高效液相色谱法中硅胶键合柱的清洁和再生

再生被污染 HPLC 柱子的关键是知道污染物的性质并且能找到适当的溶剂来去除。如果污染是因为重复进样时强保留物质的累积引起的,利用简单的步骤来除去这些污染物往往能恢复其色谱行为。有时候,经过多次操作以后的色谱柱用 90~100%的溶剂 B(双溶剂反相系统中较强的溶剂)冲洗 20 个体积可以清除污染物。 例如,柱子中残留的脂质就能用非水溶剂如甲醇、乙晴、四氢 呋喃。 如果你使用的是缓冲液系统,不要直接切换到强溶剂,突然转换到高浓度有机溶剂可能会使 HPLC 流动体系中的缓冲液沉淀,这样会导致更大的问题如柱头 堵塞、管道堵塞、泵泄漏、活塞损伤或进样阀转轴失灵。应该先用无缓冲流动相(即把缓冲液换成水)。冲洗 5~10 个体积以后才更换强溶剂。 有时候,强溶剂也没法把残留在色谱柱上的污染物洗掉。那么更强的溶剂或者是一系列溶剂就有必要用来清洗柱子......阅读全文

什么叫色谱柱再生

就是因为分析过程中在色谱柱内有残留物,影响下次分析 要用GM0415的说法去做,是色谱柱恢复样品分析能力的一种过程

键合相液相色谱仪色谱柱填料的性能指标

键合相液相色谱仪色谱柱填料的性能指标有平均颗粒度及分布、颗粒形状、平均孔径及分布、化学键合相、端基封口、含碳量、硅胶的活性、硅胶的杂质含量、硅胶的pH稳定性和硅胶的热稳定性等。一、平均颗粒度及分布:        颗粒度越小,传质越好,涡流扩散越小,柱效越高,柱压越高。        颗粒分布越宽

色谱柱、保护柱再生(清洗)以及保存方法

当保护柱或色谱柱的压力渐升时,可通过以下方法对问题配件进行清洗再生。注意:清洗色谱柱时需要将保护柱和抑制器、电导池取下,连接顺序是泵→六通阀→色谱柱(需要反接)→废液管;清洗保护柱时需要将色谱柱和抑制器、电导池取下,连接顺序是泵→六通阀→保护柱(需要反接)→废液管 亲水性离子污染按以下步骤冲洗(流量

色谱柱、保护柱再生(清洗)以及保存方法

亲水性离子污染按以下步骤冲洗(流量 0.5 mL/min)1、反接柱子(保护柱或色谱柱)注意:一定要将抑制器从流路中断开,避免损坏抑制器。2、100分钟:10倍淋洗液浓度的溶液(起清洗作用的主要是Na2CO3)3、100分钟:正常浓度淋洗液4、正接 油性物质污染(如:有机物)按以下步骤冲洗(流量 0

液相色谱仪硅胶色谱柱如何清洗

在液相色谱仪检测分析过程中,硅胶色谱柱上被吸附的样品成分累积到一定程度时,就开始形成新的固定相。新的检测物质能与残留杂质作用形成一定的分离机理,从而导致保留时间波动,出现拖尾现象。随着时间的积累,色谱柱的反压就会超过泵所能承受的最大压力,使色谱柱无法工作以及在堵塞处产生空体积。    再生被污染的液

如何保证良好的silica硅胶色谱柱性能与柱寿命

silica硅胶色谱柱清洗方法与技巧在silica硅胶色谱柱检测分析过程中,silica硅胶色谱柱上被吸附的样品成分累积到一定程度时,就开始形成新的固定相。新的检测物质能与残留杂质作用形成一定的分离机理,从而导致保留时间波动,出现拖尾现象。随着时间的积累,silica硅胶色谱柱的反压就会超过泵所能承

如何保证硅胶基质色谱柱的性能与柱寿呢?

色谱柱键合基质分为硅胶基质、聚合物基质等,其中硅胶基质应用较为广泛,其特点主要包括以下3方面: (1)低pH值,硅胶键合键容易水解(pH8)。(2)在接近中性的条件时,硅醇基裸露,显酸性,不适宜分离碱性化合物。(3)某些硅胶被一定金属污染,这些金属会引起峰的不对称或拖尾,甚至化合物的死吸附。 如何保

键合相液相色谱仪色谱柱填料的性能指标详解

键合相液相色谱仪色谱柱填料的性能指标有平均颗粒度及分布、颗粒形状、平均孔径及分布、化学键合相、端基封口、含碳量、硅胶的活性、硅胶的杂质含量、硅胶的pH稳定性和硅胶的热稳定性等。一、平均颗粒度及分布:颗粒度越小,传质越好,涡流扩散越小,柱效越高,柱压越高。颗粒分布越宽,渗透性差,柱效低。二、颗粒形状:

色谱柱的保存与再生

保存色谱柱:1、如果流动相含有酸或无机盐,应当先用去离子水(20倍柱体积)冲洗干净。然后用用100%乙腈或甲醇保存色谱柱。zui后用柱子的接头密封,并放在稳定的环境中存放。   2、应避免色谱柱受到直接的机械冲击或摔落,避免造成色谱柱性能的降低 色谱柱的再生:用相当于20倍柱体积的溶剂按下列顺序冲洗

色谱柱的保存和再生

色谱柱的保存  ( 1 )、 反相色谱柱每天实验后的保养:   使用缓冲液或含盐的流动相,实验完成后应用 10% 的甲醇 / 水冲洗 30  分钟,洗掉色谱柱中的盐,再用甲醇冲洗 30  分钟。 注意:不能用纯水冲洗柱子,应该在水中加入 10%  的甲醇,防止将填料冲塌陷。   ( 2 )、 长期保

液相色谱柱的再生

  因为,色谱柱是消耗品,随着使用时间或进样次数的增加,会出现色谱峰高降低,峰宽加大或出现肩峰的现象,一般来说是柱效的下降。  1.反向柱的再生:  依次采用20~30倍的色谱柱体积的甲醇:水=10:90(V/V),乙腈,异丙醇作为流动相冲洗色谱柱,完成后再以相反顺序冲洗色谱柱。  2.正相柱的再生

关于YMC色谱柱的再生

高效液相色谱仪色谱柱在色谱分析系统中主要起着分离物质的作用,是液相色谱的核心部件,同时也是损耗品。样品中所含有的盐、脂质、疏水蛋白质和其它一些生物物质都有可能与色谱柱发生相互作用,一些保留值较小的物质如盐类比较容易被冲出色谱柱,而一些保留性较强的组分,流动相溶液不足以把这些物质洗脱下来,多次上样后,

色谱柱清洗、再生和储存

一、清洗与再生如果发生峰形改变、谱峰分叉、出现肩峰、保留时间改变、分离度变化、残留、鬼峰或反压升高,可能说明色谱柱受到污染。选择可能溶解可疑污染物的清洗选项。1、所有清洗步骤在高温下更有效。可以在70℃下进行清洗。2、使用上述色谱柱常用流速的一半进行清洗可能会很有用。在这种情况下出现高压的可能性就降

色谱柱的再生方法介绍

1、正相柱再生。顺次以正己烷、异丙醇、二氯甲烷、甲醇作流动相冲洗色谱柱每步注意平衡溶剂的顺序,不要颠倒每种流动相流经色谱柱的量为20-30倍柱体积(因异丙醇的粘度较大,冲洗过程中请随时注意调整冲洗的流速),用甲醇冲洗完后,再以相反的顺序冲洗色谱柱。要注意上述溶剂必需严格脱水。2、反相柱的再生。采用以

反相键合相色谱仪C18柱化学性质对柱性能的影响

影响反相键合相色谱仪C18柱性能的柱化学性质指标有键合类型、碳覆盖率和封端等。一、键合类型:1、单体键合:键合相分子与基体单点相连。单齿键合传质速率高,色谱柱平衡快。2、聚合体键合:键合相分子与基体多点相连。双齿键合增加色谱柱稳定性和载样量。二、碳覆盖率:碳覆盖率指与基质相连的键合相的量。高碳覆盖率

液相色谱仪键合相制备时的硅胶预处理

液相色谱仪键合相制备时,作为载体的硅胶预处理包括酸处理、中和与干燥等。一、酸处理:1、酸处理的目的:(1)洗去硅胶制备、运输和保存过程中进入的污染物。(2)除去硅胶表面层的金属氧化物杂质,如Na+、Ca2+、Al3+和Fe3+等。(3)使硅胶表面的硅氧烷键打开,形成尽可能多的自由羟基,有利于反应。2

液相色谱仪色谱柱的再生

液相色谱仪色谱柱长期使用后柱效会下降(色谱柱的理论塔板数减小),可对色谱柱进行再生。一、建议用来冲洗色谱柱的溶剂体积:1、Ф4×125mm色谱柱:柱体积为1.6mL,所用溶剂体积为30mL。2、Ф4×250mm色谱柱:柱体积为3.2mL,所用溶剂体积为60mL。3、Ф10×250mm色谱柱:柱体积为

色谱柱再生——污染填料后对色谱柱的处理过程

1、故障现象用户反映YWG C18 10μ(4.6mmX150mm)色谱柱使用20天左右后,柱压升高约1Mpa左右,分离效果变差,用蒸馏水清洗色谱柱没有明显改善。色谱柱分离度不好,柱效不高,可能是用户分析发酵液,简单的过滤后进样分析,其中的蛋白质等可能没有去除完全,致使过多的蛋白质沉淀在色谱柱中,加

色谱柱再生——污染填料后对色谱柱的处理过程

1、故障现象 用户反映YWG C18 10μ(4.6mmX150mm)色谱柱使用20天左右后,柱压升高约1Mpa左右,分离效果变差,用蒸馏水清洗色谱柱没有明显改善。 色谱柱分离度不好,柱效不高,可能是用户分析发酵液,简单的过滤后进样分析,其中的蛋白质等可能没有去除完全,致使过多的蛋白质沉淀在色谱柱中

色谱柱的清洗和再生方法

除非特殊说明,在所有情况下,所用溶剂的体积应该是色谱柱体积的40~60倍。应在清洗过程开始和结束时各测一次柱效和容量因子等,比较色谱柱性能的改善,以确定清洗的效果。确保色谱柱中没有样品和缓冲溶液,清洗前所用的溶剂应与最初清洗时所用的溶剂相溶。应确保实验测试时所用的流动相与色谱柱中最后的溶剂相溶。

液相色谱柱的再生处理

色谱柱使用久了,会出现分离度降低,理论塔板数降低等柱效降低的现象,适当处理能使柱效恢复。但不是所有柱子都能倒冲的,最好问问生产商。不了解的话,还是按下面的方法处理一下试试。         常规处理:硅胶、氧化铝、极性键合相色谱柱每一次用完后用低流速长时间的二氯甲烷或正己烷等溶剂冲洗;键合相硅胶色谱

色谱柱的平衡和再生技巧

反向色谱柱在经过出厂测试后是保存在甲醇(或乙腈)/水中的。请一定确保您所使用的活动相和甲醇(或乙腈)/水互溶,由于色谱柱在运输过程中可能会干掉,因此在用活动相分析样品之前,应使用分10-20倍的体积的甲醇或乙腈平衡色谱柱。  假如您所使用的活动相中含有缓冲盐,应留意用含水量很高(约95%)的活动

液相色谱柱的再生处理

液相色谱柱的再生处理色谱柱使用久了,会出现分离度降低,理论塔板数降低等柱效降低的现象,适当处理能使柱效恢复。但不是所有柱子都能倒冲的,zui好问问生产商。不了解的话,还是按下面的方法处理一下试试。常规处理:硅胶、氧化铝、极性键合相色谱柱每一次用完后用低流速长时间的二氯甲烷或正己烷等溶剂冲洗;键合相硅

什么是液相色谱柱再生

色谱柱使用久了,会出现分离度降低,理论塔板数降低等柱效降低的现象,适当处理能使柱效恢复。但不是所有柱子 都能倒冲的,最好问问生产商。不了解的话,还是按下面的方法处理一下试试。常规处理:硅胶、氧化铝、极性键合相色谱柱每一次用完后用低流速长时间的二氯甲烷或正己烷等溶剂冲洗;键合相硅胶色谱柱、离子交换色谱

色谱柱的保存操作和再生

  保存操作  1、如果流动相含有酸或无机盐,应当先用去离子水(20倍柱体积)冲洗干净。然后用用100%乙腈或甲醇保存色谱柱。最后用柱子的接头密封,并放在稳定的环境中存放。  2、应避免色谱柱受到直接的机械冲击或摔落,避免造成色谱柱性能的降低。  色谱柱的再生  用相当于20倍柱体积的溶剂按下列顺序

安捷伦色谱柱的保存与再生

保存色谱柱:1、如果流动相含有酸或无机盐,应当先用去离子水(20倍柱体积)冲洗干净。然后用用100%乙腈或甲醇保存色谱柱。zui后用柱子的接头密封,并放在稳定的环境中存放。   2、应避免色谱柱受到直接的机械冲击或摔落,避免造成色谱柱性能的降低色谱柱的再生:用相当于20倍柱体积的溶剂按下列顺序冲洗柱

高效液相色谱仪键合相制备时的硅胶预处理

高效液相色谱仪键合相制备时,作为载体的硅胶预处理包括酸处理、中和与干燥等。一、酸处理:1、酸处理的目的:(1)洗去硅胶制备、运输和保存过程中进入的污染物。(2)除去硅胶表面层的金属氧化物杂质,如 Na+、Ca2+、Al3+和 Fe3+等。(3)使硅胶表面的硅氧烷键打开,形成尽可能多的自由羟基,有利于

反相键合相色谱仪C18柱的物理性质

反相键合相色谱仪C18柱的物理性质指标有硅胶纯度、柱尺寸、颗粒形状、粒径、表面积和孔径等。一、硅胶纯度:硅胶纯度指填料硅胶的纯度和残留金属离子的浓度。A类硅胶由于带负电荷的残留硅羟基和酸性表面上金属的含量高(硅羟基pKa低),导致碱性化合物发生拖尾。B类硅胶(高纯)由于金属含量低,硅羟基pKa高,碱

色谱柱常规处理

常规处理:硅胶、氧化铝、极性键合相色谱柱每一次用完后用低流速长时间的二氯甲烷或正己烷等溶剂冲洗;键合相硅胶色谱柱、离子交换色谱柱和凝胶色谱柱先用蒸馏水冲洗,再用甲醇冲洗,然后用甲醇与蒸馏水以一定比例混合的溶液冲洗后过夜。对于已使用一段时间后柱效下降的色谱柱可按以下方法进行再生。再生处理包括活化(右→

液相色谱仪硅胶色谱柱清洗方法与技巧

液相色谱仪检测分析过程中,硅胶色谱柱上被吸附的样品成分累积到一定程度时,就开始形成新的固定相。新的检测物质能与残留杂质作用形成一定的分离机理,从而导致保留时间波动,出现拖尾现象。随着时间的积累,色谱柱的反压就会超过泵所能承受的最大压力,使色谱柱无法工作以及在堵塞处产生空体积。    再生被污染的