《Nature》发布小鼠细胞的开源数据库TabulaMuris
近日,斯坦福大学、陈-扎克伯格生物中心以及加州大学旧金山分校的研究人员建立了一个名为Tabula Muris的开源数据库,收录了小鼠的多个细胞类型及其基因表达数据。这项成果于上周发表在《Nature》杂志上。 研究团队利用荧光活化细胞分选(FACS)方法和微流体液滴捕获方法,从小鼠20个不同器官中分离出超过10万个细胞,并开展单细胞RNA测序。这些数据让人们能够比较各个细胞类型和组织间的基因表达,从而更深入地了解细胞多样性。 共同通讯作者、陈-扎克伯格生物中心的Spyros Darmanis表示:“我们相信这一丰富的注释细胞集合将会成为生物医学研究的宝贵资源。通过这个项目,我们揭开了基因表达模式,能够鉴定各种组织的不同细胞类型,这可用于细胞选择、靶向和重编程。” 研究人员以三只雌性小鼠和四只雄性小鼠为研究对象,利用FACS方法分离出44,949个细胞,并利用微流体方法分离出55,656个细胞。这些小鼠为三个月大,大约相......阅读全文
Nature-Materials:将细胞“挤压”成为干细胞
瑞士洛桑联邦理工学院(EPFL)科学家们最近开发出一种新的方法,帮助细胞变成可用的干细胞。这种方法涉及使用凝胶来"挤压"细胞,为大规模生产医学用途的干细胞铺平了道路。 干细胞目前处于现代医学的前沿。它们能够转化为不同器官的细胞,有望为治疗一系列损伤和疾病提供新的方法。但以标准化的方式生产正确类
小鼠骨髓细胞染色体标本制作[细胞遗传]
一、实验目的和要求 通过这一实验,要求学生了解哺乳动物染色体标本的制作方法,并对动物染色体进行观察。 二、实验原理 由于小鼠四肢骨内骨髓细胞中的造血干细胞是生成各种血细胞和原始细胞,具有高度的分裂能力,本实验采用这一材料,通过前处理,低渗,固定,制片,染色等步骤制得染色体标本,可观察到许多处于分裂中
小鼠肌肉原代细胞的分离和生长(没有细胞分类)
实验材料新生的小鼠试剂、试剂盒乙醇PBS胶原蛋白酶 分散酶 氯化钙溶液F-10肌肉原代细胞培养基分化培养基仪器、耗材用于断头术的器具或者是用于二氧化碳吸人的装置锋利的弯手术剪(灭菌)组织培养板灭菌的剃刀刀片尼龙网桌面离心机胶原包被的组织培养板带相位光轴的倒置显微镜实验步骤1.用断头术或者二氧化碳吸入
流式细胞术检测人和小鼠Th细胞亚群(四)
从Rostaing等[2]发表流式细胞术检细胞内细胞因子的方法后,陆续有人研究了流式细胞术检测细胞内因子方法的可行性及重复性等问题。虽然活化T淋巴细胞有各种各样的方法,如:PMA、PHA、Con A、CD3、CD2和CD28等。但是目前公认的较好的方法仍然是PMA和钙离子载体的联合刺激。研究
流式细胞术检测人和小鼠Th细胞亚群(三)
2 不同时间的PMA刺激对小鼠外周血T淋巴细胞抗原表达的影响。PMA刺激8h后CD4阳性T淋巴细胞的表达没有明显下降。PMA刺激12h后,CD4阳性T淋巴细胞的表达明显下降。而CD8表达在8h和12h均没有明显下降。典型的检测结果见图2。图2 不同时间的PMA刺激对小鼠外周血T淋巴细胞抗原表达的影响
流式细胞术检测人和小鼠Th细胞亚群(二)
2 不同浓度的PMA刺激后人T淋巴细胞CD4、CD8和CD3的表达。24孔细胞培养板中,每孔加入约5×105个细胞,加入RPMI 1640培养基至总体积1ml。加入不同浓度的PMA(10ng、20ng和50ng终浓度)和500ng/ml Ionomycin共同刺激人外周血单个核细胞,同时加入
流式细胞术检测人和小鼠Th细胞亚群(一)
早在1986年Mosmann等[1]依据小鼠分泌的细胞因子谱不同首次将Th细胞分为Th1和Th2两个功能不同的独立亚群。Th1细胞主要分泌IL-2、、IL-12、IFN-γ和TNF- α等细胞因子,介导与细胞毒和局部炎症有关的免疫应答,参与细胞免疫及迟发型超敏反应。Th2细胞主要分泌IL-4、I
Nature:高盐摄入会改变小鼠的肠道菌群
肠道菌群是人体肠道的正常微生物,如双歧杆菌,乳酸杆菌等能合成多种人体生长发育必须的维生素,如B族维生素(维生素B1、B2、B6、B12),维生素K,烟酸、泛酸等,还能利用蛋白质残渣合成必需氨基酸,如天冬门氨酸、苯丙氨酸、缬氨酸和苏氨酸等,并参与糖类和蛋白质的代谢,同时还能促进铁、镁、锌等矿物元素
利用基因编辑在小鼠中成功开发基因驱动系统-|-Nature论文
根据本周《自然》在线发表的一篇论文Super-Mendelian inheritance mediated by CRISPR–Cas9 in the female mouse germline,基因驱动作为一种用于增强特定基因变异(等位基因)在种群中遗传性的策略,其可行性在实验室小鼠身上得到了
Nature:为何小鼠实验结果可信度越来越低?
众所周知,小鼠水平的实验结果往往无法适用对人的治疗。然而,最近越来越多的实验结果表明:在某一类小鼠亚群中得到的数据也无法在另一类小鼠亚群中重现。这表明许多啮齿类动物水平的实验从一开始就是不严谨的。 "我们通常认为小鼠都是相似的,但实际上这一看法存在一些问题",来自耶鲁大学的动物神经病理学家Ca
人类干细胞使截瘫小鼠再次移动
据外媒报道,现在有一些截瘫的小鼠能够再次行走,或者至少接近这样做,这多亏于人类干细胞。人类干细胞基本上帮助弥合了科学家们在动物脊髓研究领域的空白。这项研究由以色列理工学院Shulamit Levenberg博士领导的一个小组进行。 人类干细胞.jpg 研究人员通过从人类志愿者口腔粘膜
小鼠源细胞注意事项的过程
小鼠源细胞维护过程:1、用前仔细检查仪器,玻璃瓶是否有破损,各接口是否吻合,注意轻拿轻放。2、用软布(可用餐巾纸替代)擦拭各接口,然后涂抹少许真空脂。(真空脂用后一定要盖好,防止灰砂进入。)3、玻璃反应釜各接口不可拧得太紧,要定期松动活络,避免长期紧锁导致连接器咬死。4、先开电源开关,然后让机器由慢
小鼠腹腔巨噬细胞原代培养实验
腹腔取材法 实验方法原理 巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞
小鼠骨髓瘤细胞知识点
1.细胞株稳定,易于传代培养。2.细胞株自身不会产生免疫球蛋白或细胞因子。3.目前最常用的骨髓瘤细胞是NS-1和SP2/O细胞株。4.该细胞是次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转化酶(HGPRT)或胸腺嘧啶激酶(TK)的缺陷株。
原代细胞培养小鼠胚胎分离实验
鼠胚原代细胞培养 实验方法原理 原代细胞培养,是指直接从动物体内获取的细胞、组织或器官,在体外培养,直到第一次传代为止。这种培养,首先用无菌操作的方法,从动物
小鼠脾脏树突状细胞的分离方法
小鼠脾脏DC是研究最多的淋巴组织DC,其特征为组成性表达MHC-II类分子和CD11c。该细胞群可进一步分为三群:主要分布于边缘区的CD4+CD8-CD11b+DC,主要分布于T细胞区的CD4-CD8+CD11b-DC和双阴性DC----CD4-CD8+CD11b+。其中,CD8+DC表达CD1d和
小鼠神经干细胞的流式染色
实验概要小鼠神经干细胞的流式染色主要试剂荧光标记抗体CD133-PE、EGF-Alexa647,10μg/ml的PI,染色液主要设备15 mL离心管、10%FBS包被的玻璃巴斯德管、移液枪、70 μm细胞滤膜、4℃低温离心机实验步骤(1)接神经干细胞的分离和纯化最后一步。去上清,用染色液重悬细胞,向
小鼠胚胎干细胞培养实验
体外分化法 实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择(第3步),在有bFGF存
小鼠骨髓瘤细胞知识点
1.细胞株稳定,易于传代培养。2.细胞株自身不会产生免疫球蛋白或细胞因子。3.目前最常用的骨髓瘤细胞是NS-1和SP2/O细胞株。4.该细胞是次黄嘌呤鸟嘌呤磷酸核糖转化酶(HGPRT)或胸腺嘧啶激酶(TK)的缺陷株。
原代细胞培养小鼠胚胎分离实验
鼠胚原代细胞培养 实验方法原理 原代细胞培养,是指直接从动物体内获取的细胞、组织或器官,在体外培养,直到第一次传代为止。这种培养,首先用无菌操作的方法,从动物
原代细胞培养小鼠胚胎分离实验
原代细胞培养可应用于:(1)分子生物学;(2)细胞生物学;(3)遗传学;(4)免疫学;(5)肿瘤学;(6)病毒学等领域。实验方法原理原代细胞培养,是指直接从动物体内获取的细胞、组织或器官,在体外培养,直到第一次传代为止。这种培养,首先用无菌操作的方法,从动物体内取出所需的组织(或器官),经胰酶消化,
小鼠细胞-PCR反应体系与反应条件
小鼠细胞 PCR反应体系与反应条件标准的PCR反应体系: 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10~100pmol 模板DNA 0.1~2ug Taq DNA聚合酶 2.5u M
小鼠胚胎干细胞培养实验
体外分化法 实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择(第3步),在有bFGF存
小鼠胚胎干细胞培养实验
实验方法原理 胚胎干细胞在体内外可以分化为各种类型的细胞。我们的体外分化方法有利于神经前体细胞通过在最少量的培养基内选择(第3步),在有bFGF存在的情况下扩增(第4步)并最终分化在第5步。细胞全程培养在37℃,5%CO2,100%湿度条件下。一般体外诱导向神经细胞方向分化,也可以采用低浓度的RA进
小鼠细胞-PCR反应体系与反应条件
小鼠细胞 PCR反应体系与反应条件标准的PCR反应体系: 10×扩增缓冲液 10ul 4种dNTP混合物 各200umol/L 引物 各10~100pmol 模板DNA 0.1~2ug Taq DNA聚合酶 2.5u M
小鼠腹腔巨噬细胞原代培养实验
小鼠腹腔巨噬细胞原代培养可以:(1)用于细胞保种;(2)用于分子生物学研究;(3)用于基因治疗研究。实验方法腹腔取材法实验方法原理巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞属不繁殖细胞群,在条件适宜下可生活2-3
Neuron:罕见细胞帮助小鼠重新分辨颜色
最近,来自科罗拉多大学医学院的研究者们揭示了小鼠颜色感知的复杂性,这一发现对于治疗人类相关疾病提供了新的思路。 相关结果发表在最近一期的《Neuron》杂志上。(图片来源:CC0 Public Domain) 该研究是由来自科罗拉多大学医学院的神经学与解剖学系助理教授Maureen Stab
小鼠腹腔巨噬细胞原代培养实验
腹腔取材法 实验方法原理 巨噬细胞属免疫细胞,有多种功能,是研究细胞吞噬、细胞免疫和分子免疫学的重要对象。巨噬细胞容易获得,便于培养,并可进行纯化。巨噬细胞
小鼠骨髓细胞微核试验
实验方法原理 微核试验是用于染色体损伤和干扰细胞有丝分裂的化学毒物的快速检测方法。微核是指存在于细胞中主核之外的一种颗粒,大小相当于细胞直径的1/20~1/5,呈圆形或杏仁状,其染色与细胞核一致,在间期细胞中可以出现一个或多个。一般认为微核是
小鼠ES细胞的分离方法的介绍
小鼠ES细胞的分离方法基本成熟,且已广泛应用于生命科学研究的各个领域。1981年Evans首次分离得到小鼠ES细胞,他以手术切除受精后2.5d小鼠卵巢并结合激素注射干扰子宫环境,从而使胚胎延迟着床,再回收胚胎,将其体外培养于STO细胞饲养层上,结果得到了小鼠ES细胞系。MartinGR以免疫外科