预防癌症新手段:微滴式数字PCR(ddPCR)技术

“预防就是治疗”--《众病之王:癌症传》 战胜癌症,早期预防、早期发现是关键。癌症患者如果在晚期被发现,90%的患者都会死亡,而肿瘤在早期发现,5年的存活率是90%。早期发现恶变细胞踪迹,可以通过干预手段,提高自身免疫力,也可以完整切除,结合化疗,治疗疾病。 微滴式数字PCR(Droplet Digital PCR, DDPCR)是第三代 PCR(Polymerase Chain Reaction,聚合酶链式反应)技术,是一种对核酸分子进行绝对定量的方法。 可以对肿瘤早期进行筛查,项目可一次性检测与肿瘤发生发展密切相关的 9 个基因 48 个常见突变位点,覆盖常见恶性肿瘤,例如肝癌、肺癌、胃癌、胰腺癌、甲状腺癌、结直肠癌、乳腺癌、前列腺癌、肾癌、膀胱癌、恶性黑色素瘤、脑胶质瘤等。 只需抽取受检者 4ml 外周血,即可实现肿瘤早期无创检测。可以针对性的对高危人群、有肿瘤家族史易感人群、癌前病变人群、疑似肿瘤人群、癌症康......阅读全文

数字PCR缘何是PCR的未来?群雄逐鹿,几分天下?

  新冠疫情之下,“测核酸”已成为全民热词,PCR作为测核酸的官宣仪器也火爆热卖,这里指的是荧光定量PCR(qPCR)。大家知道,有时的“漏检”是因为病毒的copy数太低;而若想减少甚至消除“漏检”,可用另一种更灵敏更精准的数字PCR(digital PCR,dPCR)技术。dPCR和qPCR到底有

游离DNA的发现让肿瘤检测大不同

  自从在血液中循环的DNA被发现以来,那些来自恶性肿瘤的游离DNA(cell-free DNA,简称cfDNA)就引起了科学家的极大兴趣。近年来,围绕游离DNA的一些挑战正逐渐被攻破,而这些研究成果也正逐步转化为临床应用。GEN网站近日介绍了这些进展。  哈佛大学医学院的助理教授Geoffrey

数字PCR在癌症早筛和微小残留病灶检测的应用

最近几十年的大量研究表明,在许多血液系统恶性肿瘤中,微小残留病灶(MRD)与临床结果及预后显著相关。癌症中MRD是指癌症治疗达到完全缓解后,用常规的形态学检测方法不能检测到明显的癌病灶,而此时体内仍存在的少量癌细胞。微小残留病灶是肿瘤复发的直接原因。目前应用最广泛最精确的MRD检测手段是通过取患者的

关于数字PCR,这些干货请收好

  相对于传统的qPCR而言,数字PCR(dPCR)是一种高度灵敏的存在,能够实现核酸的绝对定量和稀有等位基因的检测。这种方法是在PCR扩增之前对样品进行微滴化处理,将DNA或cDNA样品分成上万个微滴,其中每个微滴或不含DNA靶分子,或含有一个或数个靶分子。每个微滴作为一个单独的PCR反应,利用终

数字式SF6微水测量仪简介

  数字式SF6微水测量仪是用于现场SF6、H2、、N2、CO2等气体中水分含量的高自动化数字显示测量仪器。具有测量范围宽、响应速度快、测量精度高、操作简便、显示直观、便携式以及测量时间短、用气量省等特点。该仪器湿敏传感器全部内置于密封的干燥装置中(它包括采样室和保护器)。传感器平常处于清洁干燥状态

数字PCR技术在DNA定量精准等领域的应用

数字PCR先进的数字PCR技术实现了样品中的单分子核酸扩增,从而使的DNA定量的精准度提高到了全新水平。Philip与Stilla Technologies的首席执行官兼联合创始人Rémi Dangla进行了交流,讨论了数字PCR技术领域的进展和挑战。Stilla Technologies公司总部位

如何预防各类“癌症”?

 国际抗癌联盟认为,1/3的癌症是可以预防的,1/3的癌症如能早期诊断是可以治愈的,1/3的癌症可以减轻痛苦,延长生命。据此提出了恶性肿瘤的三级预防概念:  一级预防是消除或减少可能致癌的因素,防止癌症的发生。约80%的癌症与环境和生活习惯有关,改善生活习惯,如戒烟,注意环境保护较为重要。近年来的免

BioRad发布QX-ONE-ddPCR--数字PCR一体机问世

聚合酶链式反应 ( polymerase chain reaction,PCR) 提出至今已有20年时间,期间PCR已发展成为分子生物学领域的一项关键技术和常规技术,极大地推动了生命科学各个领域的发展。PCR技术自问世以来,在遗传病、病原体、癌基因等分子诊断领域和法医鉴定等方面发挥了巨大作用。QX

数字PCR应用(二)

4、能够有效区分浓度差异(变化)微小的样品:更好的准确度、精密度和重复性,可以用于精确测定靶基因的相对表达,基因拷贝数变异分析等。图4. qPCR和dPCR的对比 四.dPCR的多指标检测的实现 如同qPCR一样,dPCR中实现多指标的并行检测能显著降低检测成本,获取更丰富的检测信息。 不同于qPC

什么是数字PCR

数字PCR技术是一种核酸分子绝对定量技术,其原理是将一个PCR反应体系分配到大量微小的反应单元中,在每个单元包含一个或多个拷贝的目标分子( DNA 模板) ,进行单分子模板扩增,扩增结束后通过阳性反应的数目和统计学方法计算原始样本中目标基因的拷贝数。

数字PCR的原理

数字 PCR 的工作原理在于将 DNA 或 cDNA 样品分割为许多单独、平行的 PCR 反应,部分这些反应包含了靶标分子(阳性),而其他不包含(阴性)。 单个分子可以被扩增一百万倍或更多。 在扩增期间,TaqMan® 化学试剂及染料标记探针可用于检测特定序列的靶标。 当不存在任何靶标序列时,没有信

数字PCR应用(一)

一. PCR的发展历史 PCR技术自问世以来,在遗传病、病原体、癌基因等分子诊断领域和法医鉴定等方面发挥了巨大作用。第一代 PCR在进行扩增后通过凝胶电泳进行定性分析。 随着生物分子荧光技术的发展,1992年实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR, qPCR) 应运

数字PCR应用(三)

Fluidigm公司于2006年底推出了基于集成流体通路(IFC)芯片的Bio-Mark™ 高通量基因剖析系统。 其创新在于集成液体通路技术:应用集成电路制造工艺(光刻)在硅片或石英玻璃上刻上许多微管和微腔体,经过不同的控制阀门控制溶液在其中的活动来完成生物样品的分液、混合、PCR扩增。图8. Bi

什么是数字PCR?

 数字PCR技术也称为第三代PCR技术,是一种核酸高灵敏检测和绝对定量的新方法。同传统的PCR相比,数字PCR增加了对反应体系进行分隔(Partition)的操作,将几十微升的反应体系分隔成了数万微小独立反应体系,核酸模板在这种分隔过程中被充分稀释,理想状态下每个微滴中含有1个分子的核酸模板,扩增完

什么是数字PCR

数字PCR即Digital PCR(dPCR),它是一种核酸分子绝对定量技术。相较于qPCR,数字PCR可让你能够直接数出DNA分子的个数,是对起始样品的绝对定量。PCR实际上是一个在模板DNA、引物(模板片段两端的已知序列)和四种脱氧核苷酸等存在的情况下,DNA聚合酶依赖的酶促合成反应,扩增的特异

数字PCR的原理

数字 PCR 的工作原理在于将 DNA 或 cDNA 样品分割为许多单独、平行的 PCR 反应,部分这些反应包含了靶标分子(阳性),而其他不包含(阴性)。 单个分子可以被扩增一百万倍或更多。 在扩增期间,TaqMan® 化学试剂及染料标记探针可用于检测特定序列的靶标。 当不存在任何靶标序列时,没有信

数字PCR的优势

    数字PCR是生命科学领域最引人瞩目的创新之一。与其他传统分子诊断技术相比,数字PCR技术的优势在于:    高灵敏度,可实现单分子级检测dPCR本质上将一个传统的PCR反应变成了数万个PCR反应, 在这数万个反应单元中分别独立检测目的序列,从而大大提高了检测的灵敏度。    高精度,可检测微

第二代数字PCR——管内芯片式数字PCR仪特点及优势简介

管子里面有芯片?!第二代数字PCR?! 如果你熟悉数字PCR,你肯定知道微滴式、芯片式。在精准医疗风靡全球的时代主题下,我们对于检测精准度、灵敏度也越来越高。PCR作为分子生物学一个重要工具、主要手段,被赋予的使命也越来越多;研究者们对这个工具的要求也越来越高。数字PCR的问世,正是为了解决这些要求

液滴微流控芯片原理

在微流控芯片中,液滴是两相界面处的表面张力和剪切力共同作用形成的,根据分散相和连续相的不同,液滴可分为两种:油相中的水相微液滴(W/O)和水相中的油相微液滴(O/W)。形成液滴的方法可分为被动法和主动法两种。被动法是指通过控制微管结构和两相流速比来控制液滴的生成。主动法一般通过外加力来驱动和控制液滴

美国RainDance推出RainDrop™-数字PCR系统

  2012年4月,美国RainDance Technologies公司在美国癌症研究学会(AACR)的年会上推出了RainDrop™ 数字PCR系统。这一新型系统在PCR分析的灵敏度、多重分析和绝对定量方面表现优异。RainDance Technologies公司推出的RainDrop™ 数字PC

合肥研究院开展数字定量PCR技术技术讲座

  5月20日,中国科学院合肥物质科学研究院技术生物与农业工程研究所邀请南京润亚生物科技发展有限责任公司技术总监围绕数字定量聚合酶链式反应技术(简称PCR技术)进行专题培训。  培训老师首先阐述了PCR技术的发展历史,PCR经历了传统PCR(核酸电泳定性分析)、实时定量PCR(相对定量分析)、数字P

微流控技术的PCR生物微芯片技术原理!

  基于数字流控(DMF)的聚合酶链式反应 (PCR)微芯片系统设计 ,主要在于对样品液滴的运动进行控制和对进行PCR所需要的温度控制 。设计了一种基于介电润湿 (Ew0D)原理的数字微流控PCR微芯片,并实现了对芯片不同区域的温度控制以满足PCR所需的要 求。基于数字微流控技术的PCR微芯片系统由

解密微流控技术的PCR生物微芯片技术原理

基于数字流控(DMF)的聚合酶链式反应 (PCR)微芯片系统设计 ,主要在于对样品液滴的运动进行控制和对进行PCR所需要的温度控制 。设计了一种基于介电润湿 (Ew0D)原理的数字微流控PCR微芯片,并实现了对芯片不同区域的温度控制以满足PCR所需的要 求。基于数字微流控技术的PCR微芯

PCR仪发展简史

1983年春,Mullis发展出PCR的概念;1983年9月,Mullis用大肠杆菌DNA聚合酶做了第一个PCR实验,只用一个循环;1986年6月,Cetus公司纯化了第一种高温菌DNA聚合酶。1988年,美国Cetus公司推出了第一台PCR自动化热循环仪;1990年,Haase首创原位PCR反应;

数字PCR应用及前景

 剖析|你想要知道的数字PCR应用及前景 一. PCR的发展历史 PCR技术自问世以来,在遗传病、病原体、癌基因等分子诊断领域和法医鉴定等方面发挥了巨大作用。代 PCR在进行扩增后通过凝胶电泳进行定性分析。 随着生物分子荧光技术的发展,1992年实时荧光定量PCR(Quantitative Real

数字PCR应用及前景

一. PCR的发展历史 PCR技术自问世以来,在遗传病、病原体、癌基因等分子诊断领域和法医鉴定等方面发挥了巨大作用。第一代 PCR在进行扩增后通过凝胶电泳进行定性分析。 随着生物分子荧光技术的发展,1992年实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR, qPCR) 应运

你想要知道的数字PCR应用及前景

 一. PCR的发展历史  PCR技术自问世以来,在遗传病、病原体、癌基因等分子诊断领域和法医鉴定等方面发挥了巨大作用。第一代 PCR在进行扩增后通过凝胶电泳进行定性分析。  随着生物分子荧光技术的发展,1992年实时荧光定量PCR(Quantitative Real-time PCR,

如何预防PCR污染?

  进行 PCR 反应时,遵照下列规则有助于防止 PCR 的污染。(1)PCR 的前处理和后处理在不同的房间或不同的隔离工作台上进行。即整个 PCR 操作要在不同的隔离区(标本处理区,PCR 扩增区,产物分析区)进行,特别是阳性对照需在另一个隔离环境中贮存、加入。(2)试剂要分装,每次取完试剂后盖紧

大脑无创性检测:-数字PCR技术诊断和追踪脑肿瘤

  脑肿瘤诊断往往涉及侵袭性神经外科手术,对于临床医生而言能够在不需要活体组织检测的条件下监视脑肿瘤是一个福音,这让他们能追踪和尽早治疗恶性脑肿瘤。   美国马萨诸塞州总医院(MGH)研究人员研发出基于数字PCR的、检测脑肿瘤相关IDH1突变体的分子诊断方法。该公司的Xandra B

第三代PCR技术纪念Kary-Mullis获得诺奖30周年

Mullis博士在发明PCR技术后曾这样描述:“用一个单分子DNA,PCR能在一个下午内产生100百万个相似的分子。反应很容易进行,只需要一个管子、一些简单的试剂和一个用来加热的设备”(Beginning with a single molecule of the genetic material