反相键合相色谱中,C18柱的分离原理

针对常规C18反相色谱柱无法满足在高水相及纯水流动相条件下的液相色谱分析,采用混合键合的方式得到一种新型亲水......阅读全文

反相键合相色谱仪简介

将固定液的官能团键合在载体表面构成化学键合相,以化学键合相为固定相的液相色谱仪称为化学键合相色谱仪,简称键合相色谱仪。流动相极性比固定相极性强的键合相色谱仪称为反相键合相色谱仪。一、固定相:在载体表面键合含弱极性或中等极性的官能团,如十八烷基硅烷、辛烷基、甲基和苯基等。二、流动相:以水为主体,加适量

反相键合相色谱仪简介

将固定液的官能团键合在载体表面构成化学键合相,以化学键合相为固定相的液相色谱仪称为化学键合相色谱仪,简称键合相色谱仪。流动相极性比固定相极性强的键合相色谱仪称为反相键合相色谱仪。一、固定相:在载体表面键合含弱极性或中等极性的官能团,如十八烷基硅烷、辛烷基、甲基和苯基等。二、流动相:以水为主体,加适量

反相键合相液相色谱仪概述

反相键合相液相色谱仪又称非极性键合相液相色谱仪,在液相色谱仪中占有重要地位。一、分离机理:有疏溶剂理论和双保留机理。1、疏溶剂理论:疏溶剂理论认为非极性烷基键合相是在硅胶表面蒙覆了一层以Si-C键化学键合的十八烷基(或其它烃基)的分子毛。溶质分子(分析物)有非极性部分和极性官能团部分组成。当溶质分

什么是反相键合相色谱法

反相键合相色谱法  典型的反相键合色谱法是用非极性固定相和极性流动相组成的色谱体系。固定相,常用十八烷基(ODS或C)键合相;流动相常用甲醇-水或乙腈-水。非典型反相色谱系统,用弱极性或中等极性的键合相和极性大于固定相的流动相组成。  (1) 分离机制 反相键合相表面具有非极性烷基官能团,及未被取代

反相键合相色谱仪的分离机制

典型的反相键合相色谱仪是采用非极性键合相和极性流动相组成的色谱体系,固定相常用十八烷基(ODS或C18)键合相,流动相常用甲醇-水或乙腈-水。非典型反相键合相色谱仪是采用弱极性或中等极性键合相和极性大于固定相的流动相组成的色谱体系。反相键合相表面具有非极性烷基官能团和未被取代的硅醇基,硅醇基具有吸附

反相键合相液相色谱仪流动相概述

反相键合相液相色谱仪流动相溶剂极性越低,洗脱能力越强。一、常用流动相:1、甲醇-水。2、乙腈-水。3、四氢呋喃-水。溶剂强度为水<甲醇<乙腈<四氢呋喃。系统2较系统1好,原因如下:系统2的粘度较系统1小,柱效好。粘度降低,柱压降低,传质阻力降低(溶质扩散阻力降低), 柱效升高。乙腈的紫外末端吸收较甲

如何选择反相键合相色谱法的固定相

键合相色谱法是由液-液色谱法即分配色谱发展起来的。键合相色谱法将固定相共价结合在载体颗粒上,克服了分配色谱中由于固定相在流动中有微量溶解,及流动相通过色谱柱时的机械冲击,固定相不断损失,色谱柱的性质逐渐改变等缺点。键合相色谱法可分为正常相色谱法和反相色谱法。反相色谱法在反相色谱法中共价结合到载体上的

反相键合相色谱仪分离的疏溶剂理论

反相键合相色谱仪分离的疏溶剂理论认为非极性烷基键合相是在硅胶表面蒙覆了一层以Si-C键化学键合的十八烷基(或其它烃基)的分子毛。溶质分子(分析物)有非极性部分和极性官能团部分组成。当溶质分子的非极性部分与极性溶剂接触时,相互间产生斥力,此现象称为疏溶剂。当溶质分子的极性部分与极性溶剂接触时,相互间具

微流控芯片键合阳极键合

阳极键合是一种比较简单而有效的永久性封接玻璃片和硅片的键合方法,首先被用于含钠玻璃片和硅片的键合。在玻璃片和硅片上施加500~1500V高压,玻璃片接负极,硅片接正极,当温度升高到200~500℃时,玻璃片中的钠离子从玻璃-硅界面向阴极移动,在界面的玻璃一侧产生负电荷,硅片一侧形成正电荷,正负电荷通

反相键合相色谱仪的分子毛分离机理

反相键合相色谱仪的分子毛分离机理认为反相键合相色谱仪的非极性烷基键合相是一层键合在硅胶表面上的十八烷基的分子毛,这种分子毛有较强疏水特性。当用极性溶剂为流动相分离含有极性官能团的有机化合物时,分子中的非极性部分与固定相表面上的疏水烷基产生缔合作用,使它保留在固定相中;分子中的极性部分受到极性流动相的

反相键合相色谱仪的分子毛分离机理

反相键合相色谱仪的分子毛分离机理认为反相键合相色谱仪的非极性烷基键合相是一层键合在硅胶表面上的十八烷基的分子毛,这种分子毛有较强疏水特性。当用极性溶剂为流动相分离含有极性官能团的有机化合物时,分子中的非极性部分与固定相表面上的疏水烷基产生缔合作用,使它保留在固定相中;分子中的极性部分受到极性流动相的

反相键合相色谱仪的分子毛分离机理

反相键合相色谱仪的分子毛分离机理认为反相键合相色谱仪的非极性烷基键合相是一层键合在硅胶表面上的十八烷基的分子毛,这种分子毛有较强疏水特性。当用极性溶剂为流动相分离含有极性官能团的有机化合物时,分子中的非极性部分与固定相表面上的疏水烷基产生缔合作用,使它保留在固定相中;分子中的极性部分受到极性流动相的

反相键合相色谱中,C18柱的分离原理

针对常规C18反相色谱柱无法满足在高水相及纯水流动相条件下的液相色谱分析,采用混合键合的方式得到一种新型亲水

反相键合固定相色谱仪分离的疏溶剂理论

典型的反相键合固定相色谱仪是采用非极性键合固定相和极性流动相组成的色谱体系,固定相常用十八烷基(ODS或C18)键合固定相,流动相常用甲醇-水或乙腈-水。非典型反相键合固定相色谱仪是采用弱极性或中等极性键合固定相和极性大于固定相的流动相组成的色谱体系。疏溶剂理论把非极性烷基键合固定相看作是在硅胶表面

反相键合相色谱仪色谱柱的选择要求

反相键合相色谱仪色谱柱的选择要求包括选择性合适、色谱峰形良好、重现性好和应用范围宽等。一、选择性合适:满足不同的分离要求。由于硅羟基的影响,许多情况下硅胶基质对整个键合相的性能起决定作用。内嵌极性基团键合相在使用高比例水溶液流动相时,色谱性能稳定。二、色谱峰形良好:满足定量精度、灵敏度和分离度要求。

反相键合相色谱仪色谱柱的选择要求

  反相键合相色谱仪色谱柱的选择要求包括选择性合适、色谱峰形良好、重现性好和应用范围宽等。一、选择性合适:        满足不同的分离要求。        由于硅羟基的影响,许多情况下硅胶基质对整个键合相的性能起决定作用。内嵌极性基团键合相在使用高比例水溶液流动相时,色谱性能稳定。二、色谱峰形

清洗键合硅胶反相色谱柱的方法,你知道吗?

清洗键合硅胶反相色谱柱时,有时使用有机溶剂是不能去除色谱柱上的污染物的。如果金属离子被硅胶吸附或与键合,这种情况就特别明显了。这时,可以使用螯合试剂如0.05M的乙二胺四乙酸(EDTA)来冲洗色谱柱。EDTA会同许多金属形成络合物,并把他们进行溶解。在使用过了EDTA后,你可以用水彻底冲洗色谱柱。如

反相键合相液相色谱仪分析的疏溶剂理论

反相键合相液相色谱仪分析的疏溶剂理论认为,当溶质分子进入极性流动相后,即占据流动相中相应的空间,而排挤一部分溶剂分子。当溶质分子被流动相推动和固定相接触时,溶质分子的非极性部分或非极性分子会将非极性固定相上附着的溶剂膜排挤开,直接和非极性固定相上的烷基官能团相结合(吸附)形成缔合物,构成单分子吸附层

反相键合相色谱中,C18柱的分离原理

针对常规C18反相色谱柱无法满足在高水相及纯水流动相条件下的液相色谱分析,采用混合键合的方式得到一种新型亲水

正相与反相化学键合相色谱仪的比较

化学键合相色谱仪是采用化学键合相作固定相的液相色谱仪,有正相化学键合相色谱仪和反相化学键合相色谱仪。两种类型化学键合相色谱仪比较如下:一、固定相极性:1、正相化学键合相色谱仪:大。2、反相化学键合相色谱仪:小。二、流动相极性:1、正相化学键合相色谱仪:小至中等。2、反相化学键合相色谱仪:中至大。三、

影响反相键合相液相色谱仪溶质保留的因素

影响反相键合相液相色谱仪溶质保留的因素有溶质的极性、溶质分子中非极性部分的总表面积、键合相上的烷基总面积和流动相的表面张力等。一、溶质的极性:溶质的极性越弱,疏水性越强,保留值越大。二、溶质分子中非极性部分的总表面积:溶质和固定相接触的总表面积越大,保留值越大。三、键合相上的烷基总面积:烷基键合相的

反相键合相色谱仪固定相和流动相的选择

在反相键合相色谱仪中, C18是常用的键合固定相,水是常用的流动相弱组分,重要的是选择流动相的强组分,常用的强组分有甲醇、乙腈和四氢呋喃。反相键合相色谱仪流动相的选择规则如下:一、若样品中含有两个以下氢键作用基团(如-COOH、-NH2和-OH等)的芳香烃邻、对位或邻、间位异构体,可选用甲醇-水为流

正相与反相化学键合相色谱仪的比较

化学键合相色谱仪是采用化学键合相作固定相的液相色谱仪,有正相化学键合相色谱仪和反相化学键合相色谱仪。两种类型化学键合相色谱仪比较如下:一、固定相极性:  1、正相化学键合相色谱仪:大。  2、反相化学键合相色谱仪:小。二、流动相极性:  1、正相化学键合相色谱仪:小至中等。  2、反相化学键合相色谱

影响反相键合固定相色谱仪溶质保留值的因素

影响反相键合固定相色谱仪溶质保留值的因素有流动相、键合固定相和溶质等。一、流动相:组分的保留值随流动相极性的减小而减小。二、键合固定相:1、烷基覆盖量增加,k值增大。2、烷基链长增加,k值增大。三、溶质:1、非离子化合物:极性大,k值小。2、非极性化合物:分子表面积大,k值大。3、同系物:链长增大,

实验分析方法反相色谱的固定相全氟烷基键合固定相

近年来,有多家色谱公司制备了全氟代烷基键合硅胶色谱固定相。与传统烷基键合硅胶固定相比较,卤代化合物、芳香异构体和其他极性化合物的保留更强,洗脱顺序也发生了改变。与碳氢键相比,碳氟键的极性更强,在烷基固定相中引入氟会引起溶质-固定相作用的明显变化,使卤代化合物或其他极性化合物的保留更强,分离选择性也会

键合相液相色谱仪的键合固定相简介

键合相液相色谱仪的键合固定相是利用化学反应将有机分子键合到硅胶载体表面上而形成的固定相。一、优点:1、消除了载体表面的活性作用点和某些可能的催化活性。2、耐溶剂冲洗,使用过程中固定相不会流失。3、热稳定性好。4、表面改性灵活,容易获得重复性产品。5、载样量大,溶剂残留效应小,梯度洗脱平衡快。二、不足

反相键合相色谱仪C18柱的物理性质

反相键合相色谱仪C18柱的物理性质指标有硅胶纯度、柱尺寸、颗粒形状、粒径、表面积和孔径等。一、硅胶纯度:硅胶纯度指填料硅胶的纯度和残留金属离子的浓度。A类硅胶由于带负电荷的残留硅羟基和酸性表面上金属的含量高(硅羟基pKa低),导致碱性化合物发生拖尾。B类硅胶(高纯)由于金属含量低,硅羟基pKa高,碱

液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余的清洗

液相色谱仪检测的对象是高沸点、难气化的大分子化合物,其具有高效、快速、灵敏的特点,在生物医药研究、检测方面有较多的应用。然而,在使用液相色谱仪检测生物医药上的样品时,由于行业特性,样品中的蛋白质残留,时常会对液相色谱柱造成污染。本文主要介绍液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余清洗方法。    在检测

反相键合相色谱法常见的固定相和流动相是什么

在反相色谱法中共价结合到载体上的固定相是一些极性很弱的直链碳氢化合物,如正辛基等。在反相色谱中的流动相极性要很强,而水是极性最强的溶剂。所以常常用水和不同浓度的、可以与水混溶的有机溶剂混合,以得到不同强度的流动相,这些有机溶剂称为修饰剂。反相色谱中最常用的有机溶剂有甲醇和乙腈,此外,乙醇、四氢呋喃、

如何清洗液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余?

液相色谱仪检测的对象是高沸点、难气化的大分子化合物,其具有高效、快速、灵敏的特点,在生物医药研究、检测方面有较多的应用。然而,在使用液相色谱仪检测生物医药上的样品时,由于行业特性,样品中的蛋白质残留,时常会对液相色谱柱造成污染。本文主要介绍液相色谱硅胶键合反相柱上的蛋白质残余清洗方法。在检测生物物质