通过CsCl等密度梯度离心纯化λ噬菌体颗粒实验
CsCl 等密度梯度离心用于制备最高纯度的感染性 λ 噬菌体颗粒，它没有任何细菌核酸的污染。从这种噬菌体颗粒中提取的 DNA 可用作 DNA 测序的模板、亚克隆至质粒载体和产生用于原位杂交的探针。这种方法第二个优点是，由它所获得的噬菌体原种是高度浓缩的（大于 1011 cfu/ml)，在 4℃ 保存时，许多年后仍能保持它们的感染力。本实验来源「分子克隆实验指南实验方法原理CsCl 等密度梯度离心用于制备最高纯度的感染性 λ 噬菌体颗粒，它没有任何细菌核酸的污染。从这种噬菌体颗粒中提取的 DNA 可用作 DNA 测序的模板、亚克隆至质粒载体和产生用于原位杂交的探针。这种方法第二个优点是，由它所获得的噬菌体原种是高度浓缩的（大于 1011 cfu/ml)，在 4℃ 保存时，许多年后仍能保持它们的感染力。实验材料λ 噬菌体悬浮液试剂、试剂盒CsCl乙醇仪器、耗材Beckman SW41 或 SW28 转子或相当型号......阅读全文
通过CsCl－等密度梯度离心纯化λ噬菌体颗粒实验
实验方法原理 CsCl 等密度梯度离心用于制备最高纯度的感染性 λ 噬菌体颗粒，它没有任何细菌核酸的污染。从这种噬菌体颗粒中提取的 DNA 可用作 DNA 测序的模板、亚克隆至质粒载体和产生用于原位杂交的探针。这种方法第二个优点是，由它所获得的噬菌体原种是高度浓缩的（大于 1011 cf
通过CsCl－等密度梯度离心纯化λ噬菌体颗粒实验
实验方法原理 CsCl 等密度梯度离心用于制备最高纯度的感染性 λ 噬菌体颗粒，它没有任何细菌核酸的污染。从这种噬菌体颗粒中提取的 DNA 可用作 DNA 测序的模板、亚克隆至质粒载体和产生用于原位杂交的探针。这种方法第二个优点是，由它所
通过CsCl－等密度梯度离心纯化λ噬菌体颗粒实验
CsCl 等密度梯度离心用于制备最高纯度的感染性 λ 噬菌体颗粒，它没有任何细菌核酸的污染。从这种噬菌体颗粒中提取的 DNA 可用作 DNA 测序的模板、亚克隆至质粒载体和产生用于原位杂交的探针。这种方法第二个优点是，由它所获得的噬菌体原种是高度浓缩的（大于 1011 cfu/ml)，在 4℃ 保存
λ噬菌体臂的纯化（通过蔗糖密度梯度离心）实验
实验方法原理 与插入型载体不同，置换型载体的基因组含有中部的填充片段，为了容纳外源 DNA 片段，填充片段必须被去除。该过程一般被称为“λ 臂的制备”，包括用限制酶消化 λDNA 使两臂与填充片段分开以及随后的臂的纯化。
λ噬菌体臂的纯化（通过蔗糖密度梯度离心）实验
与插入型载体不同，置换型载体的基因组含有中部的填充片段，为了容纳外源 DNA 片段，填充片段必须被去除。该过程一般被称为“λ臂的制备”，包括用限制酶消化 λDNA 使两臂与填充片段分开以及随后的臂的纯化。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理与插入型载体不同，置换型载体的基因组
λ噬菌体臂的纯化（通过蔗糖密度梯度离心）实验
实验方法原理 与插入型载体不同，置换型载体的基因组含有中部的填充片段，为了容纳外源 DNA 片段，填充片段必须被去除。该过程一般被称为“λ 臂的制备”，包括用限制酶消化 λDNA 使两臂与填充片段分开以及随后的臂的纯化。实验材料 λ 噬菌体 DNA试剂、试剂盒 EDTA乙醇正丁醇乙酸钠蔗糖凝胶上样缓
通过甘油分级梯度离心纯化λ噬菌体颗粒实验
实验方法原理 本方案适用于制备噬菌体原种、制备噬菌体颗粒（用来获得 DNA 进行亚克隆）以及制备 λ 噬菌体臂。 实验材料 λ 噬菌体颗粒悬浮液
通过甘油分级梯度离心纯化λ噬菌体颗粒实验
本方案适用于制备噬菌体原种、制备噬菌体颗粒（用来获得 DNA 进行亚克隆）以及制备 λ 噬菌体臂。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理本方案适用于制备噬菌体原种、制备噬菌体颗粒（用来获得 DNA 进行亚克隆）以及制备 λ 噬菌体臂。实验材料λ 噬菌体颗粒悬浮液试剂、试剂盒ED
通过甘油分级梯度离心纯化λ噬菌体颗粒实验
实验方法原理 本方案适用于制备噬菌体原种、制备噬菌体颗粒（用来获得 DNA 进行亚克隆）以及制备 λ 噬菌体臂。实验材料 λ 噬菌体颗粒悬浮液试剂、试剂盒 EDTA甘油SM胰 DNase Ⅰ仪器、耗材 Beckman SW41 或 SW28 转子或相当型号离心管实验步骤 一、材料1. 缓冲液和溶液E
超速离心法纯化病毒实验——等密度梯度离心
实验方法原理离心过程中 CsCl 随离心力而下沉，形成连续梯度，上部密度小而下部密度大，离心管内病毒悬液中的病毒和细胞碎片随其密度的大小而下沉或上浮到相等密度梯层中实验材料待纯化的病毒试剂、试剂盒CsCl仪器、耗材离心机实验步骤在每毫升病毒悬液中，加入 CsCl 约 1 g, 混匀，4℃以 40 0
中量提取质粒DNA（CsCl－密度梯度离心法）
中量提取质粒DNA（CsCl 密度梯度离心法） 2010‐07‐07李渊越1. 将菌液倒入装有 50mL TB 的锥形瓶中，或从培养好的平板上挑取单克隆，锥形瓶置于37℃摇床350rpm 培养16-20h,至OD600 到10-12。（OD600 到40 为用TBS 培养基在我们的培养条件下所能达到
大量提取质粒DNA（CsCl－密度梯度离心法）
大量提取质粒DNA（CsCl 密度梯度离心法） 2010-7-7大量提取质粒DNA（CsCl 密度梯度离心法）李渊越1. 预约摇床、超速离心机。2. 配 TB 培养基（1L 锥形瓶中装250 ml 培养液），并灭菌。质粒做好转化，并涂板。3. 第一天早上，往 TB 中加入适量的Amp 或Kana。挑
噬菌体克隆的纯化实验
基本方案 实验材料 噬菌体 试剂、试剂盒
噬菌体克隆的纯化实验
实验材料 噬菌体试剂、试剂盒 LB顶层琼脂糖氯仿SMMgSO4仪器、耗材 培养箱牙签硝酸纤维素膜实验步骤 1. 在直径82 mm LB平极上倒入含200 μl 宿主菌的3 ml 0.7%顶层琼脂糖，放置10 min。 2. 通过放射自显影胶片上的杂交斑点确定阳性噬斑在原平板上的位置，用牙签轻轻插
噬菌体克隆的纯化实验
噬菌体是感染细菌、真菌、放线菌或螺旋体等微生物的细菌病毒的总称，作为病毒的一种，噬菌体具有病毒特有的一些特性：个体微小；不具有完整细胞结构；只含有单一核酸。噬菌体基因组含有许多个基因，但所有已知的噬菌体都是在细菌细胞中利用细菌的核糖体、蛋白质合成时所需的各种因子、各种氨基酸和能量产生系统来实现其自身
通过中空纤维洗滤纯化纳米颗粒
简介相较于传统的纳米颗粒纯化方法，如超速离心、搅拌室过滤、透析或者层析方法，中空纤维洗滤（中空纤维切向流过滤）是一种更加高效、快速的替代方法。中空纤维洗滤可以用于纯化多种纳米颗粒，包括脂质体、胶乳颗粒、磁珠以及纳米管1,2。中空纤维洗滤是一种基于膜分离的技术，膜孔径的大小决定了大分子或颗粒是被截留还
用－CsCl，Percoll,－Nycodenz,－metrizamide作自形成密度梯度离心－二
四）碘盐自形成梯度：（ Nycodenz或 metrizamide） 这二种梯度材料在固定角式转头或垂直管转头，近垂直转头离心过程中会用较短的时间就可以自形成密度。和重金属盐一样，离心力、转头种类、离心时间对自形成梯度的形状都有很大的影响。由于碘盐的粘性系数对温度很敏感，很小的温升也会因
用－CsCl，Percoll,－Nycodenz,－metrizamide作自形成密度梯度离心－三
表（三）metrizamide及其溶液的性质（20℃）浓度密度g/ml折射率粘性渗透率百分比浓度％（W/V）Molar00.0000.99821.33301.00100.1271.05121.34831.3107200.2531.10621.36461.6180300.3801.16121.3809
用－CsCl，Percoll,－Nycodenz,－metrizamide作自形成密度梯度离心－一
用 CsCl，Percoll, Nycodenz, metrizamide作自形成密度梯度离心一）概述：近年来用重金属盐（主要是 CsCl）分离生物大分子的平衡等密度离心；用 Percoll（由瑞典 pharmacia-Biosystems AB开发的胶体硅材料，即在硅颗粒外包覆 PVP塑料
超速离心法纯化病毒实验——密度梯度离心
实验方法原理病毒的密度与细胞碎片不同，用梯度制备仪制成适宜的介质梯度如蔗糖梯度或 CsCl 密度梯度，将病毒悬液加到密度梯度的上层，进行超速离心，离心管内病毒悬液中的病毒和细胞碎片随其自身密度的大小而下沉或上浮到相等密度梯层中，吸出含有病毒的沉淀带，即可得到相当纯净的病毒。实验材料待纯化的病毒试剂、
总RNA提取实验——CsCl法
实验材料RNA试剂、试剂盒PBS异硫氰酸胍CsClDEPC无水乙醇仪器、耗材注射器电泳仪离心机培养箱实验步骤一、 用于单层培养细胞 1. 室温下用PBS冼涤细胞，每平皿用5 ml，洗2次。2. 在不超过108细胞中加入异硫氰酸胍溶液，并使之遍布整个平皿。3. 用橡皮细胞刮子擦刮平皿，回收粘稠的
用甲酰胺从大规模培养物中提取λ噬菌体DNA实验
可用甲酰胺代替 SDS/蛋白酶 K 将纯化的噬菌体颗粒去除外壳。这种方法虽然不是很有效，但在某种意义上它比以前的操作方法更快。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理可用甲酰胺代替 SDS/蛋白酶 K 将纯化的噬菌体颗粒去除外壳。这种方法虽然不是很有效，但在某种意义上它比以前的操
从自然环境中分离和纯化噬菌体实验
实验方法原理因为噬菌体是专性寄生物，所以自然界中凡有细菌分布的地方，均可发现其特异的噬菌体的存在，亦即噬菌体一般是伴随着宿主细菌的分布而分布的，例如粪便与阴沟污水中含有大量大肠杆菌，故也能很容易地分离到大肠杆菌噬菌体；乳牛场有较多的乳酸杆菌，也容易分离到乳酸杆菌噬菌体等。虽然近年的研究表明，自由噬菌
从自然环境中分离和纯化噬菌体实验
实验方法原理 因为噬菌体是专性寄生物，所以自然界中凡有细菌分布的地方，均可发现其特异的噬菌体的存在，亦即噬菌体一般是伴随着宿主细菌的分布而分布的，例如粪便与阴沟污水中含有大量大肠杆菌，故也能很容易地分离到大肠杆菌噬菌体；乳牛场有较多的乳酸杆菌，也容易分离到乳酸杆菌噬菌体等。虽然近年的研究表明，自由噬
通过平板裂解和洗脱制备λ噬菌体原种实验
来源于单个噬菌斑的 λ 噬菌体原种的制备，通常有两种方法：① 平板裂解，这是一种噬菌体在生长于顶层琼脂或琼脂糖的细菌中增殖的方法；② 小量液体培养，这是用生长于液体培养基中的细菌进行噬菌体增殖的方法。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理来源于单个噬菌斑的 λ 噬菌体原种的制备
通过平板裂解和洗脱制备λ噬菌体原种实验
实验方法原理 来源于单个噬菌斑的 λ 噬菌体原种的制备，通常有两种方法：① 平板裂解，这是一种噬菌体在生长于顶层琼脂或琼脂糖的细菌中增殖的方法；② 小量液体培养，这是用生长于液体培养基中的细菌进行噬菌体增殖的方法。
通过平板裂解和洗脱制备λ噬菌体原种实验
实验方法原理 来源于单个噬菌斑的 λ 噬菌体原种的制备，通常有两种方法：① 平板裂解，这是一种噬菌体在生长于顶层琼脂或琼脂糖的细菌中增殖的方法；② 小量液体培养，这是用生长于液体培养基中的细菌进行噬菌体增殖的方法。实验材料 λ 噬菌体原种大肠杆菌铺平板细菌试剂、试剂盒 氯仿SM仪器、耗材 LB 或
噬菌体颗粒的分类
噬菌体颗粒在结构上有很大差别，一般可分成三种类型，即无尾部结构的二十面体，有尾部结构的二十面体和线状体，迄今已知的噬菌体大多数是有尾部结构的二十面体。噬菌体有毒（烈）性噬菌体和温和噬菌体两种类型。侵入宿主细胞后，随即引起宿主细胞裂解的噬菌体称作毒性噬菌体。毒性噬菌体被看作正常表现的噬菌体。温和噬菌体
核酸的物理性质
物理性质黏性：DNA的高轴比等性质使得其水溶液具有高黏性，很长的DNA分子又易于被机械力或超声波损伤，同时黏度下降。浮力密度：可根据DNA的密度对其进行纯化和分析。在高浓度分子质量的盐溶液（CsCl）中，DNA具有与溶液大致相同的密度，将溶液高速离心，则CsCl趋于沉降于底部，从而建立密度梯度，而D
核酸的物理性质
黏性：DNA的高轴比等性质使得其水溶液具有高黏性，很长的DNA分子又易于被机械力或超声波损伤，同时黏度下降。浮力密度：可根据DNA的密度对其进行纯化和分析。在高浓度分子质量的盐溶液（CsCl）中，DNA具有与溶液大致相同的密度，将溶液高速离心，则CsCl趋于沉降于底部，从而建立密度梯度，而DNA最终