连接骨骼肌干细胞代谢与表观遗传的新纽带

NAD+依赖性去乙酰化酶Sirt1已经被发现在许多生物学过程中都发挥重要作用,近日,来自美国NIH的Vittorio Sartorelli研究小组发现,在骨骼肌干细胞中,Sirt1能够感受代谢变化信号并通过其去乙酰化酶活性影响H4K16乙酰化修饰,启动肌肉基因表达转录。这一研究成果发表在干细胞领域顶尖期刊Cell stem cell上。 细胞通过胞质内的糖酵解和线粒体内氧化磷酸化产生能量,细胞代谢除了提供稳定的能量供应,还会影响表观基因组,改变基因表达。当氧气供应降低,细胞通过无氧糖酵解合成ATP,而在有氧条件下,ATP的合成主要通过氧化磷酸化来进行,这一过程会导致细胞内NAD+含量增加。Sirt1属于III类去乙酰化酶家族,它能够通过NAD+感受细胞能量代谢变化,并通过其去乙酰化酶活性影响底物的乙酰化水平,将代谢信号转化为表观遗传信号,影响细胞基因表达。 研究人员发现,在生长条件良好的培养环境中,处于静止期的骨骼肌干细......阅读全文

骨骼肌细胞培养

  1.杀死动物,无菌取大腿肌组织,切成0.3~0.5厘米小块。  2.用不含钙镁离子的Hanks液配的0.25%胰蛋白酶消化,无菌纱网或纱布滤过,合成培养基加10%小牛血清培养,为促进分化可加1%的胎汁。  3.细胞接种量为2×106/皿,接种在胶原或明胶的底物上能促进细胞分化。明胶制备比较简单,

骨骼肌细胞损伤模型的建立

1  材料 地塞米松磷酸钠注射液(江苏第三制药厂,批号000706) ;RPMI - 1640 培养基(GIBCO ,USA)(每升含10 %小牛血清、L-谷氨酰胺0. 33mg、青霉素100u、链霉素100u、pH-7. 4) ; 胰蛋白酶(Difco ,Lot :12885655) ; 四甲基氮

骨骼肌细胞损伤模型的建立

1  材料 地塞米松磷酸钠注射液(江苏第三制药厂,批号000706) ;RPMI - 1640 培养基(GIBCO ,USA)(每升含10 %小牛血清、L-谷氨酰胺0. 33mg、青霉素100u、链霉素100u、pH-7. 4) ; 胰蛋白酶(Difco ,Lot :12885655) ; 四甲基氮

连接骨骼肌干细胞代谢与表观遗传的新纽带

  NAD+依赖性去乙酰化酶Sirt1已经被发现在许多生物学过程中都发挥重要作用,近日,来自美国NIH的Vittorio Sartorelli研究小组发现,在骨骼肌干细胞中,Sirt1能够感受代谢变化信号并通过其去乙酰化酶活性影响H4K16乙酰化修饰,启动肌肉基因表达转录。这一研究成果发表在干细胞领

骨骼肌细胞培养和肌细胞培养

骨骼肌细胞培养 1.杀死动物,无菌取大腿肌组织,切成0.3~0.5厘米小块。 2.用不含钙镁离子的Hanks液配的0.25%胰蛋白酶消化,无菌纱网或纱布滤过,合成培养基加10%小牛血清培养,为促进分化可加1%的胎汁。 3.细胞接种量为2×106/皿,接种在胶原或明胶的底物上能促进细胞分化

正常小鼠原代骨骼肌细胞培养

PriCells –正常小鼠原代骨骼肌细胞培养 一、实验试剂1、培养基: PriCells Medium + 10% FBS + 1% P/S + PriCells Supplement2、冻存液: PriCells Medium + 20% FBS + 10% DMSO3、洗涤液: 1 × PBS

细胞总乙酰化水平的快速测定方法

步骤一:亲和色谱分离提纯乙酰化蛋白 1. 用细胞裂解液裂解细胞,10000rpm 离心2 分钟,取上清备用。 2. 取20-40ul 抗乙酰化赖氨酸抗体填料(Anti-acetylated lysine Agarose,ICP0388,如右图所示), 用PBS 洗2 次,每次1ml。

细胞总乙酰化水平的快速测定方法

  步骤一:亲和色谱分离提纯乙酰化蛋白   1. 用细胞裂解液裂解细胞,10000rpm 离心2 分钟,取上清备用。   2. 取20-40ul 抗乙酰化赖氨酸抗体填料(Anti-acetylated lysine Agarose,ICP0388,如右图所示),   用PBS 洗2 次,每次1

细胞总乙酰化水平的快速测定方法

   细胞总乙酰化水平的快速测定方法    -------免疫亲和色谱-ELISA 方法   步骤一:亲和色谱分离提纯乙酰化蛋白   1. 用细胞裂解液裂解细胞,10000rpm 离心2 分钟,取上清备用。   2. 取20-40ul 抗乙酰化赖氨酸抗体填料(Anti-acetylated

什么是乙酰化?常见的乙酰化剂

乙酰化就是将有机化合物分子中的氮、氧、碳原子上引入乙酰基CH3CO-的反应,最常见的是组蛋白乙酰化。常用氯乙酰和醋酸酐等作为乙酰化剂。

基本方案3-成肌细胞移植到骨骼肌细胞

实验材料小鼠试剂、试剂盒以 F-10 DMEM 为主要的成肌细胞生长培养基灭菌的PBS经灭菌的加入 PBS 中的 BSA甲氧氟烷乙醇仪器、耗材台式离心机纱布或棉布有网格或分压器的玻璃房间或商用吸入室电动剪或锋利有齿的手术剪刀注射器实验步骤展开

乙酰化的概念及常见的乙酰化剂

乙酰化就是将有机化合物分子中的氮、氧、碳原子上引入乙酰基CH3CO-的反应,最常见的是组蛋白乙酰化。常用氯乙酰和醋酸酐等作为乙酰化剂。

细胞乙酰化的辐射增敏研究取得进展

  近日,中国科学院合肥物质科学研究院技术生物与农业工程研究所研究员黄青课题组在前期工作的基础上,开展了细胞乙酰化的辐射增敏研究,相关研究结果在辐射研究的专业期刊Mutation Research上在线发表。   组蛋白乙酰化是表观遗传修饰的重要方式之一。肿瘤的产生与组蛋白乙酰化与去乙酰化的调控

肌组织细胞培养实验——骨骼肌细胞培养实验

实验材料肌组织试剂、试剂盒Hanks胰蛋白酶血清胎汁仪器、耗材纱布实验步骤动物胚或幼体的大腿肌组织为最好的培养材料。取材常用生后1~2 天的乳鼠(Wistar 大鼠更好)。1.  杀死动物,无菌取大腿肌组织,切成0.3~0.5 厘米小块;2.  用不含钙镁离子的Hanks液配的0.25 %胰蛋白酶消

蛋白质组学揭示骨骼肌对改善新陈代谢的影响

研究人员发现骨骼肌是如何适应高强度间歇训练的,包括对控制新陈代谢和肌肉收缩的关键机制的改变。最近发表在《eLife》杂志上的一项研究为高强度间歇训练(HIIT)对人体骨骼肌的影响提供了新的见解。根据这项研究,HIIT增加了对能量代谢和肌肉收缩至关重要的骨骼肌蛋白质的数量,并从化学角度改变了重要的代谢

乙酰化的作用

乙酰化作用是生物体内经常进行的反应之一。例如:胆碱乙酰化形成生成乙酰胆碱,葡萄胺乙酰化生成乙酰葡萄胺。又如脂肪酸的合成,萜类化合物、胡萝卜素、类固醇的合成,都必须通过一系列的乙酰化反应。一般通过形成活性乙酰基即乙酰辅酶A而实现。

Nat-Commun:干细胞基因或可控制骨骼肌再生

图片来源:medicalxpress.com  2016年10月14日 讯 /生物谷BIOON/ --我们都知道,Prox1基因在胚胎发育过程中扮演着重要的角色,日前,一项刊登在国际杂志Nature Communications上的研究报告中,来自芬兰的研究人员通过研究发现,Prox1基因或许对于骨

从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞

在添加 20 %(fetal bovine serum,FBS)的 Ham’s F12 培养中,原代细胞容易生长。在不改变培养条件的情况下,这些细胞增殖和分化,融合形成多个细胞核的肌管。这证明培养的细胞具有成肌性。实验方法原理在添加 20 %(fetal bovine serum,FBS)的 Ham

从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞

实验方法原理 在添加 20 %(fetal bovine serum,FBS)的 Ham’s F12 培养中,原代细胞容易生长。在不改变培养条件的情况下,这些细胞增殖和分化,融合形成多个细胞核的肌管。这证明培养的细胞具有成肌性。实验材料 D-PBSA试剂、试剂盒 转运培养液生长培养液链酶菌蛋白酶液仪

研究揭示脂肪酸控制骨骼肌干细胞再生

  万一发生骨折,血液中的脂肪酸会向干细胞发出信号,使它们向成骨细胞发展。如果附近没有血管,则干细胞最终会形成软骨组织。这一现象表明,血管中特定营养物质直接影响干细胞发育的方向。相关结果由来自哈佛大学的研究者们发表在最近的《Nature》杂志上。  骨折后的修复是由骨骼祖细胞(skeletal pr

骨骼肌观察实验

实验材料人体全身肌肉解剖标本局部肌肉解剖标本模型实验步骤一、肌的形状和结构在全身肌肉标本上观察以下各肌:缝匠肌、腹直肌、腹外斜肌、眼轮匝肌、二腹肌、肱二头肌、肋间肌。了解它们的形状和结构特点,辨认它们各属于哪一种形状的肌。二、肌的辅助装置1.筋膜 用股部肌解剖标本观察,可见筋膜分为浅、深两层。浅筋膜

骨骼肌观察实验

实验材料 人体全身肌肉解剖标本局部肌肉解剖标本模型实验步骤 一、肌的形状和结构在全身肌肉标本上观察以下各肌:缝匠肌、腹直肌、腹外斜肌、眼轮匝肌、二腹肌、肱二头肌、肋间肌。了解它们的形状和结构特点,辨认它们各属于哪一种形状的肌。二、肌的辅助装置1.筋膜 用股部肌解剖标本观察,可见筋膜分为浅、深

从成年骨骼肌分离和培养成肌细胞实验——分离培养细胞

骨豁肌源性成肌细胞能够培养从几种成年动物骨骼肌分离的成肌细胞,可用于(1)肌细胞的结构研究(2)肌细胞功能研究(3)对肌细胞的相关课题研究(4)临床细胞移植。实验方法原理骨豁肌源性成肌细胞能够培养从几种成年动物骨骼肌分离的成肌细胞。在培养条件下,成肌细胞仍继续表达一些分化特征。成肌细胞称卫星细胞,分

乙酰化剂的特点

(1)产物转化率高,达到95%以上;(2)催化剂活性高,用量小;(3)反应条件温和,反应时间短;(4)催化剂可以重复使用数次仍保持高活性;(5)环保。

乙酰化剂的简介

  乙酰化剂又称为乙酰化试剂。将有机化合物分子中的氮、氧、碳原子上引入乙酰基CH3CO-的反应称为乙酰化反应,相应的试剂称为乙酰化试剂。   常用的乙酰化试剂有乙酰氯、乙酸酐和冰醋酸等,其中以冰醋酸最为价廉易得,乙酰氯反应最快。

乙酰化的特征过程

这种催化乙酰化反应的方法,其特征在于:在醇或酚与乙酸酐所进行的乙酰化反应过程中,以[MORBSA][HSO4]离子液体作催化剂,催化剂用量占反应原料总摩尔数的0.5~1.0%,反应结束后,分离催化剂,测定反应转化率;其具体步骤如下: 第1步[MORBSA][HSO4]离子液体的制备将摩尔比为1.1∶

简述乙酰化的作用

  乙酰化作用是生物体内经常进行的反应之一。例如:胆碱乙酰化形成生成乙酰胆碱,葡萄胺乙酰化生成乙酰葡萄胺。又如脂肪酸的合成,萜类化合物、胡萝卜素、类固醇的合成,都必须通过一系列的乙酰化反应。一般通过形成活性乙酰基即乙酰辅酶A而实现。

乙酰化的作用介绍

乙酰化作用是生物体内经常进行的反应之一。例如:胆碱乙酰化形成生成乙酰胆碱,葡萄胺乙酰化生成乙酰葡萄胺。又如脂肪酸的合成,萜类化合物、胡萝卜素、类固醇的合成,都必须通过一系列的乙酰化反应。一般通过形成活性乙酰基即乙酰辅酶A而实现。

乙酰化反应的方法

这种催化乙酰化反应的方法,其特征在于:在醇或酚与乙酸酐所进行的乙酰化反应过程中,以[MORBSA][HSO4]离子液体作催化剂,催化剂用量占反应原料总摩尔数的0.5~1.0%,反应结束后,分离催化剂,测定反应转化率;其具体步骤如下: 第1步[MORBSA][HSO4]离子液体的制备将摩尔比为1.1∶

乙酰化值的性状

性质:又称乙酰化值。。油脂中含羟基的脂肪酸可与乙酸酐或其他酰化剂作用生成相应的酯。乙酰化值指1g乙酰化的油脂所分解出的乙酰用氢氧化钾中和时所需的氢氧化钾mg数。