(1-1)或两个位点(1-2)碱基缺失导致测序   结果移码)   解决方法:将PCR 产物克隆到质粒(如T 载体)中挑单克隆测序,或将PCR 产物进行PAGE   纯化(至少琼脂糖充分电泳后切胶纯化)后再进

PCR后测序结果怎样分析

首先,看测序峰图,如果结果的彩图显示峰型是尖锐单一的,碱基所对应的编码是一致的,那么可以判断序列是可以使用的。如果出现双峰,信号中断等异常现象,那么需要重新制备或者克隆后再测序。其次,将PCR产物在NCBI上blast,看是否与你预期想要的片段符合,如果是匹配度一致,那么可以进行下一步,例如克隆,表

PCR后测序结果怎样分析

首先,看测序峰图,如果结果的彩图显示峰型是尖锐单一的,碱基所对应的编码是一致的,那么可以判断序列是可以使用的。如果出现双峰,信号中断等异常现象,那么需要重新制备或者克隆后再测序。其次,将PCR产物在NCBI上blast,看是否与你预期想要的片段符合,如果是匹配度一致,那么可以进行下一步,例如克隆,表

测序常见问题及其分析

1、PCR 产物测序时出现重叠峰问题图1(模板中有碱基缺失,往往是单一位点(1-1)或两个位点(1-2)碱基缺失导致测序结果移码)解决方法:将PCR 产物克隆到质粒(如T 载体)中挑单克隆测序,或将PCR 产物进行PAGE纯化(至少琼脂糖充分电泳后切胶纯化)后再进行测序。问题图2(PCR 产物不纯,

《科学》文章:中国已经成为测序强国

  2月3日出版的《科学》杂志发表文章,以华大基因为例,介绍了中国测序事业的发展。   文章说,随着欧洲和美国测序中心的成立,华大基因已成为唯一一个足迹遍布全球的基因组学公司;华大基因期望其日益增长的影响力为社会带来更多好处。   从成立以来,华大基因完成了许多重大国内项目,如SARS

科学依据/蛋白质测序仪

自著名的 Edman 降解技术成功从 N 末端开始测定蛋白质序列以来,蛋白质的结构分析有了重大进展。岛津 PPSQ -21A 蛋白测序仪(Protein sequencer)能够适于多种方法制备的样品。可进行 Pmol 水平的氨基酸序列分析。 LC 分析采用恒溶剂成分洗脱方式,氨基酸的鉴定、装置维护

我国科学家完成杜仲基因测序

  近日,我国科学家研究获得杜仲高质量基因组序列并解析了杜仲环境适应及胶生物合成机制。图片来源于网络  天然橡胶与石油、煤炭和钢铁并称为四大工业原料,是关系国计民生的基础产业和重要战略物资。杜仲是传统的名贵中药材,也是我国特有的产胶植物。在众多产胶植物中,杜仲产业化前景最大,极具开发潜力。近日,中国

!单细胞测序的”CPU-2.0”时代

  对单个人类细胞的基因组进行准确的变异检测和大范围单倍体型分析一直以来都是测序领域的巅峰挑战。单细胞测序使我们能在更高的分辨率下研究生命的机制。一方面,在像癌症这样的组织样本中存在大量具有不同基因组类型的单个细胞,因此需要分析单细胞水平基因组而不是大量细胞的平均值;另一方面,对于非常珍贵的细胞样品

单个循环肿瘤细胞RNA测序结果

  由麻省总医院,哈佛大学主持的一项最新研究发现了前列腺癌细胞对一种常见的癌症治疗方法产生抗性的原因,研究人员完成了前列腺癌单个循环肿瘤细胞的RNA测序,其中找到了非经典Wnt信号所起的关键作用。  这一研究成果公布在9月18日的Science杂志上。  Androgendeprivationthe