常用单抗的标记技术

目前动物用单抗,在动物疫病诊断和检疫、妊娠检测、性别鉴定等方面有广泛的应用,大多以诊断试剂(盒)的形式提供,其中核心试剂为标记的单抗。下面将介绍最常用的几种标记技术。1.酶标记(1)辣根过氧化物酶(HRP)标记辣根过氧化物酶(HRP)标记单抗和多克隆抗体的常用方法是过碘酸钠法。其原理是HRP的糖基用过碘酸钠氧化成醛基,加入抗体IgG后该醛基与IgG氨基结合,形成Schiff氏碱。为了防止HRP中糖的醛基与其自身蛋白氨基发生偶合,在用过碘酸钠氧化前先用二硝基氟苯阻断氨基。氧化反应末了,用硼氢化钠稳定Schiff氏碱。这里介绍两种程序。程序一:①将5mg HRP溶于0.5mL 0.1mol/L NaHCO3溶液中;加0.5mL 10mmol/L NaIO4溶液,混匀,盖紧瓶塞,室温避光作用2h。②加0.75mL 0.1mol/L Na2CO3混匀。③加入0.75mL小鼠已处理的腹水,或纯化单抗等(15mg/mL),混匀。④称取Sep......阅读全文

引物介导的原位标记技术实验

            实验材料 中期染色体分裂相 抗地高辛抗体 试剂、试剂盒 三磷酸核苷 Tth 或 Taq DNA 聚

免疫荧光标记技术的原理

免疫荧光标记技术(immunofluorescence technique)是将已知的抗体或抗原分子标记上荧光素,当与其相对应的抗原或抗体起反应时,在形成的复合物上就带有一定量的荧光素,在荧光显微镜下就可以看见发出荧光的抗原抗体结合部位,检测出抗原或抗体。

胶体金标记技术及其应用解析

   传统的同源建模技术对抗体进行人源化改造,主要是基于蛋白质一级结构的相似性同时结合已有的蛋白质晶体结构进行同源模拟。现有的多种同源建模技术大部分都没有对已有的抗体序列数据进行分析,在人源化改造过程中存在突变位点不确定的问题,同时抗体特性如表达水平、关键氨基酸的后期修饰预测等无法提前预知。  

引物介导的原位标记技术实验

引物介导的原位标记技术(primed in situ labeling,PRINS) 是一种对细胞及组织的特异 DNA 序列染色的杂交技术,它能够得到和 FISH 技术相同类型的结果。实验材料中期染色体分裂相抗地高辛抗体试剂、试剂盒三磷酸核苷Tth 或 Taq DNA 聚合酶NaClEDTA20 X

三大免疫标记技术有何异同点

荧光抗体技术。利用荧光抗体发出的荧光放射免疫分析。利用放射性核素标记酶免疫技术 。将抗原与抗体反应的特异性与酶对底物的高效催化相结合,是酶作用于底物后显色

影响发光剂标记技术中标记的因素

影响标记的因素:1.发光剂的选择。2.被标记蛋白质的性质:选用较高的纯度和免疫学稳定性的抗原进行标记;抗体作为被标记物时,则要求具有较高的效价,应用提纯的IgG来代替全血清。3.选择正确的标记方法。4.原料比:IgG:发光剂:交联剂的克分子比(mol:mol:mol)会影响结合物的发光效率。5.标记

酶免疫标记技术(ELISA)基本原理

酶免疫标记技术(ELISA)基本原理:指酶标记抗体或酶标记抗体进行的抗原抗体反应,然后通过酶与底物产生颜色反应,用于定量测定。

三大免疫标记技术有何异同点

荧光抗体技术。利用荧光抗体发出的荧光放射免疫分析。利用放射性核素标记酶免疫技术 。将抗原与抗体反应的特异性与酶对底物的高效催化相结合,是酶作用于底物后显色

关于免疫胶体金标记技术的简介

  免疫胶体金标记技术(immunologic colloidal gold signature,ICS) 胶体金是分散相粒子的金溶液,经凝聚法制成的金溶胶颗粒表面带有较多电荷,能吸附抗体形成金标记的抗体。用这种金标记抗体与组织或细胞标本中的抗原反应,借助显微镜观察颜色分布即可定位、定性测定组织或细

原位末端转移酶标记技术检测凋亡

(一)原理凋亡细胞是由于内源性核酸内切酶的激活后,将DNA切割成许多双链DNA片段以及高分子量DNA单链断裂点(缺口),暴露出大量3-羟基末端,如用末端脱氧核苷酸转移酶(TdT)将标记的dUTP进行缺口末端标记,则可原位特异地显示出凋亡细胞。主要应用的是荧光标记法和酶标记法。(二)荧光标记法1.材料

DNA分子标记技术研究进展(一)

遗传标记在遗传学的建立和发展过程中有着举足轻重的作用,随着遗传学的进一步发展和分子生物学的异军突起,遗传标记先后相应地经历了形态标记、细胞学标记、生化标记和DNA分子标记四个发展阶段。前三种标记都是以基因表达的结果为基础的,是对基因的间接反映;而DNA分子标记则是DNA水平遗传变异的直接反映,它具有

免疫球蛋白标记技术_酶标记抗体

免疫标记技术是用特定的物质标记抗原或抗体进行的抗原抗体反应。可借助各种仪器观察结果或进行自动化测定,可在细胞、亚细胞、超微结构及分子水平上,对抗原抗体反应进行定性和定位研究;或应用各种液相和固相免疫分析方法,对液体中的抗原、半抗原或抗体进行定性和定量测定。实验方法原理酶标记物包括酶标记抗原、酶标记抗

稳定同位素标记技术的原理

高中生物实验中涉及的同位素标记主要有3H、18O、14C、42K、131I、35S、32P、15N等,那么这些元素是否都具有放射性呢?其实不然!所谓同位素是指具有相同原子序数(即质子数相同,因而在元素周期表中的位置相同),但质量数不同,亦即中子数不同的一组核素。如果某同位素能够自发地从原子核内部放出

稳定同位素标记技术的原理

高中生物实验中涉及的同位素标记主要有3H、18O、14C、42K、131I、35S、32P、15N等,那么这些元素是否都具有放射性呢?其实不然!所谓同位素是指具有相同原子序数(即质子数相同,因而在元素周期表中的位置相同),但质量数不同,亦即中子数不同的一组核素。如果某同位素能够自发地从原子核内部放出

Science发布革命性荧光标记技术

  霍华德·休斯医学研究所的科学家们开发了一个革命性的新工具,可以在动物大脑中永久性标记神经元活动。在神经元激发钙离子流入时,这个工具(荧光蛋白CaMPARI)会从绿色变为红色。此前,研究者们需要在正确的时间用显微镜聚焦正确的细胞才能观察到神经元活动,现在这个永久性的荧光标记为他们带来了解

免疫标记技术的原理和基本类型

免疫标记技术指用荧光素、酶、放射性同位素或 电子致密物质等标记抗原或抗体进行的抗原 抗体反应。免疫标记技术不仅极大地提高了 抗原抗体反应的敏感性,以便对微量物质进 行定性或定量检测,而且结合以显微镜或电 镜技术,能对待测物进行精确的定位检测。 免疫标记技术有三种基本类型:免疫荧光 法、免疫酶技术和放

胶体金标记技术(制备方法和应用)

胶体金标记技术是以胶体金作为示踪标志物或显色剂,应用于抗原抗体反应的一种新型免疫标记技术。由于它不存在内源酶干扰及放射性同位素污染等问题,且利用不同颗粒大小的胶体金还可以作双重甚至多重标记,使定位更加精确。因此已成为继荧光素、酶、同位素及乳胶标记技术之后的一种新型标记技术。现已广泛应用于电镜、流式细

DNA分子标记技术研究进展(二)

2.第二代分子标记2.1 SSR标记技术    在真核生物基因组中存在许多非编码的重复序列,如重复单位长度在15~65个核苷酸的小卫星DNA(Minisatellite DNA),重复单位长度在2~6个核苷酸的微卫星DNA(Microsatellite DNA)。小卫星和微卫星DNA分布

稳定同位素标记技术的原理

高中生物实验中涉及的同位素标记主要有3H、18O、14C、42K、131I、35S、32P、15N等,那么这些元素是否都具有放射性呢?其实不然!所谓同位素是指具有相同原子序数(即质子数相同,因而在元素周期表中的位置相同),但质量数不同,亦即中子数不同的一组核素。如果某同位素能够自发地从原子核内部放出

新型RNA标记技术颠覆以往干细胞研究

  干细胞研究大多是在实验室的培养皿中开展的。然而,斯坦福大学的研究人员近日在《Cell Reports》上发表文章称,体内的干细胞和培养皿中的干细胞在基因表达谱上大相径庭。  研究人员认为,若人们对分离后的干细胞开展研究,并得出干细胞功能的结论,那么这些结论需要重新考虑,因为细胞在分离过程中发生了

稳定同位素标记技术的原理

高中生物实验中涉及的同位素标记主要有3H、18O、14C、42K、131I、35S、32P、15N等,那么这些元素是否都具有放射性呢?其实不然!所谓同位素是指具有相同原子序数(即质子数相同,因而在元素周期表中的位置相同),但质量数不同,亦即中子数不同的一组核素。如果某同位素能够自发地从原子核内部放出

EMBL科学家发布新荧光标记技术

欧洲分子生物学实验室EMBL的科学家们在12月8日的《Nature Methods》上发表了一种新标记技术,为人们揭示了小鼠神经系统的更多细节。研究者们可以在此基础上很方便的使用各种人工标记,拓展自己的研究范围,提高荧光成像的分辨率。“这一技术能帮我们看到之前看不清楚的细节,”这项研究的领导者,EM

科学家开发出光脱笼邻近标记技术

近日,中国科学院大连化学物理研究所研究员张丽华、研究员赵群与研究员刘宇研究员合作,开发了非极性环境敏感的光脱笼标记化学反应技术,应用于人类病理组织中脂滴互作蛋白质组的邻近标记与解析。相关成果发表在《美国科学院院刊》上。光脱笼化学反应因其时空可控性,可精准释放光笼分子中含有的光敏化学基团。因此,光笼分

食品快速检测技术之免疫金标记技术原理

免疫金标记技术原理:胶体金颗粒表面负电荷与蛋白质的正电荷基团因静电吸附而形成牢固结合。胶体金对蛋白质有很强的吸附功能,蛋白质等高分子被吸附到胶体金颗粒表面,无共价键形成,标记后大分子物质活性不发生改变。金颗粒具有高电子密度的特性。金标蛋白在相应的配体处大量聚集时,在显微镜下可见黑褐色颗粒或肉眼可见红

关于免疫诊断方法—免疫标记技术的介绍

  为提高抗原和抗体检测的敏感性,将已知抗体或抗原标记上易显示的物质,通过检测标记物,反映有无抗原抗体反应,从而间接测出微量的抗原或抗体。常用的标记物有酶、荧光素、放射性同位素、胶体金及电子致密物质等。这种抗原或抗体标记上显示物所进行的特异性反应称为免疫标记技术(immunolabelling te

免疫标记技术的技术特点和基本类型

免疫标记技术指用荧光素、酶、放射性同位素或 电子致密物质等标记抗原或抗体进行的抗原 抗体反应。免疫标记技术不仅极大地提高了 抗原抗体反应的敏感性,以便对微量物质进 行定性或定量检测,而且结合以显微镜或电 镜技术,能对待测物进行精确的定位检测。 免疫标记技术有三种基本类型:免疫荧光 法、免疫酶技术和放

免疫标记技术基本原理和主要类型

基本原理:采用荧光素、同位素或酶等示踪物质 标记抗体(或抗原)进行抗原 -抗体反应,通过对免疫复合物中的标记物的测定,达到对免疫反应进行监测的目的。标记免疫技术主要类型:放射免疫技术、酶免疫技术、荧光免疫技术、化学发光免疫技术。

放射免疫标记技术(RIA)基本原理

放射免疫标记技术(RIA)基本原理:根据抗原抗体特异性结合的原理,以放射性同位素标记抗原或抗体,根据射线的多少定性或定量测定待检标本中抗体或抗原的量。

探针的非放射性标记技术2

一;仪器:同上 二:试剂:ECL标记盒,其余同上 三:操作:1:将待标记的DNA稀释至10ng/ml 2:将上述DNA在100℃5分钟,冰浴5分钟 3:离心后加入10ulECL标记混合物,混合均匀 4:加10ul戊二醛溶液混匀,37℃20分钟,此反应

科学家开发出光脱笼邻近标记技术

近日,中国科学院大连化学物理研究所研究员张丽华、研究员赵群与研究员刘宇研究员合作,开发了非极性环境敏感的光脱笼标记化学反应技术,应用于人类病理组织中脂滴互作蛋白质组的邻近标记与解析。相关成果发表在《美国科学院院刊》上。光脱笼化学反应因其时空可控性,可精准释放光笼分子中含有的光敏化学基团。因此,光笼分