研究亚细胞核结构nuclearspeckle在mRNA出核中的功能与机制
9月7日,国际学术期刊J Cell Biol 在线发表了中国科学院生物化学与细胞生物学研究所程红研究组的最新研究成果“Intronless mRNAs transit through nuclear speckles to gain export competence”,首次揭示了具备出核能力的RNP的装配位点——亚细胞核结构nuclear speckle。 Nuclear speckle作为一种高度动态变化的亚细胞核结构,从发现至今已有近60年的历史。由于nuclear speckle中富含大量剪接因子,迄今对于其功能的研究主要集中在剪接相关的功能与调控。目前,唯一被广泛接受的speckle的功能是剪接因子的贮存位点。除剪接因子外,mRNA出核转运因子也主要在nuclear speckle中富集,并且当mRNA出核受抑制时,mRNA也往往滞留在nuclear speckle中。然而,nuclear speckle是否在m......阅读全文
细胞凋亡mRNA检测
研究者们发现了很多在细胞凋亡时表达异常的基因,检测这些特异基因的表达水平也成为检测细胞凋亡的一种常用方法。据报道,Fas 蛋白结合受体后能诱导癌细胞中的细胞毒性T细胞(cytotoxic T cells)等靶细胞。Bcl-2 和bcl-X (长) 作为抗凋亡(bcl-2 和bcl-X)的调节物,它们
亚细胞核结构nuclear-speckle在mRNA出核中的功能与机制
9月7日,国际学术期刊J Cell Biol 在线发表了中国科学院生物化学与细胞生物学研究所程红研究组的最新研究成果“Intronless mRNAs transit through nuclear speckles to gain export competence”,首次揭示了具备出核能力的
细胞凋亡的mRNA检测
研究者们发现了很多在细胞凋亡时表达异常的基因,检测这些特异基因的表达水平也成为检测细胞凋亡的一种常用方法。据报道,Fas 蛋白结合受体后能诱导癌细胞中的细胞毒性T细胞(cytotoxic T cells)等靶细胞。Bcl-2 和bcl-X (长) 作为抗凋亡(bcl-2 和bcl-X)的调节物,它们
细胞凋亡的mRNA检测
研究者们发现了很多在细胞凋亡时表达异常的基因,检测这些特异基因的表达水平也成为检测细胞凋亡的一种常用方法。据报道,Fas 蛋白结合受体后能诱导癌细胞中的细胞毒性T细胞(cytotoxic T cells)等靶细胞。Bcl-2 和bcl-X (长) 作为抗凋亡(bcl-2 和bcl-X)的调节物,它们
细胞化学词汇mRNA帽
中文名称:mRNA帽英文名称:mRNA cap定 义:信使核糖核酸(mRNA)的5′端帽子结构。真核生物信使核糖核酸(mRNA)的帽结构为7-甲基鸟苷-5′-三磷酸,通过5′-5′方式与mRNA的5′端相连。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)
研究亚细胞核结构nuclear-speckle在mRNA出核中的功能与机制
9月7日,国际学术期刊J Cell Biol 在线发表了中国科学院生物化学与细胞生物学研究所程红研究组的最新研究成果“Intronless mRNAs transit through nuclear speckles to gain export competence”,首次揭示了具备出核能力的
单细胞mRNA差异显示实验
目前有几种方法可以显示生理刺激下组织样本中未知基因的表达水平变化。然而, 很多组织内的细胞又存在形态和功能上的异质性,因此常常需要从单个细胞水平研究基因表达的差异。现在,我们介绍一种新方法,它常规用来在单细胞水平考察未知基因的差异性表达。现代神经科学研究技术作者:U.Windhorst & H. J
单细胞mRNA差异显示实验
实验方法原理 ##流程图 试剂、试剂盒 溶液和缓冲液 仪器、耗材
单细胞mRNA差异显示实验
实验方法原理 ##流程图试剂、试剂盒 溶液和缓冲液仪器、耗材 水浴槽PCR热循环仪微量离心机塑料制品和滤器实验步骤 一、RNA 的分离收集对照组和实验组细胞,放入含 45ul2 mmol/L DTT 的 1.5 ml 微量离心管中。95℃ 水浴热解 2 min。每管加入以下物质:37℃ 温育 30
细胞化学词汇mRNA降解途径
中文名称:mRNA降解途径外文名称:mRNA degradation定 义:mRNA 降解途径是在真核细胞中调节基因表达的一个重要步骤。涉及到许多细胞内因子和复合物, 如Dcp1p、Pat1p、Rap55和staufen等.同时, 也有报导认为, 细胞质处理小体是体内mRNA 降解的主要
关于细胞凋亡的mRNA检测介绍
研究者们发现了很多在细胞凋亡时表达异常的基因,检测这些特异基因的表达水平也成为检测细胞凋亡的一种常用方法。据报道,Fas 蛋白结合受体后能诱导癌细胞中的细胞毒性T细胞(cytotoxic T cells)等靶细胞。Bcl-2 和bcl-X (长) 作为抗凋亡(bcl-2 和bcl-X)的调节物,
细胞化学词汇mRNA稳定性
中文名称:mRNA稳定性英文名称:mRNA stability定 义:信使核糖核酸(mRNA)在细胞内存在的稳定程度。mRNA易为外界环境,包括物理的、化学的和酶的因素所破坏,与其他种类RNA相比,半寿期较短,一般为数分钟。体内mRNA的稳定性与特异结合蛋白的存在与否有关。应用学科:生物化学与分子
mRNA-的细胞内注射实验
实验步骤一、用于细胞内注射的加帽 mRNA 的制备材料步骤1.依次加入下列物质,终体积为 20ul,冰上操作:2.37℃ 温育 lh。3.加入 Iul DNA 酶 I(无 RNA 酶),37℃ 温育 10 min。4.用 RNaid 试剂盒提纯 mRNA。5.25ul 灭菌水(无 RNA 酶)溶解
mRNA-的细胞内注射实验
实验步骤 一、用于细胞内注射的加帽 mRNA 的制备 材料 步骤 1.依次加入下列物质,终体积为 20ul,冰上操作: 2.37℃ 温育 lh。 3.加入 Iul DNA 酶 I(无 RNA 酶),37℃ 温育
关于细胞凋亡的mRNA检测介绍
研究者们发现了很多在细胞凋亡时表达异常的基因,检测这些特异基因的表达水平也成为检测细胞凋亡的一种常用方法。据报道,Fas 蛋白结合受体后能诱导癌细胞中的细胞毒性T细胞(cytotoxic T cells)等靶细胞。Bcl-2 和bcl-X (长) 作为抗凋亡(bcl-2 和bcl-X)的调节物,
mRNA-的细胞内注射实验
实验步骤 一、用于细胞内注射的加帽 mRNA 的制备材料 步骤1.依次加入下列物质,终体积为 20ul,冰上操作:2.37℃ 温育 lh。3.加入 Iul DNA 酶 I(无 RNA 酶),37℃ 温育 10 min。4.用 RNaid 试剂盒提纯 mRNA。5.25ul 灭菌水(无 RNA 酶)溶
细胞亚株的概念
中文名称细胞亚株英文名称cell substrain定 义由原细胞株再次克隆形成的与原株性状有部分不同的细胞群。应用学科细胞生物学(一级学科),细胞培养与细胞工程(二级学科)
亚细胞成分及组成
细胞是生物体的构造和生理的基本单位,却不能因此认为所有的生物细胞都相同,即使在同一个个体内,也有因为分化而产生各式各样外观与功能不同的细胞,即使相同种类的细胞,也可能正在执行的生理工作也有差异,但是基本上彼此都有共同的基本构造。细胞膜细胞膜为细胞与环境之间以及细胞器与细胞质之间的分界,能够调节物质的
怎么亚细胞定位分析
用报告基因技术呀 比如说最常用的绿色荧光蛋白GFP或者改造过的EGFP等。和目的基因构建成为融合蛋白,转入细胞中以后,用激光扫描共聚焦显微镜就可以观察到基因的亚细胞定位
LSCM细胞亚微结构
细胞亚微结构(细胞器探针)一般的光学显微镜由于分辨率有限,在观察细胞器结构时受到一定的限制,而共聚焦激光扫描显微镜可获得较一般普通光学显微镜分辨率高的细胞内线粒体、高尔基复合体、内质网、溶酶体等细胞器图像,同时还可动态观察活细胞状态下细胞器的形态学变化情况,此外还可通过光学切片即断层扫描技术进行三维
亚细胞的成分介绍
细胞是生物体的构造和生理的基本单位,却不能因此认为所有的生物细胞都相同,即使在同一个个体内,也有因为分化而产生各式各样外观与功能不同的细胞,即使相同种类的细胞,也可能正在执行的生理工作也有差异,但是基本上彼此都有共同的基本构造。细胞膜细胞膜为细胞与环境之间以及细胞器与细胞质之间的分界,能够调节物质的
外无细胞体系翻译病毒-mRNA
实验材料 ATP GTP 质粒 DNA 肌酸磷酸激酶 10%SDS 胶 肌酸磷酸激酶 核酸酶
外无细胞体系翻译病毒-mRNA
实验材料 ATP GTP 质粒 DNA 肌酸磷酸激酶 10%SDS 胶肌酸磷酸激酶 核酸酶 tRNAHeLaS3 细胞 TgSVA 细胞 Lx 细胞来源于表达人脊髓灰质炎病毒受体的 Ltk 细胞 NS20Y 细胞 人肝癌来源的 HepG2 细胞试剂、试剂盒 HEPES-KOH Tris-HCl 等渗
Nature:如何利用单细胞mRNA测序发现罕见细胞类型?
近日,来自荷兰的科学家在著名国际学术期刊nature上发表了一项最新研究进展,他们利用一种新的计算方法结合转录组测序发现了小肠中一些罕见的细胞类型,这对于深入了解器官的细胞组成,探究健康和疾病状态下的组织生物学具有重要意义。 理解一个器官的发育和功能需要对组成该器官的所有细胞类型的特性有一个清
检测细胞中mRNA水平的方法有哪些
如果检测一个或者少数mRNA的话,可以提取总RNA之后反转录,用荧光定量pcr检测其表达量。如果需要检测大量基因的表达的话,用基因芯片或者转录组测序会比较好
细胞化学词汇无义介导的mRNA衰变
中文名称:无义介导的mRNA衰变英文名称:nonsensemediated mRNA decay;NMD定 义:真核生物细胞质中广泛存在的、 保守的信使核糖核酸(mRNA)质量监视系统。 降解异常的mRNA,如含有提前终止密码子(无义突变)、移码突变、剪接不完全(含部分内含子)、3′非翻译区过长的
4.6-外无细胞体系翻译病毒-mRNA
用哺乳动物细胞 S10 抽提物翻译脊髓灰质炎病毒和丙型肝炎病毒 mRNA 的技术。实验材料ATPGTP质粒 DNA肌酸磷酸激酶10%SDS 胶肌酸磷酸激酶核酸酶tRNAHeLaS3 细胞TgSVA 细胞Lx 细胞来源于表达人脊髓灰质炎病毒受体的 Ltk 细胞NS20Y 细胞人肝癌来源的 HepG2
质粒转染细胞之后多久测外源性mrna表达
不整合入基因组中,可以整合到细胞基因组上进行表达,比如腺病毒类的表达载体;有些质粒上有整合的序列。一般的表达质粒上后面有自带的polyA序列,所以产生的mRNA是带polyA尾巴的质粒转染细胞后是整合到基因组中还是游离存在这要看你用的是哪一种质粒载体,有些质粒就在细胞中进行表达
肝亚细胞部分的制备
肝是代谢药物的主要场所,而在代谢药物中起关键作用的酶是位于线粒体的细胞色素P-450系统.常称药酶或混合功能氧化酶,或单加氧酶。一般说来,许多药物经肝药酶代谢后生成低毒或无毒分子随尿和胆汁排出,但亦有一些药物及其他化合物经肝药酶代谢激活成毒性更大的中间产物,引起毒性。因此,肝药酶代谢药物的分子机制及
细胞化学词汇亚致死基因
中文名称:亚致死基因英文名称:sublethal gene定 义:其存在可以妨碍或减弱生物体正常功能发挥的一种基因。应用学科:生物化学与分子生物学(一级学科),核酸与基因(二级学科)