反转录病毒产毒细胞系建立实验
建立一个能产生高水平的反转录病毒构建体的细胞系是一个长期的过程。首先，必须将反转录病毒构建体稳定地导入一种适当的包装细胞系中。当产生了稳定的细胞系后，必须对之进行鉴定，从中选出能产生具有正确结构的高滴度的病毒的细胞系。实验材料包装细胞系试剂、试剂盒HEPESCaCl2甘油DMSO仪器、耗材培养皿培养板离心机实验步骤1. 在转染前1天，在10 cm 培养皿中接种包装细胞，接种密度大约相当于10%~20%片的细胞数。2. 将10 μg 含有药物抗性基因的反转录病毒质粒DNA加入0.5 ml HeBS。再加入32 μl 2 mol/l CaCl2并同时轻轻摇晃。用手指轻弹试管外壁约 30 s，然后在室温下温育45 min，直到形成细小的淡蓝色沉淀。3. 移去包装细胞的培养液，吸取HeBS-DNA沉淀轻轻加在培养皿的中央。在组织培养操作橱内让细胞接触DNA 20 min，大约10 min 后，轻轻转动......阅读全文
连缀转录分析实验
实验方法原理 离心机和转头，沸腾的水浴锅， Dounce 匀浆器，晶型塑料或超明亮型吊桶式离心管，聚丙烯管，刀片，预设到 30°C 的振荡水浴，预设到 4°C 和 65°C 的水浴实验材料 非重组质粒载体含感兴趣 cDNA 或基因的重组质粒培养细胞或新鲜组织试剂、试剂盒 氯仿DNA变性溶液乙醇甘油贮
连缀转录分析实验
实验方法原理 离心机和转头，沸腾的水浴锅， Dounce 匀浆器，晶型塑料或超明亮型吊桶式离心管，聚丙烯管，刀片，预设到 30°C 的振荡水浴，预设到 4°C 和 65°C 的水浴 实验材
连缀转录分析实验
核连缀分析用于确定某个克隆的基因是否受转录调控。理论上，核连缀分析应该在检测稳定状态 mRNA 水平变化的杂交实验之后，而在启动子分析之前进行。本实验来源于分子克隆实验指南（第三版）下册，作者：〔美〕J. 萨姆布鲁克 D.W. 拉塞尔。实验方法原理离心机和转头，沸腾的水浴锅， Dounce 匀浆器，
毛冠鹿胚胎有限细胞系的建立的方法和意义
鹿科动物具有较高的经济价值，毛冠鹿属是鹿科麂亚科的2个属之一，仅有毛冠鹿(Elaphodus cephalophus)一种动物，为我国特有的二类保护动物。近年来，由于生态环境恶化，食物链遭到破坏，该动物日趋减少。1983年张锡然等首次报道了毛冠鹿2种核型，王宗仁又发现了第3种核型。3种核型差异较大，
分子植物卓越中心揭示抗铝毒转录因子调控机制
10月21日，中国科学院分子植物科学卓越创新中心上海植物逆境生物学研究中心研究员黄朝锋研究组在Plant Cell上在线发表题为Regulation of Aluminum-Resistance in Arabidopsis Involves the SUMOylation of the Zin
反溢流对催化产氢反应的促进作用研究获进展
溢流现象在多相催化反应中普遍存在，一直备受关注。催化过程中，不仅催化活性中心处于动态变化过程，溢流现象表明，活性物种的迁移传输也不容忽视，它加大了催化的复杂性。深入认识溢流效应，有助于阐明催化机理，是实现高效催化剂理性设计的前提条件。 氢气作为一种很有发展前途的绿色能源，得到了日益广泛的重视
美国将继续对中国和印尼产味精进行“双反”调查
美国国际贸易委员会15日裁定，从中国和印度尼西亚进口的味精对美国相关产业造成了损害，因此美国政府将继续对此类产品进行反倾销和反补贴("双反")调查。 美国国际贸易委员会6名委员当天投票一致认定，有"合理"的迹象表明，由于中国和印尼产味精以低于公平价格在美国销售，并且得到政府补贴，对美国相关
基因编辑到底是什么
嗨~来看点更专业的回答吧 ♪(･ω･)ﾉCRISPR/Cas基因编辑系统 CRISPR/Cas（Clustered Regularly Interspaced Short Palindromic Repeats/Cas）系统是目前被广泛运用的基因编辑系统，其原理是由CRISPR转录产生的
小檗碱竟然可以有效治疗鲫“鳃出血”病
中国鲫鱼养殖产量年均超过250万吨，是重要的大宗淡水养殖品种之一。自2010年以来，鲫“鳃出血”病在江苏、江西、湖北等鲫主要养殖区相继爆发，造成了鲫鱼养殖业的巨大经济损失，是当前鲫鱼养殖业可持续发展面临的最严峻挑战之一。鲫“鳃出血”病的病原为鲤科疱疹病毒-2型（Cyprinid herpesvi
关于副反转录病毒的基本介绍
副反转录病毒(retrovirus)的病毒特征为其基因组是双股(+)RNA，病毒含有RNA-DNA聚合酶(RNA-directed DNA polymerase)亦即反转录脢(retrotranscriptase)做为复制之用，反转录病毒具有二十面体对称核心，内含核醣蛋白，外有包膜，一般研究认为
简述逆转录病毒的特点
1）病毒为球形,直径100~120纳米,衣壳20面体立体对称,有包膜； 2）基因组为二倍体（唯一基因组非单倍体的病毒）,两个相同+ssRNA； 3）含有逆转录酶和整合酶； 4）复制通过DNA中间体,并与宿主细胞的染色体整合（唯一会主动整合的病毒）； 5）具有gag、pol、env编码基因
关于反转录病毒载体的应用介绍
反转录病毒载体是常用的病毒载体之一。反转录病毒的DNA基因组的两端各有一个长末端重复序列(5'—LTR和3'—LTR)，有一个包装病毒颗粒时必需的非编码序列ψ+，同时有三个编码蛋白质的基因gag、pol和env。 反转录病毒载体可以容纳外源DNA的长度在10 kb左右，以很高的
关于反转录病毒载体的应用介绍
反转录病毒载体可以容纳外源DNA的长度在10 kb左右，以很高的转染率感染宿主细胞，特别是分裂中的细胞。转入宿主的细胞后，反转录病毒载体随即整合到宿主细胞基因组内，这种整合的位点是随机的。反转录病毒载体在构建时，删去了poi、env基因和gag基因的3’端，但保留了病毒颗粒所需的ψ+序列。其目的
逆转录病毒的结构特征
（1）所有的反转录病毒都有一个结构特征，即粗大的球形颗粒，大小为 80~100 nm。并有完好的突起的外膜。（2）反转录病毒颗粒的化学成分几乎是一样的，RNA 占 2%，蛋白质占 60%~70%，其中 5%~ 7% 是复杂的糖蛋白，脂类为 30%~40%，碳水化合物为 1%~2%。（3）在反转录病毒
关于逆转录病毒的简介
逆转录病毒（Retrovirus）,又称反转录病毒,属于RNA病毒中的一类,它们的遗传信息不是储存在脱氧核糖核酸（DNA）,而是储存在核糖核酸（RNA）上。逆转录病毒基因组为二倍体,两条相同的单股正链RNA,其两端为长末端重复序列（LTR）,内含有较强启动子和增强子,对病毒DNA的转录调控具有重
逆转录病毒的结构特征
（1）所有的反转录病毒都有一个结构特征，即粗大的球形颗粒，大小为 80~100 nm。并有完好的突起的外膜。（2）反转录病毒颗粒的化学成分几乎是一样的，RNA 占 2%，蛋白质占 60%~70%，其中 5%~ 7% 是复杂的糖蛋白，脂类为 30%~40%，碳水化合物为 1%~2%。（3）在反转录病毒
逆转录病毒有哪些特点？
1）病毒为球形，直径100~120纳米，衣壳20面体立体对称，有包膜； 2）基因组为二倍体（唯一基因组非单倍体的病毒），两个相同+ssRNA； 3）含有逆转录酶和整合酶； 4）复制通过DNA中间体，并与宿主细胞的染色体整合（唯一会主动整合的病毒）； 5）具有gag、pol、env编码基因
Science－Advances：产毒动物种内竞争的靶标切换机制
动物的生存适应面临着来自生物因素和非生物因素的挑战，需要与物种和环境进行密切互作。在物种互作中，动物尤其需要通过种内和种间的竞争来获取生存资源。产毒动物主要依赖其毒液进行物种互作，它们拥有通过亿万年进化而来的毒液系统，主要依赖毒液成分的生物学功能来进行种内和种间竞争。目前的研究主要集中在毒液介导
农业农村部公告，这4种高毒农药禁产禁用
为保障农产品质量安全、人畜安全和生态环境安全，根据《中共中央、国务院关于深化改革加强食品安全工作的意见》，决定对氧乐果、克百威、灭多威、涕灭威等4种高毒农药采取禁用措施。现将有关事项公告如下： 一、自2024年6月1日起，撤销含氧乐果、克百威、灭多威、涕灭威制剂产品的登记，禁止生产，自2026
什么是慢病毒
慢病毒（LV）慢病毒载体(lentivirus vector，LV)属于逆转录病毒科(Retrovidae)，为 RNA病毒。区别一般的逆转录病毒载体，它对分裂细胞和非分裂细胞均具有感染能力。慢病毒载体的研究发展得很快，研究的也非常深入。该载体可以将外源基因有效地整合到宿主染色体上，从而达到持久性表
科学家建立卡波氏肉瘤组织中KSHV基因组表观遗传全景图
1月24日，国际学术期刊PLOS Pathogens 发表了中国科学院上海巴斯德研究所蓝柯研究组题为Epigenetic landscape of Kaposi's sarcoma-associated herpesvirus genome in classic Kaposi's
上海生科院等建立小鼠早期胚胎空间转录组图谱
3月22日，国际学术期刊《细胞》子刊《发育细胞》在线发表了中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所景乃禾研究组与中国科学院-马普学会计算生物学伙伴研究所韩敬东研究组合作的最新研究成果“Spatial Transcriptome for the Molecular Annotatio
基于脾坏死病毒的载体
这一章描述的实验方法是基于我们关于来自S N V 及其紧密相连的R E V -A 载体的实 验 （P a r v ee n e t a L 2000)。我们曾用这两种病毒载体对各种细胞进行基因转移，包括初期的造血细胞、人脑及有丝分裂后的神经元细胞（Parveen etal.2000)。与其他反转录病
基于脾坏死病毒的载体
实验步骤 基 于 S N V 载体体系的反转录病毒的生成以及它们在各种细胞类型转导中的应用材料试剂氯 化 钙（CaCl2) (2mol/L)溶 解 14. 7 g CaCl2 于 IOOml H2O 中。过滤除菌或高压灭菌。转染的细胞系： 293T 和 D17 (ATCC)甘 油（1 0 % 〜2
基于脾坏死病毒的载体
实验步骤 基 于 S N V 载体体系的反转录病毒的生成以及它们在各种细胞类型转导中的应用 材料 试剂 氯 化 钙（CaCl2) (2mol/L) 溶 解 14. 7 g CaCl2 于 IOOml H2O 中。过滤除菌或高
上海生科院等建立“类精子细胞”的单倍体细胞系
2012年，中国科学院上海生命科学研究院生物化学与细胞生物学研究所李劲松研究组与徐国良研究组合作从小鼠的精子中建立了孤雄单倍体胚胎干细胞，并证明这些细胞能够代替精子使卵母细胞“受精”产生半克隆小鼠，该项研究成果成功入选2012年中国科学十大进展。然而，单倍体细胞随着体外培养传代，特别是经过遗传编
我国科学家建立大熊猫诱导多能干细胞系
中国科学院广州生物医药与健康研究院研究员刘晶团队与成都大熊猫繁育研究基地合作，利用重编程技术成功建立了大熊猫成纤维细胞来源的诱导多能干细胞系（iPSCs），并从多维度揭示了大熊猫iPSC独特的细胞特征，进一步讨论了大熊猫iPSCs在物种保护和疾病治疗中潜在应用价值。相关成果近日发表于《科学进展》（S
中国科学家建立的“类精子细胞”单倍体细胞系
近日，一则关于“两颗卵子产健康幼鼠”的消息受到了关注，有些人认为此类研究改写了生殖规则。那么改写生殖规则的研究到底是怎样的研究？该技术是否能在实验室以外的地方用？ 国际顶级期刊关注中国科学家建立的“类精子细胞”单倍体细胞系 悉知，被称为改写生殖规则的研究实际上是中国科学家目前研究的“类精子细
实验常见问题解答汇集
BSP甲基化扩增得到的PCR产物可否直接测序，为什么需要构建TA克隆后测序？由于基因组DNA的每个CG位点甲基化程度各不相同，未发生甲基化的C会被重亚硫酸盐修饰成为U，而C若发生甲基化则不变，这样如果进行PCR产物测序就有可能在原有的C位点得到双峰图，无法确定甲基化的程度，必需通过回收PCR产物，进
关于人类T细胞白血病与其病毒的分离的介绍
1980年美国国立癌症研究所的Gallo实验室首先报道从蕈样霉菌病（mycosisfun-goides）病人（C、R、）的淋巴结和外周血液在体外建立了HUT102和CTCL－3细胞系。1981年又报道从1例皮肤型T细胞白血病（Sezary综合征）病人（M．B．）的外周血液建成了CTCL－2细胞系