离子色谱仪日常使用注意事项(二)

(二)分离柱 分离柱柱体材料为PEEK(聚醚醚酮)。 分离相由聚乙烯醇颗粒组成,粒径为9?m,表面有季铵基团。这种结构可保证高度的稳定性,并对可穿过内置过滤板的极细颗粒具有很高的容耐性,适用于水分析的日常测试任务。 为保护分离柱不受外来物质侵害(这些物质会对分离效率产生影响),对淋洗液、也对样品作微孔过滤(0.45μm 过滤器),并通过吸液过滤头吸取淋洗液。分离柱堵塞会导致系统压力上升,分离能力变差会导致保留时间波动、样品重复测量平行性差。分离柱接入系统时,需要先冲洗10分钟以上再接检测器,冲洗时出口向上,便于将气泡赶出。 分离柱的保存:短时间不用,可直接将柱子两端盖上塞子,放在盒中保存。阴离子柱长时间不使用(1个月以上),应保存到10mmol/LNa2CO3中。 分离柱的再生:(1)低价亲水性离子的污染: a)用超纯水进行冲洗(在0.5ml/min流速下冲洗15分钟) b)用10倍浓的......阅读全文

制备柱分离性能测试的步骤

制备柱分离性能测试的步骤有一下几步:   ① 考虑到填料由分析级直接放大到制备级的因素,如果要纯化大量的化合物,需要考虑分析柱的规格和可作为制备柱的填料粒径(10µm或更大);作为在下一步纯化产品量更大的项目,必须考虑选择更大的填料粒径和更大内径的色谱柱,在与分析柱相同的填料下对产品进行纯化。 

维护好色谱分离柱的方法

液相色谱仪的分离是在色谱分离柱中实现的。我们目前工作中多采用反相色谱柱,如何保护好分离柱减少柱的污染是延长柱寿命的关键。  1、维护好色谱分离柱的方法  加保护柱(预柱)是保护分离柱的有效办法。保护柱是根内装填料与分离柱性质相近的短柱,接在分离柱之前,或代替流路过滤器。保护柱的作用是收集和阻塞分离柱

利用CORTECS-UPLC色谱柱改善分离度

目的证实CORTECS™ UPLC® 1.6 µm色谱柱的高分离性能。背景对于复杂混合物分离,高分离度是一个重要的质量指标,由于减少了相近洗脱峰的干扰,可以提高计算的精确度。分离度是系统柱效(N)、化合物之间的选择性(α)和保留因子(k)的函数。由于分离度与柱效的平方根成正比,因此对于柱效较高的色谱

怎样选择高效液相色谱柱保护柱不会影响分离分析?

  高效液相色谱柱通常在选择保护柱之前首先要考虑样品是否清洁,对于大部分分析工作来说,一支25px长的保护柱便能够提供充分的保护作用。但是,如果样品较脏,或工作中发现经常要更换25px的保护柱,那么就应该选用50px或75px的保护柱。保护柱越长自然所装的色谱填料就越多,则其保护性能越好,当然随着保

离子色谱仪柱和分离柱的重要性

 离子色谱的分离机理主要是离子交换,有3种分离方式,它们是离子交换色谱(HPIC)、离子排斥色谱(HPIEC)和离子对色谱(MPIC)。用于3种分离方式的柱填料的树脂骨架基本都是苯乙烯-二乙烯基苯的共聚物,但树脂的离子交换功能基和容量各不相同。HPIC用低容量的离子交换树脂,HPIEC用高容量的树脂

层析柱高径比对层析柱分离效果有什么影响

层析柱高径比是指层析柱的高度与内径之比。层析柱高径比对层析柱分离效果有着重要的影响,一般来说,高径比越大,分离效果越好。高径比的提高可以带来以下几个方面的优势:提高分离效率:高径比的提高可以增加层析柱的理论板数,提高分离效率。提高分离精度:高径比的提高可以减少色谱柱床颗粒的翻滚、流动等运动,从而减小

制备色谱柱分离性能测试的步骤

对于色谱分离模式的选择应采用多种分析柱对分离条件进行测试,当有多种模式可以选择时,应着重考虑下列因素,包括: 分辨率:即色谱填料对被测组分的选择性上样量:即色谱填料对被测样品的承载容量分析速度:即对被测样品的分离时间制备柱分离性能测试步骤:① 考虑到填料由分析级直接放大到制备级的因素,如果要纯化大量

安装色谱柱提高分离度的方法

提高分离度的几种方法1.增加柱长可以增加分离度.2.减少进样量(固体样品加大溶剂量). 3.提高进样技术防止造成两次进样. 4.降低载气流速. 5.降低色谱柱温度.6.提高汽化室温度. 7.减少系统的死体积,主要是色谱柱连接要插到位,不分流进样要选择不分流结构汽化室。8 毛细管色谱柱 要分流,选择合

NH₂快速分离柱的使用及保存方法

  1)NH₂快速分离柱既可以正相使用,也可以反相使用,需要注意:正相溶剂和反相溶剂是不互溶的,更换流动相时要确保新流动相与原保存液互溶;  2)使用时建议先用异丙醇以低流速冲洗30倍柱体积,再使用流动相平衡10倍柱体积;正相使用时不能用于分离含醛基、羰基化合物以及还原糖等;反相使用时要注意流动相P

液相色谱仪色谱柱的分离条件

 多数液相色谱仪色谱柱有很宽的试验条件范围,但具体应用又受到限制,主要是pH值、柱温和流动相的选择。  传统硅胶为基质的键合相要求pH值在2~8之间,极端pH值的流动相能“溶解”硅胶,使键合相流失。结构非碱性组分的保留不断减少,碱性组分的保留增加,引起碱性组分峰变宽。如果一定要用高或低pH值的流动相

色谱柱如何对化合物进行分离

这是一段含有两个样品组分(蓝色和黄色的圆点)的色谱柱的横截面,它既没有填料,也没有涂层,这样的色谱柱只是空柱。(图1) 如果过几秒钟后,您再观察色谱柱内的情况,就发生了改变。(图2) 由于载气流的带动,样品向柱的右端移动,并且由于样品区域和周围载气中样品浓度的不同,而使得样品区带展宽,样品组分仍然是

凝胶柱洗脱速度对分离效果的影响

洗脱速度会影响凝胶过滤的分离效果,一般洗脱速度要恒定而且合适。保持洗脱速度恒定通常有两种方法,一种是使用恒流泵,另一种是恒压重力洗脱。洗脱速度取决于很多因素,包括柱长、凝胶种类、颗粒大小等,一般来讲,洗脱速度慢一些样品可以与凝胶基质充分平衡,分离效果好。但洗脱速度过慢会造成样品扩散加剧、区带变宽,反

影响有机染料柱色谱分离因素有哪些

影响气相色谱分离度的因素有:1、色谱柱的固定相,也就是色谱柱的型号;2、色谱柱的规格,也就是色谱柱的柱长、内径、固定液的液膜厚度等因素;3、载气的种类;4、载气的流速,不同流速柱效都不一样;5、柱温;6、进样室的结构;7、检测器的结构。分离度又称分辨率,为了判断分离物质对色谱柱在色谱柱中的分离情况,

色谱柱的内径对分离有何影响

凝胶色谱柱里面有凝胶珠,凝胶珠里面有细长的通道,分子量小的蛋白质才能进入通道,大的在凝胶珠外面通过,因此先出来的是分子量大的蛋白质

影响色谱柱分离效果的因素有哪些

因素有色谱柱的固定相,色谱柱的规格。载气种类,载气流速。柱温及检查器结构。

利用eXtended-Performance(XP)色谱柱改善分离度

目标证明在应对分离挑战时,XP 2.5 µm色谱柱相较于传统HPLC粒径色谱柱具有更好的分离性能。 背景将方法转移至较小粒径上可以缩短分析时间已成为共识。其实,这样做还可以改善分离度。但是,随着粒径变小,柱压将会增加。使用亚2µm色谱柱可能需要用到UPLC®系统,但HPLC用户通过将HPLC方法转移

液相色谱仪色谱柱的分离条件

多数液相色谱仪色谱柱有很宽的试验条件范围,但具体应用又受到限制,主要是pH值、柱温和流动相的选择。  传统硅胶为基质的键合相要求pH值在2~8之间,极端pH值的流动相能“溶解”硅胶,使键合相流失。结构非碱性组分的保留不断减少,碱性组分的保留增加,引起碱性组分峰变宽。如果一定要用高或低pH值的流动相,

MCI柱可以分离手性化合物吗

手性化合物的分离需要色谱柱含有手性分子。MCI是小孔树脂(聚苯乙烯基的反相树脂填料)。MCI 系列精细分离填料是在三菱化学Diaion 和Sepabeads 大孔吸附树脂基础上设计的,并不具备分离手性化合物的能力。

高效液相色谱柱分离效果的好坏

 高效液相色谱柱具有高表面覆盖率和完全封尾的特点,提高了我们色谱柱的稳定性,适合pH值1.5~10.0很宽范围内的色谱分析。我们对的基质上进行的键合反应进行了特别的优化。独特的双封尾技术使我们的色谱柱对中性、极性、酸性和碱性以及螯合化合物的分析具有zui优的分离效率。    高效液相色谱柱采用高

离子交换色谱柱如何分离如何再生

离子交换色谱柱是指离子交换色谱中的固定相中的一些带电荷的基团,这些带电基团通过静电相互作用与带相反电荷的离子结合。如果流动相中存在其他带相反电荷的离子,按照质量作用定律,这些离子将与结合在固定相上的反离子进行交换。离子交换色谱柱基本原理:  离子交换色谱是蛋白纯化技术中常用的一种纯化方法,其原理是指

影响色谱柱分离度的因素有哪些?

影响色谱柱分离度的因素是固定相的种类、性质(粒度、粒径分布等)、填充状况、柱长、流动相的种类和流速及测定柱效所用物质的性质等。具体如下:(1)色谱长度和填料的性质,色谱柱越长,组分之间分析越好,但色谱柱越长压降越大,而输入的压力是有限的。色谱柱过长会增大进出口压力比,相反会影响色谱峰分离;(2)色谱

色谱柱如何对化合物进行分离

这是一段含有两个样品组分(蓝色和黄色的圆点)的色谱柱的横截面,它既没有填料,也没有涂层,这样的色谱柱只是空柱。(图1)如果过几秒钟后,您再观察色谱柱内的情况,就发生了改变。(图2)由于载气流的带动,样品向柱的右端移动,并且由于样品区域和周围载气中样品浓度的不同,而使得样品区带展宽,样品组分仍然是混合

色谱柱分离度(R)的定义和介绍

  分离度(R) 用于评价待测物质与被分离物质之间的分离程度,是衡量色谱系统分离效能的关键指标。可以通过测定待测物质与已知杂质的分离度,也可以通过测定待测物质与某一指标性成分(内标物质或其他难分离物质)的分离度,或将供试品或对照品用适当的方法降解,通过测定待测物质与某一降解产物的分离度,对色谱系统分

简介快速分离柱的使用及保存方法

  1、C4快速分离柱的使用及保存方法  1)C4快速分离柱采用干法装柱,首次使用前须用100%甲醇冲洗至少20个柱体积,然后用流动相平衡10个柱体积;  2)流动相的pH值应保持在2.5-7.0之间;  3)正确保存C4快速分离柱以供多次使用,塞好端帽并保存于ACN/H₂O(80:20)或者MeO

液相系统分离的“心脏”——色谱柱!

人们乐于把色谱柱比作液相系统的心脏,因为分析物的保留与分离,就发生在色谱柱上。今天,我们就来聊聊它,来聊聊“色谱心脏”的耐受性、选择性和效率问题:耐受性:我的小心脏要受不了了心脏是坚韧又娇嫩的器官,它的持续跳动确保生命,而它的任何病症都会影响人体的状态甚至生存。色谱柱也是如此,它的状态直接决定液相分

糖柱的分离原理你了解了吗?

 糖柱就是分析分离糖类物质的色谱柱。糖类除了众所周知的供能这个作用之外,还能作为母体,在工业上尤其是生物制药领域也有着充分重要的作用。随着工业的发展,工业生产中对混合糖中各组分的比例、单一糖类的纯度要求越来越来高,为了满足食品饮料及制药行业中糖类物质(如淀粉、纤维素、糖原、戊糖、半乳糖、纤维二塘、葡

吸附柱色谱分离中怎么选择洗脱剂

在进行吸附柱色谱分离时,应根据样品的性质、吸附剂的性能、流动相的极性三方面的影响因素加于选择。一般的选择规律是:样品极性较大,在极性吸附剂柱上进行分离,则应选用吸附性较弱(即活性较低)的吸附剂,用极性较大的溶剂进行洗脱。组分的极性较弱,就应选用吸附性较强(即活性较高)的吸附剂,用极性较小的溶剂进行洗

被分离组分在柱中的洗脱原理

一、基本概念和术语 1.色谱图和峰参数⊕色谱图(chromatogram)--样品流经色谱柱和检测器,所得到的信号-时间曲线,又称色谱流出曲线(elution profile).⊕基线(base line)--流动相冲洗,柱与流动相达到平衡后,检测器测出一段时间的流出曲线。一般应平行于时间轴。⊕噪音

利用XP2.5-µm色谱柱改善分离度

目标 证明在应对分离挑战时,XP 2.5 µm色谱柱相较于传统HPLC粒径色谱柱具有更好的分离性能。 背景 将方法转移至较小粒径上可以缩短分析时间已成为共识。其实,这样做还可以改善分离度。但是,随着粒径变小,柱压将会增加。使用亚2µm色谱柱可能需要用到UPLC®系统,但HPLC用户

为什么离子色谱分离柱不需要再生

一般离子色谱柱在使用的过程中是个动态平衡的过程,不是单向的过程,而抑制器一般把本底的离子都需要中和,所以消耗较大,需要再生。