任兵教授Nature重要成果:首张小鼠功能基因组图谱

通常被称之为“生命之书”的人类基因组非常地难于阅读。在没有充分了解其语法和句法的情况下,基因组中29亿的腺嘌呤与胸腺嘧啶、鸟嘌呤和胞嘧啶碱基对为了解人类的基础遗传学提供了有限的认识。 在发表于7月1日《自然》(Nature)杂志上的一篇论文中,来自德维格癌症研究所和加州大学圣地亚哥医学院的研究人员进一步打开了这本书籍,首次绘制了小鼠基因组很大一部分功能性序列的图谱。小鼠是当前在生物医学研究中应用最广泛的哺乳动物模型生物体。 领导这一研究的是加州大学圣地亚哥分校德维格癌症研究所基因调控实验室主任任兵(Bing Ren)教授,其早年毕业于中国科技大学,主要从事哺乳动物细胞基因调控网络分析及细胞表观遗传学调控机制的研究。在Science, Nature, Cell等国际知名杂志上发表论文数十篇。 任兵博士说:“我们知道人类基因组的精确字母已有十多年,但却未必知道这些碱基如何生成了有意义的词汇、段落或生命。......阅读全文

哺乳动物细胞基因稳定转染的实验

分析基因的功能常需要形成含有稳定整合了该基因的哺乳动物细胞系。在转染中大约有1/104细胞将稳定整合外源因而可用一显性(正向)选择标记来分离稳定的转化细胞。用可高效转染的细胞系来确保转染成功。另外,应包括合适的对照以确定目的基因无细胞毒性。实验材料哺乳动物细胞试剂、试剂盒完全培养液仪器、耗材培养箱离

哺乳动物细胞的RNAi技术策略(3)

5. si 表达框架si 表达框架(si expression cassettes,SECs)是一种由PCR得到的si 表达模版,能够直接导入细胞进行表达而无需事前克隆到载体中。这个方法最早是由Castanotto和其同事(5)采用,包括一个 pol III启动子,一段发夹结构si ,一个

实用哺乳动物细胞培养手册(一)

细胞培养所用玻璃及塑料制品的清洗与消毒清洗在组织细胞培养中,体外细胞对任何有害物质都非常敏感。微生物产品附带杂物,上次细胞残留物及非营养成分的化学物质,均能影响培养细胞的生长。因此对新使用玻璃器 皿和重新使用的培养器皿都要严格彻底的清洗,且要根据器皿的组成材料不同,选择不同 的清洗方法。玻璃器皿的清

哺乳动物细胞培养过程--培养条件

哺乳动物细胞培养过程哺乳动物细胞在培养过程中会经过组织提取,原代培养,传代培养等过程。传代培养会根据具体情况分为细胞株培养和细胞系培养。如下对各个过程进行简述:原代培养:从动物机体取出组织后切碎,经过各种酶(常用胰蛋白酶),螯合剂(常用EDTA)结合机械方法(吸液管反复吸吹)处理,分散成单细胞,置于

行业标准:水生哺乳动物饲养设施要求

  本专题涉及《水生哺乳动物饲养设施要求》的标准有1条。  国际标准分类中,《水生哺乳动物饲养设施要求》涉及到捕捞和水产养殖。  在中国标准分类中,《水生哺乳动物饲养设施要求》涉及到水产、渔业用器具、水产、渔业综合。  行业标准-水产,关于《水生哺乳动物饲养设施要求》的标准  SC/T 6073-2

毛方园:探索哺乳动物进化的奥秘

  如果只是停留在对标本的简单描述上,前人已经做得非常细致了,留给我们的空间很小。我们现在已经站在巨人的肩膀上了,要想再进一步就必须要引入新的方法。  见到中国科学院古脊椎动物与古人类研究所研究员毛方园时,她刚从内蒙古野外考察归来。短暂的停留后,她又将奔赴下一个考察地点。整个夏天,毛方园几乎都在野外

人类活动使野生哺乳动物夜行性增强

新华社北京6月18日电 一项发表在最新一期美国《科学》杂志上的研究显示,为了躲避人类的干扰,全球多种野生哺乳动物正越来越多地转移到夜间活动,表现出夜行性增强的趋势。 此前关于人类活动影响野生动物数量和生活空间的研究已经很多,但对动物习性的影响缺乏量化分析。美国加利福尼亚大学伯克利分校等机构

新生哺乳动物心脏受损后可以自我愈合

 美国德州大学西南医学中心的研究人员通过老鼠实验表明,新生哺乳动物的心脏在受损后完全能够自我愈合,这一发现可为治疗人类心脏病提供新的思路。该研究发表在2月25日出版的《科学》杂志上。  实验中,研究人员将刚出生一周的小鼠15%的心脏切除,结果发现,在3周内,受损的心脏重新完好地长出来,其外观和功能与

实用哺乳动物细胞培养手册(二)

消化液:分离组织和分散细胞。常用的有胰蛋白酶和二乙胺四乙酸二钠 (EDTA) 两种溶液。可以 单独使用,也可以混合使用。(1)胰蛋白酶溶液胰蛋白酶(简称胰酶)是一种黄白色粉末,易潮解,应放置冷暗干燥处保存。目前应用的胰蛋白酶主要来自牛或猪的胰腺。胰酶的主要作用是使细胞间的蛋白质水解,使细胞相

人类首次从哺乳动物身上感染禽流感

4月1日,美国疾病控制和预防中心(CDC)报告了一例人感染H5N1型禽流感病毒病例。该病例出现在得克萨斯州,感染者曾接触过疑似感染H5N1型禽流感病毒的奶牛CDC在确认检测结果呈阳性后宣布了这一消息。这也是人类首次从哺乳动物身上感染禽流感。该患者唯一的症状是眼睛发炎,目前正在接受抗流感病毒药物治疗。

哺乳动物视网膜中新神经细胞“现身”

  美国犹他大学约翰·莫兰眼科中心科学家在最新一期美国《国家科学院院刊》上撰文指出,他们在哺乳动物的视网膜中发现了一种新的神经细胞,有助科学家们更好地理解中枢神经系统。  该研究负责人、犹他大学田宁(音译)博士解释说,在中枢神经系统中,存在着一个复杂的神经细胞回路以相互通信、传递感觉及运动信息,而所

实用哺乳动物细胞培养手册(中)

  细胞培养环境   1、实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受 其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响, 要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌 操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作

哺乳动物细胞培养过程--培养条件

哺乳动物细胞培养过程 & 培养条件导语:哺乳动物细胞在培养过程中会经过组织提取,原代培养,传代培养等过程。传代培养会根据具体情况分为细胞株培养和细胞系培养。哺乳动物细胞培养过程哺乳动物细胞在培养过程中会经过组织提取,原代培养,传代培养等过程。传代培养会根据具体情况分为细胞株培养和细胞系培养。如下对各

实用哺乳动物细胞培养手册(六)

缓冲系统大多数细胞所需 pH 在 7.2 - 7.4。但是,细胞培养最适 pH 值随培养的细胞种类不同而 不同。成纤维细胞喜欢较高 pH (7.4 - 7.7), 而传代转化细胞系则需要偏酸 pH (7.0 - 7.4)。 由于多数培养液靠碳酸氢钠(NaHCO3)与 CO2 体系进行缓冲,因

关于哺乳动物类防御素的基本介绍

  防御素是动物体内防御系统的主要成分,大多由29~42个氨基酸残基组成,含3对分子内二硫键,相对分子质量为2~6kDa,根据其二硫键位置的不同可分为α-防御素、β-防御素、θ-防御素3类。  α-防御素是于1980年美国Lehrer实验室从兔肺巨噬细胞中首先分离得到的、阳离子性极强的小分子抗菌肽,

哺乳动物组织的匀浆实验_基本方案

实验方法原理对于细胞内蛋白的纯化和特性分析,重要的是选择一种有效的方法来破碎细胞或组织,使蛋白迅速地从胞内相对隔离的空间中释放到缓冲液中,而该缓冲液应对所研究的蛋白的生物活性没有影响。广泛使用的破碎软组织的方法之一是匀浆。蛋白酶从其他的细胞区隔中释放出来的风险很小。可以通过在匀浆缓冲液中加人蛋白酶抑

哺乳动物细胞的RNAi技术策略(1)

目前RNAi技术已经进入了生物科学研究的许多领域,成为了一种主要的生物学研究工具,发展得相当迅速,并受到了此次诺贝尔奖评审委员会的青睐,获得2006年诺贝尔奖医学/生理奖。然而这一才历经十个年头的技术依然对于许多研究人员来说还是很陌生的,以下是有关 i技术在哺乳动物细胞中应用的具体设计策略,主要

实用哺乳动物细胞培养手册(下)

  细胞培养所用玻璃及塑料制品的清洗与消毒   清洗   在组织细胞培养中,体外细胞对任何有害物质都非常敏感。微生物产品附带杂物,上次细胞残留物及非营养成分的化学物质,均能影响培养细胞的生长。因此对新使用玻璃器 皿和重新使用的培养器皿都要严格彻底的清洗,且要根据器皿的组成材料不同,选择不同 的清

实用哺乳动物细胞培养手册(上)

细胞培养基本概念细胞培养是指从体内组织取出细胞在体外模拟体内环境下,使其生长繁殖,并维持其结 构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物可以是单个细胞,也可以是细胞群。细胞培养目的与用途1、科学研究:药物研究开发与基础研究 药物研究与开发(1) 新药筛选:如化学合成药物药效研究、中药有效成分筛选与鉴定

哺乳动物细胞基因稳定转染的实验

实验材料 哺乳动物细胞试剂、试剂盒 完全培养液仪器、耗材 培养箱离心管实验步骤 1.  确定所要转染的细抱系能呈独立集落生长。对于贴壁细胞,在10 cm 组织培养培养皿中接种约100个细胞,培养10~12天,毎4天换液1次。亚甲蓝染色后对成活的细胞集落进行计数。 2.  确定母代细胞的选择条件:将一

哺乳动物昼夜节律神经机制获突破

  昼夜节律在生物体中广泛存在,对调节人们一天之中的运动、睡眠、代谢等诸多生理过程起着重要的作用。在人类社会中,如果这个生物钟紊乱会导致包括睡眠障碍在内的各种疾病,那么,它在神经系统中是如何产生、维持以及发挥作用的?  中国科学院脑科学与智能技术卓越创新中心(神经科学研究所)、上海脑科学与类脑研究中

实用哺乳动物细胞培养手册(五)

细胞培养基本概念细胞培养是指从体内组织取出细胞在体外模拟体内环境下,使其生长繁殖,并维持其结 构和功能的一种培养技术。细胞培养的培养物可以是单个细胞,也可以是细胞群。细胞培养目的与用途1、科学研究:药物研究开发与基础研究 药物研究与开发(1) 新药筛选:如化学合成药物药效研究、中药有效成分筛选与鉴定

哺乳动物核移植技术的具体方法

哺乳动物核移植技术研究进展哺乳动物核移植是将外源的一个细胞核与一个去核卵母细胞结合,产生遗传上同质的动物的技术。它在动物育种、制备转基因动物、基因治疗及器官移植等方面具有重大的作用。1、供体核的获得供体核可以是早期胚胎细胞、胚胎千细胞和体细胞。早期都采用合子核到64细胞期的胚胎细胞核质体分裂球作供体

实用哺乳动物细胞培养手册(中)

细胞培养环境1、实验室设计 细胞培养是一种无菌操作技术,要求工作环境和条件必须保证无微生物污染和不受 其它有害因素的影响。细胞培养室和设计原则是防止微生物污染和有害因素影响, 要求工作环境清洁、空气清新,干燥和无烟尘。细胞培养室的设计原则一般是无菌 操作区设在室内较少走动的内侧,常规操作和封闭培养于

哺乳动物细胞体外剪接分析实验

            实验方法原理 剪接反应的典型做法是使用核提取物,即 S100 提取物补充 SR 蛋白或粗提取物的部分纯化组分,最常使用的是 HeLa 细胞的提取物。前体 mRNA 底物通常采用噬菌体聚合酶体外转录的方法来制备。

哺乳动物精子的顶体的结构特点

哺乳动物精子的顶体是—个膜性帽状结构,覆盖着精子核的前端。顶体是膜包裹的溶菌体样结构,含有许多水解酶类.如放射冠穿透酶、透明质酸酶、顶体素.蛋白酶、脂解酶、神经酰胺酶和磷酸酶等,其中以放射冠穿透酶.透明质酸酶及顶体素与受精关系最为密切。

新生哺乳动物心脏受损后能自我愈合

  美国德州大学西南医学中心的研究人员在2月25日出版的《科学》杂志上报告说,老鼠实验表明,新生哺乳动物的心脏在受损后完全能够自我愈合,这一发现可为治疗人类心脏病提供新的思路。   实验中,研究人员将刚出生一周的小鼠15%的心脏切除,结果发现,在3周内,受损的心脏重新完好地长出来,

哺乳动物细胞体外剪接分析实验

剪接反应的典型做法是使用核提取物,即 S100 提取物补充 SR 蛋白或粗提取物的部分纯化组分,最常使用的是 HeLa 细胞的提取物。前体 mRNA 底物通常采用噬菌体聚合酶体外转录的方法来制备。本实验来源「RNA 实验指导手册」主编:郑晓飞。实验方法原理剪接反应的典型做法是使用核提取物,即 S10

哺乳动物纤毛中央微管形成的分子机制

  10月4日,国际学术期刊Nature Communications在线发表了中国科学院分子细胞科学卓越创新中心(生物化学与细胞生物学研究所)朱学良研究组发现的最新研究成果“Wdr47, Camsaps, and Katanin cooperate to generate ciliary cent

哺乳动物细胞的细胞培养温度

  维持培养细胞旺盛生长,必须有恒定而适宜的温度;不同种类的细胞对培养温度要求也不同。人体细胞培养的标准温度为36.5℃±0.5℃,偏离这一温度范围,细胞的正常代谢会受到影响,甚至死亡。培养细胞对低温的耐受力较对高温强,温度上升不超过39℃时,细胞代谢与温度成正比;人体细胞在39-40℃1小时,即能