金属硫蛋白的测定实验

实验方法原理 MT是一种低分子量的蛋白质,含有大量的半胱氨酸,并对金属有较高的亲和性。实验材料 牛血红蛋白试剂、试剂盒 氯化镉Tris-HCl蔗糖仪器、耗材 分光光度计离心机实验步骤 一、实验步骤1. 组织按1:4(w/v)加入0.25 mol/l 蔗糖溶液,制备匀浆,18 000 g离心20 min(4℃)。2. 取上清液0.5 ml,加入1.9 ml 0.03 mol/l Tris-HCl缓冲液(pH8.0)。3. 再加入1 ml CdCl2(10ppm)混匀,室温孵育5 min。4. 加入2%牛血红蛋白0.2 ml,沸水浴1 min,室温离心1 000 g,5 min。5. 反复加入牛血红蛋白,加热、离心3次。6. 在原子吸收分光光度计,用石墨法测定上清液Cd含量。7. 组织MT含量按6 g原子Cd结合可分子MT计算。8. 按B......阅读全文

金属硫蛋白的测定实验

实验方法原理 MT是一种低分子量的蛋白质,含有大量的半胱氨酸,并对金属有较高的亲和性。实验材料 牛血红蛋白试剂、试剂盒 氯化镉Tris-HCl蔗糖仪器、耗材 分光光度计离心机实验步骤 一、实验步骤1.  组织按1:4(w/v)加入0.25 mol/l 蔗糖溶液,制备匀浆,18 000 g离心20 m

金属硫蛋白的测定实验

镉-血红素法             实验方法原理 MT是一种低分子量的蛋白质,含有大量的半胱氨酸,并对金属有较高的亲和性。 实

金属硫蛋白的测定实验——镉血红素法

金属硫蛋白(metallothionein)是由由微生物和植物产生的金属结合蛋白,富含半胱氨酸的短肽,对多种重金属有高度亲和性。它是分子质量较低,半胱氨酸残基和金属含量极高的蛋白质。与其结合的金属主要是镉、铜和锌,广泛地存在于从微生物到人类各种生物中,其结构高度保守。实验方法原理MT是一种低分子量的

鱼金属硫蛋白ELISA试剂盒分析测定

样本处理及要求1.  血清:将收集于血清分离管的全血标本在室温放置2小时或4℃过夜,然后1000×g离心20 分钟,取上清即可,或将上清置于-20℃或-80℃保存,但应避免反复冻融。2.  血浆:用EDTA或肝素作为抗凝剂采集标本,并将标本在采集后的30分钟内于2-8℃ 1000×g离心15分钟,取

镉血红素法测定组织水平金属硫蛋白

金属硫蛋日(metallothionein,MT)是富含金属及硫的可诱导性蛋白,它可被某些金属( Bi,Zn,Cu等)、激素(糖皮质激素)、细胞毒药物(顺铂及烷化剂)及其他与物理化学刺激相关的病理生理状况所诱导。MT广泛存在于哺乳娄动物除结缔组织外的几乎所有组织中,肝、肾、胰、肠中最为丰富,从已有的

镉血红素法测定组织水平金属硫蛋白

镉--血红素法 实验材料 组织 试剂、试剂盒 氯化镉 牛血红蛋白

镉血红素法测定组织水平金属硫蛋白

金属硫蛋日(metallothionein,MT)是富含金属及硫的可诱导性蛋白,它可被某些金属( Bi,Zn,Cu等)、激素(糖皮质激素)、细胞毒药物(顺铂及烷化剂)及其他与物理化学刺激相关的病理生理状况所诱导。MT广泛存在于哺乳娄动物除结缔组织外的几乎所有组织中,肝、肾、胰、肠中最为丰富,

简述金属硫蛋白的用途

  金属硫蛋白是一类富含半胱氨酸和金属的低分子蛋白质。由于它大量的结合多种金属离子,具有特种的生理功能,为生物化学领域所重视。  MT的研究已有40多年的历史,对其结构、特性、基因调控及生物学功能的研究日趋深入,研究成果已涉及医学、毒理学、营养学、生物工程、美容护肤等各个领域,应用前景十分广阔。

简述金属硫蛋白的环保作用

  利用MT与金属结合的特性,可以选育或用基因工程手段建立MT的高表达系统,以治理重金属污染。据报道,转酵母MT基因的烟草能显著提高对污染土壤中cu2的吸收,用这种方法可以对重金属污染区进行补救。

金属硫蛋白的提取方法介绍

  主要试剂:  三羟甲基氨基甲烷(简称Tris);5,5-二硫二(2-硝基苯甲酸)(简称DTNB);PBS缓冲溶液。  动物的处理:  参考Onsaka等的方法,给家兔皮下注射ZnSO44次,第1天注射60mg/只(约15mg Zn/kg),第2、4天注射90mg/只,第7天注射120mg/只,第

关于金属硫蛋白的用途介绍

  金属硫蛋白的重要生理功能表现在它是一种目前所知的最有效的自由基清除剂,其清除自由基(·OH)的能力约为SOD的几千倍,而清除氧自由基(·O)的能力约是谷胱甘肽(GSH)的25倍,而且具有很强的抗氧化活动。  由于MT具有特殊的化学结构,其中的金属具有动力学不稳定性,巯基具有亲核性倾向,使得MT易

金属硫蛋白的克隆及检测

  随着分子生物学技术的快速发展,使MT克隆技术、RNA印迹技术和PCR技术应用于MT的定量检测成为现实。MT克隆检测是通过MT多克隆和单克隆抗体,运用免疫扩散、免疫电泳等方法来检测组织中的MT-mRNA含量进行定量分析,这在MT分子的生物学研究中有很重要的意义。  MT多采用联机检测,虽然以免疫法

关于金属硫蛋白的发现介绍

  1957年,美国科学家Margoshoes在研究金属生物学作用时,从动物器官中分离出镉的金属蛋白质。由于它是一种低分子量、高巯基含量,能大量结合重金属离子,因此称为金属硫蛋白(简称MT)。MT分子呈椭圆形,分两个结构域,分子量为6,000~7,000道尔顿,直径30~50Å,含有61个氨基酸,其

关于金属硫蛋白的基本介绍

  金属硫蛋白(metallothionein)是一类普遍存在于生物体内的金属结合蛋白。  金属硫蛋白是具有结合金属能力和高诱导特性的低分子量蛋白质。 [1] 富含半胱氨酸的短肽,对多种重金属有高度亲和性。它是分子质量较低,半胱氨酸残基和金属含量极高的蛋白质。与其结合的金属主要是镉、铜和锌,广泛地存

简述金属硫蛋白的分类分布

  MT的结构在生物进化中高度保守,有四种异构体,MT-Ⅰ和MT-Ⅱ在大多数哺乳动物的内脏器官中广泛存在,尤以肝、肾细胞为主,而且参加其功能调节。MT-Ⅲ分布主要限于中枢神经系统,主要分布于星性胶质细胞(集中于细胞体和突起中),其次为神经元细胞,也有报道称少量分布于生殖细胞、小肠、胃、肾和嗅觉皮质细

金属硫蛋白的纯化方法的介绍

  所谓纯化,也就是MT粗品(60%~90%)、MT精品(≥90%)以及纯品(≥95%)的形成过程。由报道的资料看,纯化方法大概是一致的,首先是根据MT-1和MT-2所带电荷不同的性质,进行离子交换将MT-1和MT-2分开,然后将收集MT-1和MT-2的层析液分别进行脱盐,最后收集冻干、保存。  取

关于金属硫蛋白的研究分析介绍

  对于金属硫蛋白的研究,国内外主要集中在提取、检测以及应用上。由于在实际生产中,主要采用层析法,分离纯化后的金属硫蛋白中还含有其它的杂蛋白,因此本文作者正在进行金属硫蛋白的分子印迹聚合物的研究,使其更好地应用于金属硫蛋白的纯化。

关于金属硫蛋白的纯化方法介绍

  所谓纯化,也就是MT粗品(60%~90%)、金属硫蛋白精品(≥90%)以及纯品(≥95%)的形成过程。由报道的资料看,纯化方法大概是一致的,首先是根据MT-1和MT-2所带电荷不同的性质,进行离子交换将MT-1和MT-2分开,然后将收集MT-1和MT-2的层析液分别进行脱盐,最后收集冻干、保存。

金属硫蛋白的理化性质介绍

  MT构象较坚固,具有较强的耐热性,生物学性质稳定,同时抗酶解,而且蛋白质氨基酸排列有重复性,在氨基酸链断掉一部分后仍会有活性。 MT所有的半胱氨酸以还原状态出现。  一般来说,哺乳动物的MT分子量为6000~7000道尔顿,但去金属后即硫蛋白分子量为6000道尔顿左右,而真核微生物的MT分子量范

关于金属硫蛋白的发现历史介绍

  1957年,美国科学家Margoshoes在研究金属生物学作用时,从动物器官中分离出镉的金属蛋白质。由于它是一种低分子量、高巯基含量,能大量结合重金属离子,因此称为金属硫蛋白(简称MT)。MT分子呈椭圆形,分两个结构域,分子量为6,000~7,000道尔顿,直径30~50Å,含有61个氨基酸,其

关于金属硫蛋白的不同作用介绍

  1、金属硫蛋白的其他作用:  金属硫蛋白清除自由基的功能使其在抗衰老、抗氧化压力及细胞凋亡等过程中发挥着重要作用。MT是一种潜在的细胞凋亡负调控因子,并且在化疗中对正常机体细胞有一定的保护作用。  2、心血管病:  金属硫蛋白作为一种强的内源性细胞保护剂,在心血管系统抗损伤保护中发挥着重要作用,

简述金属硫蛋白的理化性质

  MT构象较坚固,具有较强的耐热性,生物学性质稳定,同时抗酶解,而且蛋白质氨基酸排列有重复性,在氨基酸链断掉一部分后仍会有活性。 [3]MT所有的半胱氨酸以还原状态出现。   一般来说,哺乳动物的MT分子量为6000~7000道尔顿,但去金属后即硫蛋白分子量为6000道尔顿左右,而真核微生物的M

关于金属硫蛋白的分类分布介绍

  金属硫蛋白的结构在生物进化中高度保守,有四种异构体,MT-Ⅰ和MT-Ⅱ在大多数哺乳动物的内脏器官中广泛存在,尤以肝、肾细胞为主,而且参加其功能调节。MT-Ⅲ分布主要限于中枢神经系统,主要分布于星性胶质细胞(集中于细胞体和突起中),其次为神经元细胞,也有报道称少量分布于生殖细胞、小肠、胃、肾和嗅觉

关于金属硫蛋白的提取方法介绍

  1、主要试剂:  三羟甲基氨基甲烷(简称Tris);5,5-二硫二(2-硝基苯甲酸)(简称DTNB);PBS缓冲溶液。  2、动物的处理:  参考Onsaka等的方法,给家兔皮下注射ZnSO44次,第1天注射60mg/只(约15mg Zn/kg),第2、4天注射90mg/只,第7天注射120mg

简述金属硫蛋白的解毒功能介绍

  金属硫蛋白是富含半胱氨酸的金属结合蛋白,其巯基能强烈螯合有毒金属,并将之排出体外,从而实现解毒功能。 金属硫蛋白与痕量金属的代谢有关,在所有的哺乳动物组织中,MT-1和MT-2协同表达。MT-3是该家族中的脑部特异成员,能结合锌和铜,具有重要的神经生理和神经调节功能。对许多水生生物的研究表明,M

关于金属硫蛋白的市场状况介绍

  根据MT在化妆品、保健品和新医药等三个领域的应用发展情况,结合我国消费者的实际水平,以及新医药发展的步骤和速度,化妆品行业年需求20千克左右,婴幼儿食品添加年需求10㎏左右,中老年保健食品年需求10-20千克,新医药年需求20千克左右,而产量为:2003年为6.8千克,2004年为8.6千克,2

金属硫蛋白的抗辐射的作用介绍

  电离辐射可以产生大量自由基,直接或间接使生物体受到损伤。据研究表明,口服MT能够延长被一次性大剂量电离辐射的小鼠的存活时间,降低一次性大剂量和多次小剂量电离辐射对免疫系统的损伤,口服MT能吸收进入体内的大量Cys,为修复体内受辐射作用而断裂的二硫键提供原料。

关于金属硫蛋白的基本信息介绍

  金属硫蛋白(metallothionein)是一类普遍存在于生物体内的金属结合蛋白。  金属硫蛋白是具有结合金属能力和高诱导特性的低分子量蛋白质。 [1]富含半胱氨酸的短肽,对多种重金属有高度亲和性。它是分子质量较低,半胱氨酸残基和金属含量极高的蛋白质。与其结合的金属主要是镉、铜和锌,广泛地存在

关于金属硫蛋白的市场分析介绍

  根据MT在化妆品、保健品和新医药等三个领域的应用发展情况,结合我国消费者的实际水平,以及新医药发展的步骤和速度,化妆品行业年需求20千克左右,婴幼儿食品添加年需求10㎏左右,中老年保健食品年需求10-20千克,新医药年需求20千克左右,而产量为:2003年为6.8千克,2004年为8.6千克,2

关于金属硫蛋白的克隆及检测介绍

  随着分子生物学技术的快速发展,使MT克隆技术、RNA印迹技术和PCR技术应用于MT的定量检测成为现实。金属硫蛋白克隆检测是通过MT多克隆和单克隆抗体,运用免疫扩散、免疫电泳等方法来检测组织中的MT-mRNA含量进行定量分析,这在MT分子的生物学研究中有很重要的意义。  金属硫蛋白多采用联机检测,