WIKI资讯
WIKI资讯
四）碘盐自形成梯度：（ Nycodenz或 metrizamide） 这二种梯度材料在固定角式转头或垂直管转头，近垂直转头离心过程中会用较短的时间就可以自形成密度。和重金属盐一样，离心力、转头种类、离心时间对自形成梯度的形状都有很大的影响。由于碘盐的粘性系数对温度很敏感，很小的温升也会因粘性降低而加速自形成梯度的形成。碘盐的扩散速度比重金属盐要快一些，为了修正梯度曲线，一般在离心管底部铺较高密度材料（参考文献 2） 可惜，碘盐的自形成梯度离心没有进行数学计算式的研究，但是大量的实验文献提供了足够的经验，使我们根据需分离样品的特点选择最佳的梯度形状（文献 2，以及 Rickwood.D.有关这方面一系列的文章） 各种生物体组分在碘盐中的浮密度细胞核线粒体溶酶体过氧化酶体质膜天然 DNA降解 DNANycodenz1.231.171.151.221.11～1.191.131.17metrizamide1.22......阅读全文
用 CsCl，Percoll, Nycodenz, metrizamide作自形成密度梯度离心一）概述：近年来用重金属盐（主要是 CsCl）分离生物大分子的平衡等密度离心；用 Percoll（由瑞典 pharmacia-Biosystems AB开发的胶体硅材料，即在硅颗粒外包覆 PVP塑料
●等运动梯度（等速梯度）（Isokinetic）等运动梯度是指在某一恒定离心转速时，样品颗粒在梯度中以定常速度沉降。要做到等速沉降，必须使梯度液密度和粘性力的增加与沿着离心半径方向的离心力增加相平衡，在这种梯度液中，颗粒的沉降距离与离心时间，离心力，以及颗粒本身的沉降系数成正比。因此如果已知某单一组
（2）各种转头用于等密度离心的优缺点分析： A、固定角式转头：主要用于差分离心的角式转头，在超速离心机上可以很好地用于等密度离心，尤其是 DNA平衡等密度离心，自形成梯度，用快速密封管或厚壁管，常用的单管的容量为 10~40ml。常用转速 40,000~80,000rpm，离心时间较短，分离
表（三）metrizamide及其溶液的性质（20℃）浓度密度g/ml折射率粘性渗透率百分比浓度％（W/V）Molar00.0000.99821.33301.00100.1271.05121.34831.3107200.2531.10621.36461.6180300.3801.16121.3809
ⅰ. 差分离心： 在不存在密度梯度条件下分离细胞是这种方法的主要特点，差分离心可以是利用地球重力（1g），也可以是利用低速离心分离组织匀浆。在重力或离心力作用下一些比较大的细胞沉降速度较快，当它们已变成沉淀时，大部分比较小的的细胞由于沉降速度慢而仍留在上清液中。很明显在大的细胞变成沉淀时
*章离心机及转子的分类：一．离心机的分类：国际上对离心机的分类方法有三种：按用途分、按转速分和按结构分。按用途分类：分为制备型离心机和制备分析离心机。制备型离心机：仅供分离浓缩，提纯试样的离心机。制备分析离心机：不但能分离浓缩、提纯试样，而且可以通过光学系统对试样的沉降过程进行观察、拍照、测量、数字
一）简介：用简易的差分离心结合各种型式的密度梯度离心可以分离和纯化各种亚细胞器。研究者也可以根据自己的设备情况对实验参数做一定的改动，也可以更多地利用速率-区带密度梯度离心或等密度离心来简化实验过程和提高分离纯度。二）实验：ⅰ）匀浆制备： 鼠肝12克加入0.25M蔗糖与5mM Tris-H
利用细胞的特性[尺寸、密度、电特性、表面(抗原)性质，光散射特性等等]可以用各种方法分离和纯化细胞。离心分离是利用不同尺寸和密度的细胞在离心场中沉降行为的不同，从组织匀浆或血液中分离纯化的技术。用离心技术分离和纯化细胞主要依赖的方法是差分离心、速率－区带密度梯度离心、等密度离心和利用特殊转头的细胞浮
用以上公式算出的离心时间和实际离心结果非常接近。从公式可以看出T反比子（N4、r2），显然在CsCl不结晶析出的前提下提高（N4、r2）将会减少离心时间,而增加转速的效果特别明显。但是对于某些较低转速转头（如 65,000rpm以下）CsCl自形成梯度所需时间过长（10小时）以上，因此质粒DNA纯样
实验概要本实验介绍了氯化铯-溴化乙锭梯度平衡离心法(即连续梯度法)纯化闭环DNA的原理及操作步骤等。实验原理用含氯化铯和溴化乙锭的悬浮密度梯度离心法分离质粒和染色体 DNA 的方法，取决于线性 DNA 和闭环 DNA 结合的溴化乙锭的量的差异。许多年来，纯化大量质粒 DNA 的首选方法是
方法：（黄瓜病叶匀浆粗病毒提取并浓缩后）Ⅰ. CSCL自形成梯度用平均密度近1.37的CSCL，（每毫升加0.5克），日立CP100MX离心机，P100AT2转头，6.5PA管，样品量0.5～1ml均匀混在 CSCL中，加满离心管， &n
主要参数指标●最高转速 （r/min） ●最大相对离心力 （g ）●最大容量 （ml） ●温度设定范围 （℃）●定时范围 （min） ●转速精度 （r/min） ●温控精度 （±℃） ●整机噪声 （<dB(A)） ●电源 （Ac220V Hz A） ●外形尺寸 （mm） ●重量 （kg
例4：肝细胞的不连续密度梯度分离这种方法适用于从肝窦状细胞（Sinusoidal）中除去红细胞和主质细胞（parenchymal）,离心结果是让红细胞沉淀，内皮细胞（Sinusoidal）浮上。实验需要的基本设备和溶剂：l 一台带甩平转头的低速、低温离心机；l GBSS；l&
一、什么是禽流感？禽流感（AI）是由A 型流感病毒（AIV ）引起的禽类疾病综合症。禽类感染AIV 后表现为：轻度上呼吸道感染、精神萎缩、食欲减退，有类似人类A 型流感的症状。初期还会引起肉用鸡停止增重，蛋鸡产蛋量大大下降，种蛋孵化率下降等。发病很急，很短时间就会发展到全身致死性疾病综合症。AIV
用葡聚糖（Dextran）和聚乙二醇（Polyethyleneglycol,PEG）二相不连续梯度分离纯化动植物样品的细胞膜片断（特别是质膜）的方法始于1989年（文献1）。这种方法的特点是快速，操作简单，重复性好。只需要低速离心机（4,000rpm），分离成本低。用PEG和Dextran 混合
用葡聚糖（Dextran）和聚乙二醇（Polyethyleneglycol,PEG）二相不连续梯度分离纯化动植物样品的细胞膜片断（特别是质膜）的方法始于1989年（文献1）。这种方法的特点是快速，操作简单，重复性好。只需要低速离心机（4,000rpm），分离成本低。用PEG和Dextran 混合后再
细胞分离就是通过物理、生物、化学的方法，将生物组织分离为单细胞分散系的过程。干细胞分离的方法有很多，离心分离是常用方法之一。 离心技术是利用物体高速旋转时产生强大的离心力，使置于旋 ...细胞分离就是通过物理、生物、化学的方法，将生物组织分离为单细胞分散系的过程。干细胞分离的方法有很多，离心分离是常
用体外或体内试验对机体的各种参与免疫应答的细胞进行鉴定、计数和功能测定，藉以了解机体的免疫状态，并对某些临床疾病的诊断，预后及疗效观察等也具有一定意义。一、免疫细胞的分离体外测定免疫细胞首先要从外周血或淋巴组织中分离所需的细胞。其主要方法是根据细胞的表面标记、理化性状及功能等方面的差别进行设计。
实验概要分离方法一般有两种，一是酶消化方法，把叶片表皮撕去后，用纤维素酶和果胶酶消化细胞壁，得到原生质体，再把原生质体通过尼龙网小孔(孔径20μm)，使原生质体破裂而释放出完整叶绿体，但此方法分离得到的叶绿体数量有限。另一种是用机械方法，先用捣碎机破碎叶片，再分步离心，可以大量制备叶绿体。这里主要介
例（3）用CsCl 梯度分离DNA 并测定其组成（% G+C）（i）CsCl 溶液密度D 与溶液中CsCl 的重量百分比浓度P 之间的关系： D=138.11/（137.48-P）（ii） 制备初密度为1.706 克/毫升的梯度液，应按以下要求配置·4.85 克CsCl （分析纯）·50μl ，1.
方案一 连续蔗糖梯度：离心机，转头。单管配置：1）13PET管：20%-50%（W/W）连续蔗糖梯度。用0.01M Tris-Hcl配置蔗糖梯度：用20%，25%，30%，35%，40%，45%，50%（W/W）蔗糖液各1.5ml，从离心管低部逐层向上铺设（底部高密度），铺二管，直立在试
方案一 连续蔗糖梯度：日立CPMX或WX系列离心机，P40ST转头13PET管或13PA管。单管配置：1）13PET管：20%-50%（W/W）连续蔗糖梯度。用0.01M Tris-Hcl配置蔗糖梯度：用20%，25%，30%，35%，40%，45%，50%（W/W）蔗糖液各1.
用含氯化铯和溴化乙锭的悬浮密度梯度离心法分离质粒和染色体 DNA 的方法，取决于与线状 DNA 和闭环 DNA 结合的溴化乙锭的量的差异。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。连续梯度法实验方法原理用含氯化铯和溴化乙锭的悬浮密度梯度离心法分离质粒和染色体 DNA 的方法，取决于与线状 DN
连续梯度法 不连续梯度法 实验方法原理 用含氯化铯和溴化乙锭的悬浮密度梯度离心法分离质粒
例（6）用Cs2SO4 及尿素作梯度材料分离生物大分子样品：初步离心后的蛋白-核酸混合液梯度液：3.00g Cs2SO4 2.5ml 8M 尿素（经过混合床去离子处理的）50μl 1.0M Tris-HCl（PH7.4）25μl 0.2M EDTA（PH7.4）1.25ml 样品的水溶液以上各项充分
【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7～8d小鼠的生殖细胞悬液；用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%；平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞；精原细胞主要分布
【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7～8d小鼠的生殖细胞悬液；用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%；平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞；精原细胞主要分布
【摘要】 目的 探讨小鼠精原细胞的分离纯化。 方法 用组合酶消化法制备7～8d小鼠的生殖细胞悬液；用Percoll不连续密度梯度法分离精原细胞。 结果 所获细胞悬液内活细胞、死细胞及细胞团的百分比分别为90.08%、9.92%及8.91%；平均每个睾丸可获得4.136×105个细胞；精原细胞主要分布
从上面公式可以看出，要使曲线变陡： a：降低β° b：提高转速 c：加大离心半径 d：增大初始密度以同等转速离心，甩平转头的 r较大，在同等初始密度条件下，甩平转头的密度梯度曲线比垂直管转头、近垂直转头或固定角式转头都要陡一些。（参见下图）CSCL初始密度为 1.72g/cm3时的自形成梯度曲线九十
一、简述近代质粒DNA分离纯化以从大肠杆菌中分离为代表，鉴于大局杆菌（E.coli）在分子生物学研究中的重要地位，从E.coli中分离纯化质控DNA〈Piasmid DNA〉成为近年来超离心技术中一个重要课题。而质粒DNA的快速分离纯化又对超离心设备（超速离心机、转头和附属设备）提出了更高要求。E.