杜仲的蛋白纯化及其药理研究

杜仲是国内特有的药用物种,经常作为临床使用,一般都是使用皮入药。对杜仲皮和杜仲胶颗粒中的蛋白进行了分离和蛋白纯化,为杜仲中的生物活性成分和药理研究提供了手段。但是杜仲中的很多化合物的结构和性质特别相近,因此其有效成分的提取和分离存在一定困难。 蛋白表达纯化是一项广泛应用于生物技术、生命科学和医药等研究领域的技术,用于重组蛋白表达的宿主细胞通常来源于原核细胞、哺乳细胞、昆虫细胞和酵母细胞等蛋白表达系统。美迪西提供蛋白表达服务,拥有多种蛋白表达系统,包括原核蛋白表达系统、酵母蛋白表达系统、昆虫细胞蛋白表达系统(杆状病毒)哺乳动物细胞蛋白表达系统,具备多种融合技术,可以为客户在蛋白表达与纯化方面提供多种选择。从方案设计、基因优化、表达条件优化到纯化的技术体系,以提高客户的目的蛋白表达水平。 1、杜仲的蛋白分离研究 用凝胶层析、反相高效色谱层析等分离纯化方法,从杜仲树皮中分离到分子量为4.1......阅读全文

蛋白质分离纯化的方法及原理

蛋白质分离纯化的方法及原理,利用分子大小。1、透析:原理:利用蛋白质分子不能透过半透膜的性质,使蛋白质和其他小分子物质如无机盐、单糖、水等分开。方法:将待提纯蛋白质放在透析袋中放在蒸馏水中进行涉及的问题:如何加快透析过程(1)加大浓度差,及时更换透析液( 2)利用磁力搅拌器常用的半透的蛋白质。2、超

his蛋白分离纯化时用咪唑的原因

是因为his含有咪唑基团,咪唑环可以与二价金属阳性子结合。呃,完整的解释是这样的: his含有咪唑基团,可以与二价金属阳性子结合,当带His标签的蛋白质结合在特殊的阳离子柱上的时候,可以被咪唑竞争下来。。。

全自动蛋白纯化系统可以检测、分离、纯化多种生物样品

全自动蛋白纯化系统可完成从实验室基础研究到整个工艺方法快速开发及放大。可以进行生物大分子的范例纯化,已知和未知蛋白质的纯化,蛋白质的结构动力学药物作用靶点研究,药物蛋白的分离,蛋白质工程药物的合成,蛋白质的定性,组织细胞中各种蛋白质在生物体中如何发展功能,基因表达产物的分离。全自动蛋白纯化系统可以检

蛋白纯化策略

(六)兴风作浪的乳糖(lactose)  晚上每天都有人做报告,我觉得让我收获最大的是Bill Studier的报告。本来这个报告是后来才听到的,但是由于Burgess的模块是唯一的涉及大肠杆菌钟表达蛋白的,我把这一段提前来说说。Studier这老哥是Brookhaven National Labo

蛋白质分离纯化研讨班举办通知

  近年来中国生物工程杂志社(中国生物工程学会、中国生物技术发展中心、中国科学院文献情报中心主办)围绕蛋白质分离纯化与抗体制备、生物工程下游技术、蛋白组学技术与应用等主题多次成功举办了专题研讨班,受到了国内生物技术研发与产业界的普遍欢迎。应广大参会代表的要求,现定于2009年10月24-25日在北京

蛋白质特性与分离纯化技术的选择

摘要:蛋白质的一级、二级、三级和四级结构决定了它的物理、化学、生物化学、物理化学和生物学性质,综述了不同蛋白质之间的性质存在差异或者改变条件是使之具有差异,利用一种同时多种性质差异,在兼顾收率和纯度的情况下,选择蛋白质提纯的方法。关键词:蛋白质 分离纯化前言    蛋白质在组织或细胞中一般都是以复杂

蛋白质的表达、分离、纯化和鉴定(2)

二、氯霉素酰基转移酶重组蛋白的分离,纯化 1. NTA层析柱的准备:在层析柱中加入1mL NTA介质,并分别用8mL 去离子水,8mL上样缓冲液洗涤。 2. 重组蛋白的变性裂解:在冰浴中冻融菌体沉淀,加入5mL上样缓冲液, 用吸管抽吸重悬,超声波破裂菌体,用振荡器等轻

蛋白质特性与分离纯化技术的选择

摘要:蛋白质的一级、二级、三级和四级结构决定了它的物理、化学、生物化学、物理化学和生物学性质,综述了不同蛋白质之间的性质存在差异或者改变条件是使之具有差异,利用一种同时多种性质差异,在兼顾收率和纯度的情况下,选择蛋白质提纯的方法。 关键词:蛋白质 分离纯化 前言 蛋白质

蛋白质的表达、分离、纯化和鉴定(1)

第一部分 蛋白质的表达、分离、纯化目的要求(1)了解克隆基因表达的方法和意义。(2)了解重组蛋白亲和层析分离纯化的方法。实验原理克隆基因在细胞中表达对理论研究和实验应用都具有重要的意义。通过表达能探索和研究基因的功能以及基因表达调控的机理,同时克隆基因表达出所编码的蛋白质可供作结构与功能的研究。大肠

盐析萃取偶联柱层析分离纯化血浆蛋白

血浆蛋白由数百种具有广泛生理功能的蛋白质组成,其中白蛋白与免疫球蛋白占据着血液制品中主要的市场份额。血浆成分十分复杂,目前工业上血浆蛋白的分离方法主要采用有机溶剂沉淀法、盐析法和柱层析,但这些方法尚存在着分离环境要求低温、分离纯化步骤繁琐、纯度和收率低等缺点。本论文开展了亲水性有机溶剂盐析萃取偶合柱

蛋白质分离纯化的一般程序

蛋白质分离纯化的一般程序可分为以下几个步骤:(一)材料的预处理及细胞破碎分离提纯某一种蛋白质时,首先要把蛋白质从组织或细胞中释放出来并保持原来的天然状态,不丧失活性。所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎。常用的破碎组织细胞的方法有:1.机械破碎法这种方法是利用机械力的剪切作用,使细胞破碎。常用设备有

蛋白质特性与分离纯化技术的选择

摘要:蛋白质的一级、二级、三级和四级结构决定了它的物理、化学、生物化学、物理化学和生物学性质,综述了不同蛋白质之间的性质存在差异或者改变条件是使之具有差异,利用一种同时多种性质差异,在兼顾收率和纯度的情况下,选择蛋白质提纯的方法。关键词:蛋白质 分离纯化前言    蛋白质在组织或细胞中一般都是以复杂

溶菌酶分离纯化及酶活力、蛋白浓度测定1

一、实验目的和内容目的:1. 通过本次实验的学习和操作,要求学生掌握离子层析的原理以及离子交换层析的操作方法;2. 掌握离子交换树脂的再生和保存;3.掌握比色法测定溶菌酶的酶活。内容:采用离子交换层析对实验二获得的初提液,进行进一步的分离纯化以得到较高纯度的溶菌酶。具体来说包括:1.离子交换层析分离

溶菌酶分离纯化及酶活力、蛋白浓度测定2

2.加样蛋白浓度低于20 mg/mL,上样体积小于柱体积的1/3。3. 在整个实验过程中,流速必须得到一定的控制。过大,会使填料压缩紧密,导致流速过低,层析柱有可能堵塞而实验失败,流速过小,实验时间过长,引起酶的活性变化。对于CM Sepharose FF填料,最适流速在100cm/h以下。

蛋白质分离纯化的一般程序

  1、材料的预处理及细胞破碎  分离提纯某一种蛋白质时,首先要把蛋白质从组织或细胞中稀释出来并保持原来的天然状态,不丧失活性。所以要采用适当的方法将组织和细胞破碎。常用的破碎组织细胞的方法有:  1.1、机械破碎法  这种方法是利用机械力的剪切作用,使细胞破碎。常用设备有,高速组织捣碎机、匀浆器、

溶菌酶分离纯化及酶活力、蛋白浓度测定3

同时,为了监测分离纯化的效果,我们必须对相应的结果进行检测。对于酶而言,主要通过其催化特异的反应进行监测。溶菌酶对革兰氏阳性菌的细胞壁有明显的破坏作用,可利用这一特性进行溶菌酶活性的监测,以便我们区分在纯化过程中,含有溶菌酶的组分。类似的采用 DEAE- 纤维素对抗体进行精制,特别是经过初步纯化后的

蛋白质分离纯化的5种方法

蛋白质分离纯化常用方法有:1、沉淀,2、电泳:蛋白质在高于或低于其等电点的溶液中是带电的,在电场中能向电场的正极或负极移动.根据支撑物不同,有薄膜电泳、凝胶电泳等.3、透析:利用透析袋把大分子蛋白质与小分子化合物分开的方法.4、层析:a.离子交换层析,利用蛋白质的两性游离性质,在某一特定PH时,各蛋

蛋白质的表达、分离、纯化实验——层析法

蛋白质表达、分离、纯化可以:(1)探索和研究基因的功能以及基因表达调控的机理;(2)供作结构与功能的研究;(3)作为催化剂、营养剂等。实验方法原理携带有目标蛋白基因的质粒在大肠杆菌BL21中,在 37℃,IPTG诱导下,超量表达携带有6个连续组氨酸残基的重组氯霉素酰基转移酶蛋白,该蛋白可用一种通过共

病毒纯化和蛋白纯化区别

病毒纯化和蛋白质纯化都是生物制剂工程中常见的分离纯化方法,但它们的对象不同,具体区别如下:1. 病毒纯化与蛋白质纯化对象不同。病毒纯化的目标是将病毒从其它生物物质中进行分离和去除,以获得单个且纯净的病毒颗粒,如用于疫苗生产的病毒载体,而蛋白质纯化的目标是从生物体或来源中提取和纯化单一或多种蛋白质,如

杜仲皮的药理作用

  ①降压作用  树皮的提取物及煎剂对动物有持久的降压作用。用其浸膏5毫升(生药1~2克)给麻醉犬静脉注射后产生显着的降压作用,可持续2~3小时,呈"快速耐受"现象。在3只肾型高血压狗,每天以煎剂5~8克/公斤灌胃,共4周,收缩压降低最多时只有8~22毫米汞柱(4~10%),因此疗效不够满意。杜仲的

杜仲叶的药理作用

  1.镇静、镇痛作用  杜仲叶煎剂20g/kg给小鼠灌胃后1小时,2小时,3小时,小鼠的自发活动次数明显减少,并以2小时最明显。热板法实验证实小鼠腹腔注射杜仲叶水煎醇沉液12g/kg能提高小鼠致痛阈,有明显镇痛作用。  2.对心血管系统的作用  2.1.对心脏的作用 杜仲叶水煎醇沉液0.2g对豚鼠

现代生物分离技术在多肽蛋白质分离纯化中的应用

摘要:蛋白质是生物体的重要组成部分,在现代生物制药领域有着重要的作用,本文介绍了现代生物分离技术反胶束萃取、双水相萃取和电泳在多肽蛋白质分离中的应用和现状。关键词:蛋白质  反胶束萃取  双水相萃取  电泳一、前言随着基因工程和细胞工程的发展,尽管传统的分离方法(如溶剂萃取技术)已在抗生素等物质的生

苦瓜毒蛋白理化性质和分离纯化方法介绍

  一、理化性质  α-苦瓜籽毒蛋白、早苦瓜籽毒蛋白和γ-苦瓜籽毒蛋白分子量分别是29000,28000和11500。以γ-苦瓜籽毒蛋白为例,系单链的碱性蛋白质,等电点约9.5。  二、分离纯化方法  取新鲜苦瓜果肉,匀浆,pH7.0,0.05mol/L磷酸缓冲液浸泡过夜,然后离心,超滤后用SCX阳

蛋白质分离纯化的新技术及技术要点

浅述蛋白质分离纯化的新技术摘 要: 本文主要介绍了浊点萃取法、置换色谱法、亲和层析法、亲和色谱法、凝胶电泳、双水相萃取等蛋白质的最新分离纯化技术,综和近年来国内外的一些研究结果,结合实际应用的例子,分析了各种分离纯化方法的优点,同时指出其不足之处。文章最后展望了蛋白质分离纯化技术的发展趋势。 关 键

关于分离纯化蛋白质的电泳操作的介绍

  *SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳,常用于蛋白质分子量的测定。  *等电聚焦电泳,通过蛋白质等电点的差异而分离蛋白质的电泳方法。  *双向凝胶电泳是蛋白质组学研究的重要技术。  * 层析(chromatography)或色谱法:待分离蛋白质溶液(流动相)经过一个固态物质(固定相)时,根据待分离蛋白质的

蛋白分离纯化方法之疏水相互作用层析法

由于在自然界生命活动中起重要作用的蛋白质在机体细胞内的浓度比较低,并且存在于细胞的各个机构中的蛋白质几乎都是以复杂的混合形式存在的。为了在不破坏蛋白质的空间结构及一级结构,和不影响其生理功能的情况下,把蛋白质分离、纯化出来,需要使用一些技术,如重组蛋白纯化技术。疏水相互作用层析法是蛋白分离纯化的一种

蛋白质的表达、分离、纯化时注意事项

当蛋白大量的表达时,包含体的形成几乎是不可避免的,而且很难通过改变一些诱导条件来改变,最有效的办法就是换表达系统,所以如果时间还充分的话,可以尝试一下,如果时间较短了,还是安心的做包含体蛋白的处理算了,而且变性之后的蛋白通过一些方法复性率也可以达到60%以上。

蛋白分离纯化方法之疏水相互作用层析法

由于在自然界生命活动中起重要作用的蛋白质在机体细胞内的浓度比较低,并且存在于细胞的各个机构中的蛋白质几乎都是以复杂的混合形式存在的。为了在不破坏蛋白质的空间结构及一级结构,和不影响其生理功能的情况下,把蛋白质分离、纯化出来,需要使用一些技术,如重组蛋白纯化技术。疏水相互作用层析法是蛋白分离纯化的一种

分离纯化含有包涵体的重组蛋白的方法

可以先用超声破碎法将细胞(或细菌)破碎,释放出包涵体,破碎效果可以通过显微镜进行检测;然后经离心取上清溶液,一般而言重组目的蛋白存在于上清溶液中,可以用电泳方法进行检测。再用适当方法进行分离纯化蛋白,其中包括蛋白的复性。重组蛋白分离纯化方法包括分子筛层析、离子交换、疏水层析、亲和色谱等方法

蛋白分离纯化方法之疏水相互作用层析法

由于在自然界生命活动中起重要作用的蛋白质在机体细胞内的浓度比较低,并且存在于细胞的各个机构中的蛋白质几乎都是以复杂的混合形式存在的。为了在不破坏蛋白质的空间结构及一级结构,和不影响其生理功能的情况下,把蛋白质分离、纯化出来,需要使用一些技术,如重组蛋白纯化技术。疏水相互作用层析法是蛋