反转录病毒产毒细胞系建立实验
建立一个能产生高水平的反转录病毒构建体的细胞系是一个长期的过程。首先，必须将反转录病毒构建体稳定地导入一种适当的包装细胞系中。当产生了稳定的细胞系后，必须对之进行鉴定，从中选出能产生具有正确结构的高滴度的病毒的细胞系。实验材料包装细胞系试剂、试剂盒HEPESCaCl2甘油DMSO仪器、耗材培养皿培养板离心机实验步骤1. 在转染前1天，在10 cm 培养皿中接种包装细胞，接种密度大约相当于10%~20%片的细胞数。2. 将10 μg 含有药物抗性基因的反转录病毒质粒DNA加入0.5 ml HeBS。再加入32 μl 2 mol/l CaCl2并同时轻轻摇晃。用手指轻弹试管外壁约 30 s，然后在室温下温育45 min，直到形成细小的淡蓝色沉淀。3. 移去包装细胞的培养液，吸取HeBS-DNA沉淀轻轻加在培养皿的中央。在组织培养操作橱内让细胞接触DNA 20 min，大约10 min 后，轻轻转动......阅读全文
大规模制备和浓缩反转录病毒原液实验
离心法 聚乙二醇相沉淀及层析法浓缩病毒 实验材料 病毒细胞 试剂
大规模制备和浓缩反转录病毒原液实验
对于某些用途来说（如体内感染细胞），有必要浓缩反转染病毒原液以增加其滴度。如果想要用不编码可选择标记的病毒感染一群细胞，必须用髙滴度的病毒。操作中需用几百毫升至几升的产毒细胞上清。聚乙二醇相沉淀及层析法浓缩病毒实验材料病毒试剂、试剂盒PEGNTE仪器、耗材转子离心机实验步骤1. 制备病毒原液。加5
H－I－V－的检测与分析——感染CD4+原代细胞系及H－I－V－的诱导
实验步骤感 染 CD4+ 原 代 细 胞 系 及 H I V 的诱导基本方案1 用 H IV 体 外 急 性 感 染CD4 + 原代细胞及细胞系表9.2.1列出了一些最常用于体外H I V 感 染 的 C D 4 + 靶细胞。用其他不同谱系的C D 4 + 细胞系也可获得相应的结果，还 有 一 些
干细胞有限细胞系的建立方法介绍
方法:常规分离培养人骨髓间充质干细胞，流式细胞术检测骨髓间充质干细胞表面分子CD34、CD44、CD45，采用重组逆转录病毒载体将脑源性神经营养因子基因转入人骨髓间充质干细胞。检测脑源性神经营养因子基因修饰的骨髓间充质干细胞的增殖特性，细胞内脑源性神经营养因子的蛋白表达，细胞培养液中脑源性神经营养因
人类多能性干细胞系的建立的来源
人类多能性干细胞系的建立有两个来源，其方法与以往在动物模型中建立的方法相同。（1） 在Dr. Thomson进行的工作中，他从人类胚胎的囊胚期内细胞群中直接分离多能干细胞。Dr. Thomson从IVF（体外受精）临床实验室得到胚胎，这些胚胎是不育症临床治疗不需要的，用于繁殖，而非研究目的。从捐献者
研究建立始发态豚鼠多能干细胞系
1月9日，中国科学院广州生物医药与健康研究院研究员刘晶研究组与广东省人民医院教授朱平合作，在《干细胞报告》（Stem Cell Reports）上在线发表了题为Capture Primed Pluripotency in Guinea Pig的研究论文。该研究建立并表征了豚鼠始发态胚胎干细胞系（gp
剧毒蘑菇产毒与基因水平转移有关
剧毒蘑菇可致人于死地，原因在其含有毒素物质。记者8月21日获悉，中国科学院昆明植物研究所的一项研究成果发现，属于不同科别的剧毒蘑菇，能合成相同的、令人毛骨悚然的“鹅膏毒肽”，源于早年发生的基因水平转移事件。 据中国科学院东亚植物多样性与生物地理学重点实验室罗宏副研究员介绍，毒素是蘑菇因自我生存
剧毒蘑菇产毒与基因水平转移有关
据中国科学院东亚植物多样性与生物地理学重点实验室罗宏副研究员介绍，毒素是蘑菇因自我生存的需要而产生的，它可驱走对其有伤害的昆虫或其它动物，让后代孢子有机会成熟并得以传播和繁衍。因此，一些蘑菇进化出了高效的“毒素生产线”，增强了其生存适应能力。早在100多年前，人们就已发现世界上最毒的鹅膏属、盔孢
剧毒蘑菇产毒与基因水平转移有关
剧毒蘑菇可致人于死地，原因在其含有毒素物质。记者21日获悉，中国科学院昆明植物研究所的一项研究成果发现，属于不同科别的剧毒蘑菇，能合成相同的、令人毛骨悚然的“鹅膏毒肽”，源于早年发生的基因水平转移事件。 据中国科学院东亚植物多样性与生物地理学重点实验室罗宏副研究员介绍，毒素是蘑菇因自我生存的需
反转录病毒的传播介绍
反转录病毒在自然界的传播分为水平传播和垂直传播。水平传播是通过个体接触而传播,例如猫白血病病毒的传播。垂直传播即由上一代向下一代的传递,病原体长期在机体内潜伏,不表现出任何特征,也不引起疾病的任何症状。只有在特殊条件的影响下,病毒才活跃起来,对宿主而言,就有可能诱发肿瘤的发生发展,以至死亡。这种
反转录病毒的特点介绍
1）病毒为球形,直径100~120纳米,衣壳20面体立体对称,有包膜； 2）基因组为二倍体（唯一基因组非单倍体的病毒）,两个相同+ssRNA； 3）含有逆转录酶和整合酶； 4）复制通过DNA中间体,并与宿主细胞的染色体整合（唯一会主动整合的病毒）； 5）具有gag、pol、env编码基因
小鼠孤雄单倍体胚胎干细胞系首次建立
中国科学院上海生科院生物化学与细胞生物学研究所李劲松研究组和徐国良研究组在一项合作研究中，首次建立了来自孤雄囊胚的单倍体胚胎干细胞系，而这些细胞保持了一定水平的雄性印记，并进一步验证这些细胞能够代替精子在注入卵母细胞后产生健康的小鼠。相关研究成果今天在线发表于国际著名学术期刊《细胞》（Cell）
乙肝和丙肝病毒的细胞系
来源于一种人类肝肿瘤的细胞系表现出了乙肝和丙肝的感染和疾病进展，类似于在正常肝细胞中见到的，这提示它可能是一种开发肝炎疫苗和抗病毒疗法的模型。用于研究人类乙肝(HBV)或丙肝(HCV)病毒感染的实验细胞系已经被开发出来了，但是这些细胞系不支持这些病毒的整个生命周期。现有的细胞系的这些局限性为理解
大规模制备和浓缩反转录病毒原液实验——离心法
对于某些用途来说（如体内感染细胞），有必要浓缩反转染病毒原液以增加其滴度。如果想要用不编码可选择标记的病毒感染一群细胞，必须用髙滴度的病毒。操作中需用几百毫升至几升的产毒细胞上清。实验材料病毒细胞试剂、试剂盒小牛血清仪器、耗材滤器转子实验步骤1. 将产病毒细胞按1：10或1：20从刚生长汇片的细胞
食蟹猴孤雌单倍体胚胎干细胞系建立
中科院生物化学与细胞生物学研究所李劲松研究组、神经科学研究所孙强领导的非人灵长类研究平台(苏州)和健康科学研究所金颖研究组合作，建立了来自食蟹猴孤雌囊胚的单倍体胚胎干细胞系，为揭示灵长类动物生命规律提供了新的重要的研究工具。相关研究成果日前发表在《细胞研究》。 单倍体细胞为研究重要的生命科
成功建立小鼠孤雌单倍体滋养层干细胞系
真核生物的遗传信息都在细胞核中以染色体的形式存在。二倍体细胞中有两套染色体，这是哺乳动物遗传信息的呈递模式。而单倍体细胞中只具有一套染色体，这降低了其基因组的复杂程度，有利于隐性纯合体的获得，是极具价值的遗传学研究工具。 2011年及2012年，小鼠的孤雌与孤雄单倍体胚胎干细胞系被成功建立。此
细胞系（Cell－Line）或细胞株（cell－strain）的建立
一、概念1、细胞系（Cell Line）：原代培养舞经首次传代成功即成细胞系，由原先存在于原代培养物中的细胞世系（Lineage of Cells）所组成。2、细胞株（Cell Strain）：通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物称为细胞株。细胞株的特殊性质或标志
逆转录病毒的特点
1）病毒为球形，直径100~120纳米，衣壳20面体立体对称，有包膜；2）基因组为二倍体（唯一基因组非单倍体的病毒），两个相同+ssRNA；3）含有逆转录酶和整合酶；4）复制通过DNA中间体，并与宿主细胞的染色体整合（唯一会主动整合的病毒）；5）具有gag、pol、env编码基因，以及长末端重复序列
关于反转录病毒的基本介绍
逆转录病毒（Retrovirus）,又称反转录病毒,属于RNA病毒中的一类,它们的遗传信息不是储存在脱氧核糖核酸（DNA）,而是储存在核糖核酸（RNA）上。逆转录病毒基因组为二倍体,两条相同的单股正链RNA,其两端为长末端重复序列（LTR）,内含有较强启动子和增强子,对病毒DNA的转录调控具有重
简述反转录病毒的结构特征
（1）所有的反转录病毒都有一个结构特征,即粗大的球形颗粒,大小为 80~100 nm。并有完好的突起的外膜。 （2）反转录病毒颗粒的化学成分几乎是一样的,RNA 占 2%,蛋白质占 60%~70%,其中 5%~ 7% 是复杂的糖蛋白,脂类为 30%~40%,碳水化合物为 1%~2%。 （3）
反转录病毒感染的介绍
反转录病毒的感染能否实现,取决于细胞的特性,细胞的分裂时相以及与病毒有关的受体是否存在。而病毒的感受性则由细胞基因所决定。只有在许多条件都具备时,肿瘤因子才能感染细胞。首先,病毒吸附在细胞表面。在这一过程中,细胞受体及膜蛋白起主导作用,细胞没有相应的受体就不会被病毒感染。在敏感的细胞里,吸附的病
逆转录病毒的分类
逆转录病毒亚科该亚科中常见的病毒肿瘤病毒亚科 （禽类）rous肉瘤病毒（RSV），rous 相关病毒（RAV），其他鸡肉瘤病毒,禽白血病病毒（ALV）（哺乳类）鼠肉瘤病毒（MSV），鼠白血病毒（MLV），鼠内源性病毒，猪肉瘤病毒，牛白血病病毒，猪白血病病毒，鼠乳腺瘤病毒（灵长类）灵长类肉瘤病毒，猴
什么是逆转录病毒？
逆转录病毒（Retrovirus），又称反转录病毒，属于RNA病毒中的一类，它们的遗传信息不是储存在脱氧核糖核酸（DNA），而是储存在核糖核酸（RNA）上。逆转录病毒基因组为二倍体，两条相同的单股正链RNA，其两端为长末端重复序列（LTR），内含有较强启动子和增强子，对病毒DNA的转录调控具有重
新西兰部分区域产贝类检出麻痹性贝毒超标
据新西兰初级产业部（MPI）网站2016年1月22日消息，马尔堡峡湾的奥普阿湾区域产贝类检出麻痹性贝毒2.6mg/kg，超过0.8mg/kg的限量标准，食用将有致病风险。因此，MPI要求不要采收和食用奥普阿湾区域产的贻贝、牡蛎、蛤、扇贝、海胆和所有其他双壳贝类产品。
反转录病毒原液检测实验——在TrisTricine缓冲系统中电泳
实验材料蛋白质试剂、试剂盒Tricine样品缓冲液考马斯亮蓝染色液乙酸仪器、耗材电泳仪离心机实验步骤1. 按“Laemmli凝胶电泳法”的步骤1~7，配制溶液并灌制分离胶和积层胶。 2. 制备样品，但采用2×Tricine的样品缓冲液，加样前样品于40℃处理30〜60 -11。多肽分子量标准混合
突变的寨卡病毒更毒
埃及伊蚊传播寨卡病毒和登革热。 图片来源：Shutterstock / khlungcenter 一项近日发表于《细胞报告》的新研究显示，一种突变可能会使由蚊子传播的寨卡病毒更具传染性和危险性。 寨卡病毒通常不会在成人身上引发症状，但如果女性在怀孕期间感染，可
突变的寨卡病毒更毒
埃及伊蚊传播寨卡病毒和登革热。 图片来源：Shutterstock / khlungcenter 一项近日发表于《细胞报告》的新研究显示，一种突变可能会使由蚊子传播的寨卡病毒更具传染性和危险性。 寨卡病毒通
埃博拉病毒专家呼吁欧洲组建反埃博拉病毒军队
据法新社12月26日报道，一个研究埃博拉病毒的微生物学家称，如果欧洲不像美国那样把病毒当成“国家安全问题”来重视，那么欧洲会很容易被病毒攻击。 伦敦卫生及热带医学学院主任彼特•皮奥特称(Peter Piot)：“我们没有重视病毒，而我们的不重视导致我们变得很脆弱。”在英国《独立日报》的采访中
杨树次生木质部单细胞转录组图谱建立
近日，北京林业大学教授张德强团队在《植物生物技术杂志》发表研究论文。该研究以杨树为研究模式，利用单细胞测序技术、基因组分析、RNA原位杂交、愈伤组织遗传转化等技术建立了杨树次生木质部的单细胞转录组图谱，重构了完整的杨树次生木质部细胞类群，鉴定了调控木质部发育过程的关键转录因子，系统解答了次生木质
基因编辑到底是什么
CRISPR/Cas9系统中sgRNA(smallguideRNA)识别并结合目标基因的靶向序列，引导Cas9对结合位点进行剪切，产生DNA双链断裂（double-strandbreak,DSB），机体自身通过非同源重组（non-homologousendjoining，NHEJ）的方