浙江打造省级细胞制备中心
近日，浙江省发改委、省科技厅、省卫计委、省食药监局联合发布了《关于开展浙江省区域细胞制备中心建设试点工作的通知》(以下简称通知)，正式批复同意杭州易文赛生物技术有限公司开展浙江省区域细胞制备中心建设试点工作，这标志着国内首个省级区域的细胞制备中心正式落户浙江。 浙江有了细胞产品“按需定制”中心 过去治肿瘤，人们想到的往往是手术、放疗、化疗。而现在，以免疫细胞来达到增强免疫力，杀死肿瘤细胞的治疗新技术，已成为当今世界生物领域研发的热点。然而，浙江目前正面临缺乏个体化细胞制备公共服务平台的瓶颈。 建立省级区域细胞制备中心，正是为了能够为浙江省内的医疗机构、科研院所等提供“按需定制”的研究级、临床级、可回溯的细胞制品，兼顾个体化治疗需求多样性、生产制备规模化与监督管理的便利性。 浙江省区域细胞制备中心将解决细胞来源以及细胞制备过程的安全性和可控性等问题，从而让细胞实现“批量生产”和“个性化订制”。细胞制备中心的功能定位是：......阅读全文
细胞制备流程及转化方法
细胞制备流程及转化方法1. 转移0.2-1ml培养物至装有500ml LB(或其他营养丰富的培养基)的1-2升摇瓶2. 37°C下剧烈振荡培养2-6小时3. 定时监控OD600值(培养1小时后每半小时测定一次)4。 当OD600值达到0.5-1.0时，从摇床中取出摇瓶，置于冰上冷却至少15分钟(需要
细胞/组织裂解液的制备
溶液准备 2×样品缓冲液：130mM Tris-HCl （ pH8.0 ） , 20% （ v/v ） 甘油 , 4.6% （ w/v ） SDS , 0.02% 溴酚蓝 , 2%DTT PBS （ pH7.4 ） :10mM Na2HPO4，1.8mM KH2PO4 ，50
使用饲细胞(Feeder－Cells)制备
（1）取原代培养的人或动物胚胎成纤维细胞，90%汇合时制成细胞悬液，再按105细胞/毫升重新接种培养。（2）在细胞半汇合时，准备0.25μg/ml的丝裂霉素C，按2μg/106细胞的量加入到培养瓶中过夜；或用射线单次照射，剂量30～50戈瑞。（3）细胞经上述处理后，Hanks液漂洗两次、更换培养液、
人外周血白细胞DNA制备
实验概要本实验从人外周血中制备了白细胞DNA，介绍了制备基本原理及操作步骤。实验原理从全血制备白细胞DNA，可用非离子去污剂Triton X-100直接破裂血中红细胞和白细胞的细胞膜，释出血红蛋白及细胞核，在反应体系中含一定浓度蔗糖，维护核膜内外的渗透压，以防止核膜破裂，通过离心等手段即可获得白
骨髓细胞单细胞悬液的制备
实验材料 骨髓液 试剂、试剂盒 肝素抗凝剂 PBS 实验步骤
骨髓细胞单细胞悬液的制备
实验材料 骨髓液 试剂、试剂盒 肝素抗凝剂 PBS 实验步骤
骨髓细胞单细胞悬液的制备
实验材料骨髓液试剂、试剂盒肝素抗凝剂PBS实验步骤1. 无菌抽取骨髓液 0.5 ml。2. 将骨髓标本滴入含 1000 U/ml 肝素抗凝剂的 1 ml PBS 液中。3. 再加入 PBS 液稀释至 10 mI。4. 用吸管吸取 5 ml 稀释骨髓液徐徐加入盛有 4 ml 的人类淋巴细胞分离液液面之
脱落细胞单细胞悬液的制备——尿液脱落细胞
实验方法原理在临床工作中，可以收集到大量自然脱落细胞，这些细胞标本经过简单处理，便可成为较好的单细胞悬液供流式细胞术分析。主要包括脱落细胞、胸腹水细胞、尿液、内镜刷检细胞等。实验材料尿液试剂、试剂盒生理盐水仪器、耗材尼龙网实验步骤1. 用一清洁器皿收集 24 h 尿液，置 4℃ 冰箱中自然沉淀 2
脱落细胞单细胞悬液的制备——食管拉网细胞
实验方法原理在临床工作中，可以收集到大量自然脱落细胞，这些细胞标本经过简单处理，便可成为较好的单细胞悬液供流式细胞术分析。主要包括脱落细胞、胸腹水细胞、尿液、内镜刷检细胞等。实验材料细胞试剂、试剂盒PBS仪器、耗材尼龙滤网实验步骤1. 将食管拉网器上的细胞洗脱到 20 ml PBS 液中，以 150
哺乳动物细胞中制备核和细胞质提取物—细胞质组分制备
实验材料细胞质提取物试剂、试剂盒10× 细胞质提取缓冲液仪器、耗材Beckman 50型固定角转子或相当的转子实验步骤1) 仔细测量细胞质提取物的体积（见基本方案步骤 7 中的上清）。加入 0.11 倍体积的10×细胞质提取缓冲液，充分混合。2)100 000 g 离心 1 h。3)将上清（± 10
浅谈羊水细胞培养基制备方法盖玻片制备
浅谈羊水细胞培养基制备方法-盖玻片制备 1、取样:挑选怀孕13 -14周女性，在无菌检测标准下提取羊水5m1，马上引入无菌检测离心管中 2、搜集:离心分离细胞，1000rpm10分鐘， 去上清，留0. 5ml， 轻打搅拌。 3、打疫苗:30mm培养皿里放盖玻片1张，每块滴搅拌的
感受态制备：酵母感受态细胞制备实验
酵母感受态细胞制备可以：（1）用于建立酵母转化体系；（2）用于酵母表达系统构建；（3）用于酵母其他分子生物学研究。实验方法实验材料酿酒酵母 试剂、试剂盒YPDA液体培养基 蒸馏水 甘油 二甲基亚砜 仪器、耗材培养皿 离心机 离心管 冰箱 实验步骤一、试剂与耗材 1. 试剂 细菌用-酵母提取物（Fi
细胞和亚细胞提取物的制备实验
从组织和细胞中提取蛋白可能是蛋白质组研究中最关键的一步，因为这一步影响了蛋白的产率、生物活性和特定目的蛋白结构的完整性。因此，我们要注意蛋白提取条件的选择。主要目标是在破坏力最小、保持蛋白结构完整性的前提下，可重复地使细胞最大程度地裂解。方案1 哺乳动物组织的匀浆实验实验方法原理对于细胞内蛋白的纯化
细胞和亚细胞提取物的制备实验
实验方法原理 对于细胞内蛋白的纯化和特性分析，重要的是选择一种有效的方法来破碎细胞或组织，使蛋白迅速地从胞内相对隔离的空间中释放到缓冲液中，而该缓冲液应对所研究的蛋白的生物活性没有影响。广泛使用的破碎软组织的方法之一是勻浆。在本方案中，讨论了使用机械力匀浆组织：在 Potter-Elvehjem
细胞和亚细胞提取物的制备实验
方案1 哺乳动物组织的匀浆实验 方案2 用于免疫沉淀的培养细胞的裂解实验 方案3 用于免疫印迹的动物培养细胞、酵母和细菌的裂解实验 方案4 氮舱减压法裂解培养细胞实验 方案5 细菌中重组蛋白的小量提取实验 方案6 细菌中重组蛋白的
血涂片的制备和细胞染色
一般性操作技术血涂片制备；细胞染色；显微检查；血液病诊断；染色不良；瑞特（Wright）染色法；酸性染料；伊红；碱性染料；亚甲蓝；吸附作用；PH对细胞染色的影响；甲醇；吉姆（Giemsa）染色法春天要常用润肤剂，它含有松香油脂酸和丰富维生素a，常用可加快皮肤血液循环，剌激面部细胞分泌，有效改善皮肤生
杂交瘤细胞(hybridoma)的制备
1. 骨髓瘤细胞的准备 选择生长状态良好的细胞，浑圆透亮，大小均一，边缘清晰，排列整齐，呈半致密分布。弃上清，以不完全培养基洗涤一次后，用10mL不完全培养基将骨髓瘤细胞（SP2/0）轻轻吹下。 2. 脾淋巴细胞的准备 a、取加强免疫后3天的小鼠，摘除眼球采血供分离阳性血清。 b、颈脱位将小鼠致死，
骨骼细胞染色体制备方法
1. 在含有细胞培养基的细胞培养管中无菌添加骨髓样本1ml(参考细胞密度
电镜酶细胞化学实验——样品制备
目前电镜能定位的酶主要有三类，它们是水解酶、氧化酶、转移酶。通过电镜酶细胞化学技术间接证明酶的存在，可定性研究细胞的标志酶，以及在正常和病理状态下酶的改变与疾病之关系。实验方法原理电镜酶细胞化学反应分两步：①细胞内酶在一定条件下与底物进行初级酶反应（形成初级产物）；②应用捕捉剂与初级产物反应形成电子
原代细胞核基质的制备
试剂和器材： 1. 硫酸铵（含10mmol/L Tris-HCl，（pH7.4）及0.2mmol/L MgCl2的1mol/L与0.2mol/L硫酸铵溶液）；2. 氯化镁（1mol/L储存液）；3. 苯甲基磺酰氟（PMSF）（无水乙醇配制的1mol/L储存液）；4. 纯化的细胞核保存于含0.25mo
简述神经祖细胞的制备过程
神经祖细胞属于再生医学细胞生物治疗技术，是未分化的专能细胞，是人体组织中的原始细胞，它包括多个层次即不同分化程度、不同分化方向的神经祖细胞 ，实质上它是一个异质性的细胞群的统称。经过严格的实验室提取、分离、纯化、筛选的过程，获得神经祖细胞。再对经过严格筛选出的神经祖细胞进行培养和增殖，获得患者疾
血涂片的制备和细胞染色
血涂片的制备方法和细胞染色:一般性操作技术血涂片制备；细胞染色；显微检查；血液病诊断；染色不良；瑞特（Wright)染色法；酸性染料；伊红；碱性染料；亚甲蓝；吸附作用；PH对细胞染色的影响；甲醇；吉姆（Giemsa)染色法春天要常用润肤剂，它含有松香油脂酸和丰富维生素a，常用可加快皮肤血液循环，剌激
DCCIK细胞制备方法（二）
1．外周血单个核细胞的采集 1.1 用血细胞分离机采集患者自身的外周血单个核细胞80 - 100ml； 1.2 淋巴细胞分离液密度梯度离心法进一步纯化单个核细胞(PBMC)； 1.3 无血清培养液洗涤2次，获得纯度在90%以上的PBMC，细胞数量需达到1-3 x 108。2．(可选步骤)肿
感受态细胞的制备
感受态细胞的制备1.挑取适当菌株的E.coli 单菌落接种于2ml SOB培养液中，37℃摇床过夜。2.取0.5-1ml过夜培养的菌液转种到50ml SOB中，18℃剧烈震荡，直到A600达到0.6。3.将培养物转移到50ml离心管中，4℃ 4,000rpm/min离心10min。同时在冰浴上配置T
真核细胞DNA的制备与定量
制备基因组DNA是进行基因结构和功能研究的重要步骤，通常要求得到的片段的长度不小于100-200kb。在DNA提取过程中应尽量避免使DNA断裂和降解的各种因素，以保证DNA的完整性，为后续的实验打下基础。一般真核细胞基因组DNA有107-9bp，可以从新鲜组织、培养细胞或低温保存的组织细胞中提取，常
细胞性免疫原的制备
细胞性免疫原主要是指人、动物、微生物或寄生虫的细胞。 一、绵羊红细胞的制备 绵羊红细胞是制备溶血素的免疫原，制备时采健康绵羊的颈静脉血，立即注入无菌有玻璃珠的三角瓶内，经充分摇动15～20min，以去除纤维蛋白，获得抗凝绵羊全血。另外，也可将全血和Alsever液以1：2混合，Alsever液既能起
血涂片的制备和细胞染色
血涂片的制备方法和细胞染色:一般性操作技术血涂片制备；细胞染色；显微检查；血液病诊断；染色不良；瑞特（Wright)染色法；酸性染料；伊红；碱性染料；亚甲蓝；吸附作用；PH对细胞染色的影响；甲醇；吉姆（Giemsa)染色法春天要常用润肤剂，它含有松香油脂酸和丰富维生素a，常用可加快皮肤血液循环，剌激
人癌细胞染色体制备
实验概要本实验介绍了人癌细胞染色体制备的基本原理及操作步骤。有助于学习人类染色体制备的常规方法，了解人癌细胞染色体及其变异。实验原理目前大多数癌症都建立了相应的细胞株或细胞系，体外培养的癌细胞多属于连续的周期细胞，可以用来制备染色体。国内外制备动物和人类染色体的常规方法是空气干燥法，该方法的关键包括
制备小鼠T细胞杂交瘤
可通过将活化的T 细胞和肿瘤细胞融合获得T 细胞杂交瘤。异质性的杂交瘤可以通过有限稀释法克隆获得表达特异性T 细 胞 受 体 （T C R ) 的杂交瘤。杂交瘤可以在缺乏生长因子的条件下大量的扩增。研究证明，杂交瘤对研究T C R 特异性识别抗原以及C D 3-T C R 复合物的生物化学和分子生物
杂交瘤细胞（hybridoma）的制备
1. 骨髓瘤细胞的准备选择生长状态良好的细胞，浑圆透亮，大小均一，边缘清晰，排列整齐，呈半致密分布。弃上清，以不完全培养基洗涤一次后，用10mL不完全培养基将骨髓瘤细胞（SP2/0）轻轻吹下。2. 脾淋巴细胞的准备a、取加强免疫后3天的小鼠，摘除眼球采血供分离阳性血清。b、颈脱位将小鼠致死，用75