总RNA提取实验——CsCl法
实验材料RNA试剂、试剂盒PBS异硫氰酸胍CsClDEPC无水乙醇仪器、耗材注射器电泳仪离心机培养箱实验步骤一、 用于单层培养细胞 1. 室温下用PBS冼涤细胞，每平皿用5 ml，洗2次。2. 在不超过108细胞中加入异硫氰酸胍溶液，并使之遍布整个平皿。3. 用橡皮细胞刮子擦刮平皿，回收粘稠的细胞裂解液。4. 用装有20-G针头的皮下注射器往返抽吸裂解物，并合并在一起。 二、用于悬浮培养细胞 1. 用JS-4，2转子离心回收≤108细胞，重悬于相当于1/2原有体积的PBS，并再次离心回收细胞。 2. 往离心管中加入3.5 ml 异硫氰酸胍溶液。 3. 用装有20-G针头的6注射器将粘稠的细胞裂解液注返抽吸4次，并将其移至一个干净的试管中。 4. 在经硅化并高压过的13 mmx......阅读全文
总RNA提取实验——CsCl法
实验材料RNA试剂、试剂盒PBS异硫氰酸胍CsClDEPC无水乙醇仪器、耗材注射器电泳仪离心机培养箱实验步骤一、 用于单层培养细胞 1. 室温下用PBS冼涤细胞，每平皿用5 ml，洗2次。2. 在不超过108细胞中加入异硫氰酸胍溶液，并使之遍布整个平皿。3. 用橡皮细胞刮子擦刮平皿，回收粘稠的
CsCl法从组织中提取RNA
试剂、试剂盒 液氮 组织胍溶液 十二烷基肌氨酸钠 CsCl 组织重悬液 乙酸钠酚 氯仿 异戊醇 异戊醇 无水乙醇仪器、耗材 组织捣碎机 离心机实验步骤 一 材料与设备1）液氮2）组织胍溶液：590.8 g 异硫氰酸胍溶于 400ulDEPC 处理的水中，加入 25 mmol/LTris-Cl(p
CsCl法从组织中提取RNA
试剂、试剂盒 液氮 组织胍溶液 十二烷基肌氨酸钠 CsCl 组织重悬液 乙酸钠 酚 氯仿
CsCl法从培养细胞中提取RNA
试剂、试剂盒 磷酸盐缓冲溶液 硫氰酸胍溶液 CsCl TES 缓冲液 乙酸钠缓冲液 无水乙醇 经 DEFC 处理的水
2.1.6－CsCl法从组织中提取RNA
由于一些组织（如胰脏和睥脏）含有高浓度的内源性 RNA 酶，因此纯化源于组织的 RNA 须更加小心。试剂、试剂盒液氮组织胍溶液十二烷基肌氨酸钠CsCl组织重悬液乙酸钠酚氯仿异戊醇异戊醇无水乙醇仪器、耗材组织捣碎机离心机实验步骤一 材料与设备1）液氮2）组织胍溶液：590.8 g 异硫氰酸胍溶于 40
CsCl法从培养细胞中提取RNA
试剂、试剂盒 磷酸盐缓冲溶液 硫氰酸胍溶液CsClTES 缓冲液 乙酸钠缓冲液无水乙醇 经 DEFC 处理的水。仪器、耗材 离心机 注射器及20W针头实验步骤 一 材料与设备1) 磷酸盐缓冲溶液 (PBS)2) 硫氰酸胍溶液：4mol/L 硫氰酸胍，0.lmmol/LTris-HClpH7.5，1%
2.1.5－CsCl法从培养细胞中提取RNA
通过硫氰酸胍提取和氯化铯离心法制备 RNA，适于分离细胞质和细胞核难分开的细胞以及富含 RNase 的细胞中的 RNA。试剂、试剂盒磷酸盐缓冲溶液硫氰酸胍溶液CsClTES 缓冲液乙酸钠缓冲液无水乙醇经 DEFC 处理的水。仪器、耗材离心机注射器及20W针头实验步骤一 材料与设备1) 磷酸盐缓冲溶液
大量提取质粒DNA（CsCl－密度梯度离心法）
大量提取质粒DNA（CsCl 密度梯度离心法） 2010-7-7大量提取质粒DNA（CsCl 密度梯度离心法）李渊越1. 预约摇床、超速离心机。2. 配 TB 培养基（1L 锥形瓶中装250 ml 培养液），并灭菌。质粒做好转化，并涂板。3. 第一天早上，往 TB 中加入适量的Amp 或Kana。挑
中量提取质粒DNA（CsCl－密度梯度离心法）
中量提取质粒DNA（CsCl 密度梯度离心法） 2010‐07‐07李渊越1. 将菌液倒入装有 50mL TB 的锥形瓶中，或从培养好的平板上挑取单克隆，锥形瓶置于37℃摇床350rpm 培养16-20h,至OD600 到10-12。（OD600 到40 为用TBS 培养基在我们的培养条件下所能达到
通过CsCl－等密度梯度离心纯化λ噬菌体颗粒实验
实验方法原理 CsCl 等密度梯度离心用于制备最高纯度的感染性 λ 噬菌体颗粒，它没有任何细菌核酸的污染。从这种噬菌体颗粒中提取的 DNA 可用作 DNA 测序的模板、亚克隆至质粒载体和产生用于原位杂交的探针。这种方法第二个优点是，由它所获得的噬菌体原种是高度浓缩的（大于 1011 cf
通过CsCl－等密度梯度离心纯化λ噬菌体颗粒实验
实验方法原理 CsCl 等密度梯度离心用于制备最高纯度的感染性 λ 噬菌体颗粒，它没有任何细菌核酸的污染。从这种噬菌体颗粒中提取的 DNA 可用作 DNA 测序的模板、亚克隆至质粒载体和产生用于原位杂交的探针。这种方法第二个优点是，由它所
通过CsCl－等密度梯度离心纯化λ噬菌体颗粒实验
CsCl 等密度梯度离心用于制备最高纯度的感染性 λ 噬菌体颗粒，它没有任何细菌核酸的污染。从这种噬菌体颗粒中提取的 DNA 可用作 DNA 测序的模板、亚克隆至质粒载体和产生用于原位杂交的探针。这种方法第二个优点是，由它所获得的噬菌体原种是高度浓缩的（大于 1011 cfu/ml)，在 4℃ 保存
用－CsCl，Percoll,－Nycodenz,－metrizamide作自形成密度梯度离心－一
用 CsCl，Percoll, Nycodenz, metrizamide作自形成密度梯度离心一）概述：近年来用重金属盐（主要是 CsCl）分离生物大分子的平衡等密度离心；用 Percoll（由瑞典 pharmacia-Biosystems AB开发的胶体硅材料，即在硅颗粒外包覆 PVP塑料
用－CsCl，Percoll,－Nycodenz,－metrizamide作自形成密度梯度离心－三
表（三）metrizamide及其溶液的性质（20℃）浓度密度g/ml折射率粘性渗透率百分比浓度％（W/V）Molar00.0000.99821.33301.00100.1271.05121.34831.3107200.2531.10621.36461.6180300.3801.16121.3809
用－CsCl，Percoll,－Nycodenz,－metrizamide作自形成密度梯度离心－二
四）碘盐自形成梯度：（ Nycodenz或 metrizamide） 这二种梯度材料在固定角式转头或垂直管转头，近垂直转头离心过程中会用较短的时间就可以自形成密度。和重金属盐一样，离心力、转头种类、离心时间对自形成梯度的形状都有很大的影响。由于碘盐的粘性系数对温度很敏感，很小的温升也会因
日本劳动安全卫生法目录新增270个新物质
2013年7月24日，日本厚生劳动省发布声明：日本劳动安全卫生法(ISHL)目录中新增270个物质，从而使ISHL目录下的物质数增加到了62907个。 日本有两种化学物质名录，一种是依据《劳动安全卫生法》(ISHL)而制定，而另一种则以《化学品控制法案》(CSCL)为基础。两种法规在监管新
RNA－在甲酰胺中的溶解保存
试剂、试剂盒 无水乙醇 异丙醇 的乙醇 甲酰胺 3mol L 的乙酸钠仪器、耗材 高速离心机 紫外分光光度计实验步骤 一材料与设备所有的试剂配制均需采用经过蒸馏并消毒的去离子水。1) 无水乙醇2) 异丙醇3)75% 的乙醇4)100% 甲酰胺5)3mol/L 的乙酸钠6) 高速离心机7) 紫外分光光
连续梯度法纯化闭环DNA
实验概要本实验介绍了氯化铯-溴化乙锭梯度平衡离心法(即连续梯度法)纯化闭环DNA的原理及操作步骤等。实验原理用含氯化铯和溴化乙锭的悬浮密度梯度离心法分离质粒和染色体 DNA 的方法，取决于线性 DNA 和闭环 DNA 结合的溴化乙锭的量的差异。许多年来，纯化大量质粒 DNA 的首选方法是 CsCl
氯化铯溴化乙锭梯度平衡离心法纯化闭环DNA实验（二）
实验方法原理通过不连续或预先形成的氯化铯（CsCl）梯度离心，可在离心管中获得含有不同浓度 CsCl 的溶液分层，样品位于中层（三级梯度法）或底层（两级梯度法）。实验材料粗制质粒试剂、试剂盒CsCl溴化乙锭TE仪器、耗材皮下注射针头折光仪一次性注射器实验步骤一、材料1. 缓冲液和溶液CsCl ( 固
用有机溶剂抽提法从DNA中除去溴化乙锭实验
欲从经 CsCl 梯度纯化的 DNA 中去除溴化乙锭，常用有机溶剂反复抽提的方法。随后可用透析或沉淀的方法去除 CsCl。本实验来源「分子克隆实验指南第三版」黄培堂等译。实验方法原理欲从经 CsCl 梯度纯化的 DNA 中去除溴化乙锭，常用有机溶剂反复抽提的方法。随后可用透析或沉淀的方法去除 CsC
用有机溶剂抽提法从DNA中除去溴化乙锭实验
实验方法原理 欲从经 CsCl 梯度纯化的 DNA 中去除溴化乙锭，常用有机溶剂反复抽提的方法。随后可用透析或沉淀的方法去除 CsCl。实验材料 DNA 样品试剂、试剂盒 乙醇水饱和的异戊醇或 n-丁醇酚TE仪器、耗材 透析管和夹离心机和转头实验步骤 一、材料1. 缓冲液和溶液乙醇，水饱和的异戊醇或
“质粒DNA超速离心分离”的补充说明
一）用CSCL-E.B.梯度分离大肠杆菌中质粒DNA、染色体DNA、蛋白质及RNA的详细步骤（1） 溶液制备：溶液Ⅰ：50mM葡萄糖，10mM EDTA,25 mM Tris-HCL (PH8.0)。溶液Ⅱ：0.2M NaOH，1%SDS。溶液Ⅲ：3M醋酸钠（PH4.8）TE缓冲液：10 mM Tr
用有机溶剂抽提法从DNA中除去溴化乙锭实验
实验方法原理 欲从经 CsCl 梯度纯化的 DNA 中去除溴化乙锭，常用有机溶剂反复抽提的方法。随后可用透析或沉淀的方法去除 CsCl。 实验材料 DNA
RNA－在甲酰胺中的溶解保存
实验方法原理 甲酰胺具有活泼的反应性和特殊的溶解能力，可用作有机合成原料，纸张处理剂，纤维工业的柔软剂，动物胶的软化剂，还用作测定大米中氨基酸含量的分析试剂。在有机合成中，医药方面的用途居多，在农药、染料、颜料、香料、助剂方面也有很多用途。也
基因转染技术的DNA的准备介绍
用于转染的质粒DNA必须无蛋白质，无RNA和其它化学物质的污染，OD260/280比值应在1.8以上。DNA的质量和纯度能影响某些细胞系的转染效率，可以通过CsCl梯度法或标准柱层析法进行纯化。
氯化铯溴化乙锭梯度平衡离心法纯化闭环DNA
连续梯度法 不连续梯度法 实验方法原理 用含氯化铯和溴化乙锭的悬浮密度梯度离心法分离质粒和染色体 DNA 的方法，取决于与线状 DNA 和闭环 DN
生物大分子的离心分离实验（二）
例（3）用CsCl 梯度分离DNA 并测定其组成（% G+C）（i）CsCl 溶液密度D 与溶液中CsCl 的重量百分比浓度P 之间的关系： D=138.11/（137.48-P）（ii） 制备初密度为1.706 克/毫升的梯度液，应按以下要求配置·4.85 克CsCl （分析纯）·50μl ，1.
RNA－在甲酰胺中的溶解保存
将 RNA 保存于甲酰胺中比储存于水中或乙醇中有更多好处：（1）甲酰胺将保护 RNA 不受 RNA 酶的降解，以这种方式保存的 RNA 是相当稳定的，可以在 4℃ 保存过夜，或在一 20°C 保存相当长的一段时间。样品甚至可以置于室温过夜而不用担心其降解；（2）样品可被高度浓缩，其终浓度甚至可以达到
DNA提取中EB的去除实验方法
Removal of Ethidium Bromide from DNA by Extraction with Organic SolventsJoseph SambrookPeter Maccallum Cancer Institute and The University of Melbourn
CTAB－法从干燥材料中提取DNA的方法
从干燥材料中提取(1)粗提①试剂a.1倍 CTAB 提取缓冲液:2倍 CTAB 贮存液稀释1倍,使用前每100mL 加入巯基乙醇0.14mL。b.其他试剂与从新鲜材料中提取相同。②操作a.称取 1g 干燥材料置研钵中,加入3～4g 铝粉研磨。b.将粉末转入离心管中,加入0.6～15mL 1倍 CTA