CRISPR技术牛人Science热议基因驱动技术
在7月出版的Science杂志上，几位著名的CRISPR技术研究人员发表了题为“Safeguarding gene drive experiments in the laboratory”的评述文章，探讨了以CRISPR为基础的基因驱动技术系统，指出在实验室中进行此种另类的转基因技术，需要慎之又慎。 今年3月，科学界出现了一个传言，称中国学者已成功地编辑了人类胚胎的基因，以一种人类无法完成的方式改变了他们的DNA。当然这一说法并不全面，但是已经非常火热的CRISPR/Cas9 基因组编辑方法又一次被放到了舆论的最前沿。 而所谓的基因驱动技术则是一个能够快速将特定性状扩散到群体中去的系统――这里的快速是相对于经典孟德尔遗传而言。这种技术目前主要以CRISPR为基础，具有非常广阔的前景，如根除疟疾、登革热等蚊媒疾病，恢复害虫对杀虫剂的敏感性，消灭或控制入侵物种等等。然而也有不少人担心，这样的基因修饰会“找到出路”逃出设计好......阅读全文
痘苗病毒系统基因表达实验
重组痘苗病毒（VTF7-3）感染后的脂质体转染 两种重组痘苗病毒共感染细胞 实验方法原理 本方案从构建外源基因位于 PT7 和 T7 终止子之间的质
痘苗病毒系统基因表达实验
实验方法原理 本方案从构建外源基因位于 PT7 和 T7 终止子之间的质粒载体开始，然后用重组质粒通过脂质体介导转染已经被vTF7-3（可以持续表达T7 RNA聚合酶的痘苗病毒）感染的细胞。收获后，基因产物在细胞内的表达可以用脉冲标记的方法或用「重组痘苗病毒及其产物的鉴定实验」中叙述的方法分
痘苗病毒系统基因表达实验（二）
实验方法原理含有 pT7 控制的外源基因（本实验「重组痘苗病毒（VTF7-3）感染后的脂质体转染」）的重组质粒，通过同源重组可整合到痘苗病毒中,并制备重组病毒储液。将此病毒储液与 vTF7-3 共同感染贴壁或悬浮细胞，在培养过程中，外源基因被高效的 T7 RNA 聚合酶转录，并在感染细胞的细胞质完成
痘苗病毒系统基因表达实验（一）
本节介绍依赖于在哺乳动物细胞质合成噬菌体 T7 RNA 聚合酶的瞬时细胞质表达系统。首先，将感兴趣的基因插入质粒中，使其位于 T7 RNA 聚合酶启动子（PT7）的控制下。应用脂质体转染，重组质粒进入感染了 vTF7-3 的细胞质中，而 vTF7-3 是一种能编码噬菌体T7 RNA聚合酶的重组痘苗病
T7RNA聚合酶系统基因表达实验
两种重组痘苗病毒共感染细胞 单病毒感染OST7-1细胞 利用VOTE系统 实验方法原理 含有 pT7 控制的外源基因（「痘苗病毒系统基
T7RNA聚合酶系统基因表达实验
实验方法原理 含有 pT7 控制的外源基因（「痘苗病毒系统基因表达实验」中「重组痘苗病毒（VTF7-3）感染后的脂质体转染」）的重组质粒，通过同源重组可整合到痘苗病毒中,并制备重组病毒储液。将此病毒储液与 vTF7-3 共同感染贴壁或悬浮细胞，在培养过程中，外源基因被高效的 T7 RNA
T7RNA聚合酶系统基因表达实验（二）
单病毒感染OST7-1细胞实验方法原理OST7-1 细胞来源于鼠 L929 细胞，能在细胞质中持续表达噬菌体 T7 RNA 聚合酶，因此，应用此细胞系无需用 vTF7-3 感染细胞。实验材料贴壁培养的单层 OST7-1 细胞含有 pT7 控制的外源基因的重组病毒储液试剂、试剂盒完全 MEM-2.5
T7RNA聚合酶系统基因表达实验（一）
本节介绍依赖于在哺乳动物细胞质合成噬菌体T7 RNA聚合酶的瞬时细胞质表达系统。首先，将感兴趣的基因插入质粒中，使其位于T7 RNA聚合酶启动子（PT7）的控制下。在培养过程中，外源基因被高效的 T7 RNA聚合酶转录。这种转染方案适用于分析的目的，因为不需要构建新的重组病毒，所以比较简单。对于大规
四环素控制系统诱导基因表达实验
实验方法原理 tTA 是一种融合蛋白，它是由来自于大肠杆菌的四环素抑制蛋白和疱疹病毒的 VP16 蛋白的转录激活区域组成的。在缺乏四环素时，tTA 就结合到并激活位于基因前端的由 Tn10 和一个小的 CMV 启动子组成的七聚体结构的四环素抗性控制子（简称 Tet P）。当 tTA 结合
T7RNA聚合酶系统基因表达实验（三）
实验方法原理VOTE是最近发展的痘苗病毒/T7 RNA聚合酶混合表达系统，将外源基因克隆到质粒 pVOTE. 1或 pVOTE. 2 中，通过同源重组将其整合到痘苗病毒 vT7lacOI 基因组中，制备重组病毒储液。在异丙基-β-D-硫代半乳糖苷（IPTG）存在的条件下，用重组病毒感染细胞，外源基因
四环素控制系统诱导基因表达实验
pTet-tTAK 稳定转染（第一轮） pTet-tTAK 稳定转染（第二轮） 实验方法原理 tTA 是一种融合蛋白，它是由来自于大肠杆菌的四环素抑
病毒基因检测系统的系统特点
1、DNA检测系统能提供诊断依据。使用基因芯片病毒检测系统，精确的诊断出导致泌尿生殖系统的致病微生物，为治疗感染疾病提供了科学的诊断依据。 2、生物基因疗法对顽固的感染症状效果不错。这种疗法特别针对病毒有极强的生物链的这个特点，从基因生物学的角度，直接破坏病毒基因生物链，达到治疗目的。
常见的自杀基因系统
常见的自杀基因系统有以下几种：(一) tk-GCV系统病毒、细菌、真核细胞中都存在胸苷激酶（HSV-tk）。甘昔洛韦(GCV)是临床上用于治疗单纯疱疹的药物。GCV在胸苷激酶的作用下生成三磷酸GCV，能阻断DNA合成产生细胞毒作用。(二) CD-5-FC系统胞嘧啶脱氨酶基因(CD)存在于许多细菌和真
基因质谱分析系统
基因质谱分析系统是一种用于预防医学与公共卫生学领域的分析仪器，于2012年6月19日启用 技术指标 可对4-30bp核酸片段进行分子量测定，每天分析完成>3000样本的1-36重RCR反应的检测和数据分析；一张芯片含384个孔，一次可任意选用1-384个孔，剩余孔可以分多次使用；数据读取完成
甲醇酵母基因表达系统
1 甲醇酵母表达系统的特点 1.1 宿主 七十年代巴斯德毕赤酵母曾被用于生产单细胞蛋白（SCP），有很好的发酵基础，菌体密度可达100g/L干重。其生长培养液的组分包括无机盐、微量元素、生物素、氮源和碳源，廉价而无毒。它能在以甲醇为唯一碳源的培养基中快速生长，其中醇氧化酶AOX——甲醇代谢途径
基因合成实验
实验方法原理 基因合成是指在体外人工合成双链DNA分子的技术，与寡核苷酸合成有所不同：寡核苷酸是单链的，所能合成的最长片段仅为100nt左右，而基因合成则为双链DNA分子合成，所能合成的长度范围50bp-12 kb。基因合成是用人工方法合
基因置换实验
—步基因破坏法 两步基因置换法 质粒改组 构建融合蛋白 实验材料 酵母菌株7-1 BY4741
基因合成实验
基因合成可应用于：（1）代谢通路合成；（2）基因网络构建；（3）疫苗设计。实验方法原理基因合成是指在体外人工合成双链DNA分子的技术，与寡核苷酸合成有所不同：寡核苷酸是单链的，所能合成的最长片段仅为100nt左右，而基因合成则为双链DNA分子合成，所能合成的长度范围50bp-12 kb。基因合成是用
基因互补实验
实验方法原理互补作用可以用来确定两个突变是属于同一基因还是属于不同的基因。如果是同一基因内两个不同位点的突变,它们就不能互补;如果是不同基因的突变则是互补的,此为基因间互补。有时同一基因内的两个突变位点也能发生基因内互补,但基因内互补所恢复的酶活性一般最多只有野生型酶活性的25%,而基因间互补则为1
基因合成实验
实验材料 DNA试剂、试剂盒 dNTPDAN聚合酶乙醇TE限制性内切核酸酶缓冲液仪器、耗材 水浴锅培养箱实验步骤 1. 将两种寡核苷酸各1 μg加入微量离心管中，加水至17 μl，再加2 μl 的10×测序酶缓冲液。70℃加热5 min，然后在合适的退火温度下保温5 min，取2 μl 留待以后
基因互补实验
实验方法原理 互补作用可以用来确定两个突变是属于同一基因还是属于不同的基因。如果是同一基因内两个不同位点的突变,它们就不能互补;如果是不同基因的突变则是互补的,此为基因间互补。有时同一基因内的两个突变位点也能发生基因内互补,但基因内互补所恢复的酶活性一般最多只有野生型酶活性的25%,而基因间互补则为
基因合成实验
基因合成可应用于：（1）代谢通路合成；（2）基因网络构建；（3）疫苗设计。难度系数 2.0共2人点评打分点评实验，有机会获丁当奖励 +收藏 8人收藏基因合成实验标签： 基因 合成基因合成可应用于：（1）代谢通路合成；（2）基因网络构建；（3）疫苗设计。基因合成实验实验方法原理基因合成是指在体外人工
基因系统发育的定义
中文名称基因系统发育英文名称gene phylogeny定 义通过比较DNA序列之间的差异建立的DNA分子之间的一种进化关系。应用学科生物化学与分子生物学（一级学科），核酸与基因（二级学科）
实验室纯水系统的系统工艺
1、采用离子交换方式，其流程如下： 原水→原水加压泵→多介质过滤器→活性炭过滤器→软水器→精密过滤器→阳树脂过滤→阴树脂过滤→阴阳树脂混床→微孔过滤器→用水点 2、采用两级反渗透方式，其流程如下： 原水→原水加压泵→多介质过滤器→活性炭过滤器→软水器→精密过滤器→一级反渗透 →PH调节→中间水箱
基因置换实验———步基因破坏法
基因置换是酵母研究中最有效和最重要的技术之一。这种技术能使一个在染色体正常位置的基因与其离体条件下构建的等位基因进行置换，使置换前后的菌株仅仅在这个特殊的等位基因上存在遗传差异。利用这种方法可以分析在基因克隆中由无效突变 (null mutationr) 或其他任何类型突变所引起的表型变化。无论在理
半导体泵浦激光原理实验系统/泵浦激光原理实验系统
半导体泵浦激光原理实验系统采用波长为808nm的半导体泵浦源，激光晶体为ND:YVO4以及KTP倍频晶体等，构成整个实验系统。主要适用于大学近代物理教学，学生可以自己动手，通过调整激光器光路，观察倍频现象，并测量倍频效率、相位匹配角等参数，从而进一步了解和掌握激光原理及激光技术。成套性：光学导轨、二
PCR基因扩增实验
[实验目的]通过本实验学习PCR反应的基本原理与实验技术。[实验原理]多聚酶链式反应（polymerase chain reaction,PCR）的原理类似于DNA的天然复制过程。在待扩增的DNA片段两侧和与其两侧互补的两个寡核苷酸引物，经变性、退火和延伸若干个循环后，DNA扩增2n倍。1．变性：加
报告基因实验
实验方法原理报告基因是一个分子生物学概念，它是指一类在细胞、组织/器官或个体处于特定情况下会表达并使得他们产生易于检测、且实验材料原本不会产生的性状的基因。作为报告基因，在遗传选择和筛选检测方面必须具有以下几个条件：①已被克隆和全序列已测定；②表达产物在受体细胞中本不存在，即无背景，在被转染的细胞中
目的基因在真核系统中的表达及细胞内的定位实验
实验方法原理 将氯化钙，DNA和磷酸缓冲液混合，形成包含DNA且极小的不溶的磷酸钙颗粒（沉淀）。磷酸钙-DNA复合物粘附到细胞膜并通过胞饮进入目的细胞的细胞质。实验材料 真核细胞试剂、试剂盒 HBSCaCl2TE质粒DNA仪器、耗材 CO2培养箱实验步骤 1. 转染的前一天在35 mm培养皿中植入
“基因剪刀”助科学家开发出基因驱动系统
根据英国《自然》杂志24日在线发表的一项遗传学最新研究成果，美国科学家利用CRISPR基因编辑技术，于实验室小鼠中成功开发出基因驱动系统。这一研究结果不但将改良小鼠模型，还有助于科学家研究复杂的遗传疾病。 基因驱动，即让特定基因有偏向性地遗传给下一代，使它们的遗传率高于随机几率，即所谓的“超孟