miRNA功能分析的五点建议
随着microRNA(miRNA)研究的深入,很多人开始从miRNA的发现转入功能分析。miRNA抑制是一种确定miRNA功能的强大技术。如何开展,需要注意些什么?Exiqon公司的专家给出了五点建议。 1. 选择合适的抑制剂 若希望miRNA功能分析成功,首先要选择一个最适合您实验的抑制剂。 • 检查您的目的miRNA是否属于可能的功能冗余的miRNA家族。如果这些家族成员在您的系统中表达,则您应当考虑抑制整个家族的家族抑制剂。 • 如果您正在研究非常高表达的miRNA或难转染的细胞,那么您应当考虑一些强力的抑制剂,如Exiqon的Power inhibitors。由于高稳定性,这些抑制剂适合需要长时间抑制的实验。 • 如果您正在研究一些容易转染的细胞,或不太能忍受强力抑制剂的细胞(如来自肌肉或中枢神经系统的细胞),那么常规的抑制剂可能是更好的选择。 2. 优化您的转染 优化......阅读全文
Nature发布miRNA重要发现:脂肪细胞的miRNA信号
脂肪细胞并不简单,Joslin糖尿病中心的科学家发现这种细胞并不只是静静的待在我们身体中,而且能释放出激素和其它信号蛋白,影响多种组织,其中一种竟然是miRNA。利用脂肪细胞研发基因治疗方法,也许能用于治疗肝脏或其它器官的代谢疾病,还有癌症等。 这一研究成果公布在2月15日的Nature杂志上
miRNA-mimics-miRNA-inhibitor
miRNA mimics 是模拟生物体 内源的miRNAs,运用化学合成的方法合成,能增强内源性miRNA的功能。miRNA inhibitor 是化学修饰的专门针对细胞中特异的靶miRNA的抑制剂。近年来人工合成的miRNA(artificial miRNA,amiRNA)已经成功应用于沉默预期靶
Nature-Medicine:掌控细胞生死的miRNA
瑞士苏黎世联邦理工学院(ETH)的研究人员在β细胞中对microRNA开展研究时,发现了一种对压力下细胞死亡起关键作用的microRNA。研究结果发布在5月18日的《自然医学》(Nature Medicine)杂志上。 糖尿病是现代社会的重要祸患之一,糖尿病病例每年都在上升。全球已有超过3.8
Nature-Medicine:掌控细胞生死的miRNA
瑞士苏黎世联邦理工学院(ETH)的研究人员在β细胞中对microRNA开展研究时,发现了一种对压力下细胞死亡起关键作用的microRNA。研究结果发布在5月18日的《自然医学》(Nature Medicine)杂志上。 糖尿病是现代社会的重要祸患之一,糖尿病病例每年都在上升。全球已有超过3.8
miRNA海绵—长效抑制miRNA
随着研究的深入,已知miRNA的数量与日俱增,目前Sanger miRBase数据库中收录的人miRNA已达721条。不过,大部分miRNA的功能仍是未知数。在基因功能研究中,最有效的方法是阻止特定基因的功能,然后了解其后果。miRNA同样如此。然而,相比之下,miRNA的功能研究要困难得多。为什么
miRNA海绵—长效抑制miRNA
miRNA海绵随着研究的深入,已知miRNA的数量与日俱增,目前Sanger miRBase数据库中收录的人miRNA已达721条。不过,大部分miRNA的功能仍是未知数。在基因功能研究中,最有效的方法是阻止特定基因的功能,然后了解其后果。miRNA同样如此。然而,相比之下,miRNA的功能研究要困
检测循环肿瘤细胞中miRNA的新技术
越来越多的证据表明,循环肿瘤细胞(CTC)中的micrornA具有诊断和预后的潜力。然而,检测却并非易事。近日,西班牙的研究人员在《Science Reports》上介绍了一种方法,能利用原位杂交检测这种小的非编码RNA。 CTC是从原发性肿瘤脱落,然后进入循环系统的一种细胞。它们到达其他的
干细胞牛人Nature聚焦抑癌miRNA家族
来自波士顿儿童医院、德国科隆大学医院等机构的研究人员证实,在神经母细胞瘤中多种机制破坏了let-7 microRNA家族。这一重要的研究发现发布在7月6日的《自然》(Nature)杂志上。 领导这一研究的是国际著名干细胞专家,美国血液肿瘤学Samuel E.Lux IV 教授,波士顿儿童医院干
miRNA研究
一、miRNA研究的基本问题和研究方法二、miRNA研究的综合解决方案1. miRNA微阵列芯片服务Agilent miRNA 芯片(21.0) Affymetrix miRNA 4.0 芯片2. miRNA测序服务 miRNA-seq文库构建流程 miRNA测序数据分析流程3. miRNA R
miRNA功能分析的五点建议
随着microRNA(miRNA)研究的深入,很多人开始从miRNA的发现转入功能分析。miRNA抑制是一种确定miRNA功能的强大技术。如何开展,需要注意些什么?Exiqon公司的专家给出了五点建议。 1. 选择合适的抑制剂 若希望miRNA功能分析成功,首先要选择一个最适合您实验
Cell-Reports:外泌体miRNA如何影响细胞通讯?
2013年,美国、德国3位科学家凭借他们所发现的细胞囊泡运输的调节机制,荣获2013年诺贝尔生理学或医学奖。外泌体(exosomes)作为人体内一类重要囊泡,也开始受到越来越多的关注。科学家们已发现,外泌体会参与到免疫应答、凋亡、血管生成、炎症反应、凝结等重要的生物过程中,细胞会通过分泌外泌体,
上海交大研究组:癌细胞分化与miRNA
来自上海交通大学医学院细胞分化与凋亡教育部重点实验室的研究人员发现了一种由HIF-1α 介导的,调控白血病细胞分化的新机制,这种作用因子能通过调控干扰细胞分化的miRNAs网络行驶功能,这将有助于解析急性髓系白血病AML细胞分化的机理。相关成果公布在Cell Death & Differ
RNA实验方案和应用(二)
miRNA 模拟物是化学合成的,双链RNA分子(通常长度为18–24个核苷酸),通过转染到细胞中,模拟成熟的内源性miRNA分子。miRNA抑制剂是单链(通常长度为21–25个核苷酸),经过修饰的RNA分子,通过转染到细胞中,特异性的抑制miRNA的功能。模拟物和抑制剂包含一些化学修饰,以便提高活性
miRNA克隆实验
在细胞中表达的 RNA 除了我们所熟悉的 mRNA 以外,还有大量不编码蛋白质的非编码 RNA(noncoding RNA,ncRNA),非编码 RNA 在细胞中起着非常重要的作用,如 rRNA 和 tRNA 维持着基因的表达,还有一部分则起着调控基因表达的作用。本实验来源「RNA 实验指导手册」主
miRNA--克隆实验
实验方法原理 在细胞中表达的 RNA 除了我们所熟悉的 mRNA 以外,还有大量不编码蛋白质的非编码 RNA(noncoding RNA,ncRNA),非编码 RNA 在细胞中起着非常重要的作用,如 rRNA 和 tRNA 维持着基因的表达,还有一部分则起着调控基因表达的作用。实验材料 寡核
miRNA克隆实验
实验方法原理 在细胞中表达的 RNA 除了我们所熟悉的 mRNA 以外,还有大量不编码蛋白质的非编码 RNA(noncoding RNA,ncRNA),非编码 RNA 在细胞中起着非常重要的作用,如 rRNA 和 tRNA 维持着基因
什么是细胞因子抑制剂?
细胞因子抑制剂通常是指具有以下四种特征之一的一类异质性药物。药物通过以下方式抑制细胞因子合成,减少产生细胞因子的细胞数量,而不影响细胞生存能力。
活细胞评价细胞周期抑制剂——ImageXpress®-Micro
前言监测对细胞周期变化的影响对于肿瘤的发展及药物研发有着重要的作用。例如,已知抑制有丝分裂的化合物大都用来减缓肿瘤细胞的生长。活细胞高内涵的筛选已被验证可以区分细胞的每个周期。此技术结合BacMam转染系统,可使细胞表达两种细胞周期相关荧光融合蛋白。延时监测实验持续2-3天,细胞置于ImageXpr
计生委:miRNA调控胚胎着床期的细胞凋亡
胚胎着床(Embryo Transfer,ET)是一个复杂的过程,也是受孕成功的基础。已有研究报道胚胎着床过程中大鼠子宫多个mRNA出现差异表达,但是未见有关接受前期(pre-receptive)和接受期(receptive)大鼠子宫miRNA表达谱的报道,关键的转录后基因表达调控元件。为此
靶向细胞周期的miRNA抑制癌症新发现
哈佛大学医学院、Dana-Farber癌症研究所Piotr Sicinski教授研究组与北京大学生命科学学院、北大-清华生命科学联合中心、统计科学中心李程研究组合作,在《Cancer Cell》期刊发表了题为 “Cell-Cycle-Targeting MicroRNAs as Therapeu
Science最新成果:一种能让细胞“变身”的miRNA
在被无情剥夺这种miRNA之后,你一定不会相信干细胞竟然会发生这种改变,一项最新研究表明,通过去除单个微小RNA(miRNA),多能干细胞竟可以实现罕见的全能化,获得分化成为胎盘等胚外组织的能力。这一研究极大程度上丰富了学术界对于细胞发育调控分子途径的认识,可以帮助临床医生和科学家通过干细胞技
Science-Reports:检测循环肿瘤细胞中miRNA的新技术
越来越多的证据表明,循环肿瘤细胞(CTC)中的micrornA具有诊断和预后的潜力。然而,检测却并非易事。近日,西班牙的研究人员在 Science Reports上介绍了一种方法,能利用原位杂交检测这种小的非编码RNA。 CTC是从原发性肿瘤脱落,然后进入循环系统的一种细胞。它们到达
实时荧光定量PCR技术2
qRT-PCR基因表达分析在384孔板上11ul/孔的总反应体积中,使用荧光Universal ProbeLibrary(UPL)探针(罗氏公司)和ABI 7900HT 实时仪器(美国应用生物系统公司)以及2X FastStart Universal Probe Master (Rox)PCR试剂(
miRNA与癌症:了解它们之间的关联
在肿瘤发生的经典模型中,癌症通过慢慢积累突变、放任细胞增长而发生。许多这样的突变影响关键的调控蛋白,如原癌基因和抑癌基因。不过,非编码RNA基因的突变也同样有害,尤其是microRNA。 microRNA(miRNA)是一类22个核苷酸的调控转录本。它们与mRNA靶点相结合,或抑制其翻译,或诱
实时荧光定量PCR技术
通过实时荧光定量PCR技术实现对miRNA靶向物mRNAs的相对定量分析1 导言小RNA(miRNAs)是一种内源性非编码蛋白的小分子RNA,它们是许多基础的细胞过程中基因表达的主要调节因子,这些过程包括细胞增殖、细胞分化以及细胞凋亡等。miRNA在肿瘤生长过程中也发挥着重要作用。一般来说,miRN
细胞因子抑制剂的功能介绍
依维莫司是由诺华公司最先研制开发的一种哺乳动物雷帕霉素靶蛋白抑制剂,临床上主要用于预防肾移植和心脏移植手术后的排异反应,2003年依维莫司在欧洲被批准用于治疗器官移植后排异反应并推向市场。依维莫司是西罗莫司衍生物,有效地用于预防器官移植排斥反应。其抗增殖和免疫抑制作用是通过与免疫结合蛋白形成复合物,
根除癌症干细胞的Wnt抑制剂
最近,一个团队——包括日本国立癌症中心(NCC)、日本理化学研究所生命科学技术中心(CLST)和日本Carna生物科学公司联合宣布,他们开发了一个新的小分子Wnt抑制剂,命名为NCB-0846。Wnt信号是癌症干细胞(CSC)发展的一条关键的通路。该抑制剂可为药物难治性大肠癌患者,提供一种新的治
几种常见的细胞因子抑制剂
● 抗细胞因子或其受体的抗体在正常人身上可以检测到微量的抗细胞因子抗体。这些抗体的功能还有待进一步探索。其中有些抗体可以起到抑制细胞因子的作用,有些抗体则可以延长细胞因子的半衰期。用细胞因子或其受体作为免疫原对动物进行免疫而获得的抗体,特别是某些单克隆抗体对细胞因子有很强的抑制作用,可用于治疗由细胞
mirna-pcr电泳多久
一般是根据PCR产物大小和所用电压来决定时间的吧一般溴酚蓝跑到胶的1/3处就可以了。电压大,就时间短,第一次跑,还是在边上观察着点吧,分子小,时间不长的。
MicroRNA(miRNA)的概念
MicroRNA(miRNA):是含有茎环结构的miRNA前体,经过Dicer加工之后的一类非编码的小RNA分子(~21-23个核苷酸)。MiRNA,以及miRISCs(RNA-蛋白质复合物)在动物和植物中广泛表达。因之具有破坏目标特异性基因的转录产物或者诱导翻译抑制的功能,miRNA被认为在调控发