毛细管电泳用于金属硫蛋白形态分析最新动态

摘 要 金属硫蛋白是广泛存在于生物体内的低分子量、富含半胱氨酸、可被金属和其他因素诱导合成的细胞内金属结合非酶蛋白质。本文综述近些年来毛细管电泳法用于金属硫蛋白形态的研究进展现状,对毛细管电泳的分离模式、检测方法及联用情况进行概括,并对其广阔前景进行展望。优化金属硫蛋白的分离条件,选择高灵敏度、高结构信息量的复合联用检测手段,仍是今后研究的重点。点击这里进入下载页面:进入下载页面......阅读全文

关于金属硫蛋白的研究分析介绍

  对于金属硫蛋白的研究,国内外主要集中在提取、检测以及应用上。由于在实际生产中,主要采用层析法,分离纯化后的金属硫蛋白中还含有其它的杂蛋白,因此本文作者正在进行金属硫蛋白的分子印迹聚合物的研究,使其更好地应用于金属硫蛋白的纯化。

色谱分析法检测金属硫蛋白的介绍

  对金属硫蛋白中不同亚型的检测,色谱分析法较为适合,应用的色谱分析法主要有HPLC、RP-HPLC、HPLC-ICP-MS、HPLC-AAS等,利用这类分析方法可以对Zn-MT的性质进行检测分析,但此类方法需要有标准的MT样品进行对照。Hunziker等使用RP-HPLC从兔组织样品中可以分离出7

关于金属硫蛋白的市场分析介绍

  根据MT在化妆品、保健品和新医药等三个领域的应用发展情况,结合我国消费者的实际水平,以及新医药发展的步骤和速度,化妆品行业年需求20千克左右,婴幼儿食品添加年需求10㎏左右,中老年保健食品年需求10-20千克,新医药年需求20千克左右,而产量为:2003年为6.8千克,2004年为8.6千克,2

鱼金属硫蛋白ELISA试剂盒分析测定

样本处理及要求1.  血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。2.  血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取

人金属硫蛋白(MT)酶联免疫分析(ELISA)

人金属硫蛋白(MT)酶联免疫分析(ELISA)试剂盒使用说明书本试剂仅供研究使用       目的:本试剂盒用于测定人血清,细胞上清及相关液体样本中金属硫蛋白(MT)的含量。实验原理:   本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人金属硫蛋白(MT)水平。用纯化的人金属硫蛋白(MT)抗体包被微孔板,制成固

金属亲和分析法检测金属硫蛋白的介绍

  这类方法主要是基于MT对金属的高亲合力且不同金属的亲和力具有差异性及其热稳定性而建立的。主要通过测定MT结合金属—竞争性替换金属含量来检测MT中金属含量的增高,从而计算出MT的含量。张保林等运用银饱和分析法结合原子吸收光谱(AAS)检测了兔肝Zn-MT,具体方法为:向含MT的溶液中加入过量的Ag

金属硫蛋白的金属亲和分析法检测介绍

  这类方法主要是基于金属硫蛋白对金属的高亲合力且不同金属的亲和力具有差异性及其热稳定性而建立的。主要通过测定MT结合金属—竞争性替换金属含量来检测MT中金属含量的增高,从而计算出MT的含量。张保林等运用银饱和分析法结合原子吸收光谱(AAS)检测了兔肝Zn-MT,具体方法为:向含MT的溶液中加入过量

色谱分析法检测金属硫蛋白的介绍

  对MT中不同亚型的检测,色谱分析法较为适合,应用的色谱分析法主要有HPLC、RP-HPLC、HPLC-ICP-MS、HPLC-AAS等,利用这类分析方法可以对Zn-MT的性质进行检测分析,但此类方法需要有标准的MT样品进行对照。Hunziker等使用RP-HPLC从兔组织样品中可以分离出7种亚型

培养细胞形态和培养细胞形态分析

 培养细胞形态   体外培养细胞根据它们在培养器皿是否能贴附于支持物上生长特征,可分为贴附型生长和悬浮型生长两大类。贴附型细胞在培养时能贴附在支技物表面生长。如羊水细胞为贴附型细胞,常表现为成纤维型细胞和上皮细胞生长。悬浮型细胞在培养中悬浮生长。   1、成纤维型细胞   在培养中的细胞

金属硫蛋白的测定实验

实验方法原理 MT是一种低分子量的蛋白质,含有大量的半胱氨酸,并对金属有较高的亲和性。实验材料 牛血红蛋白试剂、试剂盒 氯化镉Tris-HCl蔗糖仪器、耗材 分光光度计离心机实验步骤 一、实验步骤1.  组织按1:4(w/v)加入0.25 mol/l 蔗糖溶液,制备匀浆,18 000 g离心20 m

简述金属硫蛋白的用途

  金属硫蛋白是一类富含半胱氨酸和金属的低分子蛋白质。由于它大量的结合多种金属离子,具有特种的生理功能,为生物化学领域所重视。  MT的研究已有40多年的历史,对其结构、特性、基因调控及生物学功能的研究日趋深入,研究成果已涉及医学、毒理学、营养学、生物工程、美容护肤等各个领域,应用前景十分广阔。

金属硫蛋白的测定实验

镉-血红素法             实验方法原理 MT是一种低分子量的蛋白质,含有大量的半胱氨酸,并对金属有较高的亲和性。 实

什么是形态分析?

形态分析是指特定元素形态在系统中所起的作用,是基于其化学形态与可能存在的同一元素的其他形态的元素形态分离方法,使用分离特定一组金属形态的物理或化学方法来定义这组形态。

红细胞形态分析

1.畸形红细胞标准Birech报告畸形红细胞分类 红细胞大小不等,形态异常多样,归为以下7种[6]:①酵母菌样红细胞:在红细胞外膜有小泡突出或细胞呈霉菌孢子样改变。②炸面包卷样红细胞:红细胞膜呈明显的内外两圈、四周肥厚、形似炸面包卷。③古钱样红细胞:形似中国古钱币。④膜缺损红细胞:红细胞膜不完整,部

形态分析的定义

形态分析可从功能性、操作性或化学性上定义。功能性定义,是指特定元素形态在系统中所起的作用,如功能性定义可以是为“被植物吸收的汞”或“从药物中吸收的铁”,这种定义可能是最接近于最终使用者想要得到的信息,但也是分析化学家最难检测的。除了在污染的水或土壤中种植植物,分析植物组织或在制药领域进行动物实验,几

金属硫蛋白的提取方法介绍

  主要试剂:  三羟甲基氨基甲烷(简称Tris);5,5-二硫二(2-硝基苯甲酸)(简称DTNB);PBS缓冲溶液。  动物的处理:  参考Onsaka等的方法,给家兔皮下注射ZnSO44次,第1天注射60mg/只(约15mg Zn/kg),第2、4天注射90mg/只,第7天注射120mg/只,第

金属硫蛋白的克隆及检测

  随着分子生物学技术的快速发展,使MT克隆技术、RNA印迹技术和PCR技术应用于MT的定量检测成为现实。MT克隆检测是通过MT多克隆和单克隆抗体,运用免疫扩散、免疫电泳等方法来检测组织中的MT-mRNA含量进行定量分析,这在MT分子的生物学研究中有很重要的意义。  MT多采用联机检测,虽然以免疫法

关于金属硫蛋白的基本介绍

  金属硫蛋白(metallothionein)是一类普遍存在于生物体内的金属结合蛋白。  金属硫蛋白是具有结合金属能力和高诱导特性的低分子量蛋白质。 [1] 富含半胱氨酸的短肽,对多种重金属有高度亲和性。它是分子质量较低,半胱氨酸残基和金属含量极高的蛋白质。与其结合的金属主要是镉、铜和锌,广泛地存

简述金属硫蛋白的环保作用

  利用MT与金属结合的特性,可以选育或用基因工程手段建立MT的高表达系统,以治理重金属污染。据报道,转酵母MT基因的烟草能显著提高对污染土壤中cu2的吸收,用这种方法可以对重金属污染区进行补救。

关于金属硫蛋白的用途介绍

  金属硫蛋白的重要生理功能表现在它是一种目前所知的最有效的自由基清除剂,其清除自由基(·OH)的能力约为SOD的几千倍,而清除氧自由基(·O)的能力约是谷胱甘肽(GSH)的25倍,而且具有很强的抗氧化活动。  由于MT具有特殊的化学结构,其中的金属具有动力学不稳定性,巯基具有亲核性倾向,使得MT易

关于金属硫蛋白的发现介绍

  1957年,美国科学家Margoshoes在研究金属生物学作用时,从动物器官中分离出镉的金属蛋白质。由于它是一种低分子量、高巯基含量,能大量结合重金属离子,因此称为金属硫蛋白(简称MT)。MT分子呈椭圆形,分两个结构域,分子量为6,000~7,000道尔顿,直径30~50Å,含有61个氨基酸,其

简述金属硫蛋白的分类分布

  MT的结构在生物进化中高度保守,有四种异构体,MT-Ⅰ和MT-Ⅱ在大多数哺乳动物的内脏器官中广泛存在,尤以肝、肾细胞为主,而且参加其功能调节。MT-Ⅲ分布主要限于中枢神经系统,主要分布于星性胶质细胞(集中于细胞体和突起中),其次为神经元细胞,也有报道称少量分布于生殖细胞、小肠、胃、肾和嗅觉皮质细

蛋白质分析法/免疫法检测金属硫蛋白的介绍

  此类方法主要是通过蛋白质含量测定来计算MT浓度,免疫法是最主要的方法。它尤其适合于微量检测,具有灵敏、特异的特点,灵敏度在pg/ml级,对存在体液中含量甚微的MT具有较好的检测效果。在近些年,先后建立了Western Blotting法、放射性免疫检测法(RIA)和酶联免疫吸附法(ELISA)。

蛋白质分析法/免疫法检测金属硫蛋白的介绍

  此类方法主要是通过蛋白质含量测定来计算金属硫蛋白浓度,免疫法是最主要的方法。它尤其适合于微量检测,具有灵敏、特异的特点,灵敏度在pg/ml级,对存在体液中含量甚微的MT具有较好的检测效果。在近些年,先后建立了Western Blotting法、放射性免疫检测法(RIA)和酶联免疫吸附法(ELIS

毛细管电泳的微全分析

1990年瑞士Ciba-Geigy公司的Manz和Widmer首次提出微全分析系统(Miniaturized total chemical analysis system,μ-TAS)的概念和设计,把微全分析系统的主要构型定位为一般厚度不超过5 mm,面积为数平方厘米至十几平方厘米的平板芯片(包括微

毛细管电泳的微全分析

  1990年瑞士Ciba-Geigy公司的Manz和Widmer首次提出微全分析系统(Miniaturized total chemical analysis system,μ-TAS)的概念和设计,把微全分析系统的主要构型定位为一般厚度不超过5 mm,面积为数平方厘米至十几平方厘米的平板芯片(包

毛细管电泳的分离分析方法

  CE 是在传统的电泳技术基础上于本世纪60 年代末由Hjerten 发明的,其利用小的毛细管代替传统的大电泳槽,使电泳效率提高了几十倍。此技术从80 年代以来发展迅速,是生物化学分析工作者与生化学家分离、定性多肽与蛋白类物质的有利工具。CE 根据应用原理不同可分为以下几种;毛细管区带电泳Capi

毛细管电泳手性药物分析

  手性药物的每个对映异构体在生物环境中表现出不同的药效作用,在药物吸收、分布、代谢、排泄等方面存在立体选择性差异。为了能准确地了解药效和安全用药,发展和建立简单、快速的手性药物对映体的奋力分析方法,并用于临床研究和医药质量控制,显得日益迫切。CE因其高效、快速、选择性强的特点而成为目前最有效的手性

毛细管电泳仪分析优点

毛细管电泳仪(HPCE)是以毛细管为分离通道,以高压直流电场为驱动力,利用荷电粒子之间的淌度差异和分配系数差异进行分离,是分析科学继液相色谱仪之后的又一重大进展,使分析科学从微升级进入到了纳升级水平,不仅使单细胞乃至单分子分析成为可能,也使蛋白质和核酸等生物大分子分析有了新的转机。一、柱效高:理论塔

形态分析的元素应用

大气飘尘中元素的形态分析也受到了广泛关注。Huffman等针对石油加工及燃料燃烧产生的颗粒物,利用荧光模式和Lytle检测器和多元Ge阵列检测器进行了X射线吸收精细结构(XAFS))分析,分析发现铜、铅、锌在石油加工及燃料燃烧产生的颗粒物中主要以硫酸盐形态存在,砷则主要以五价砷酸盐形式存在,而所存在