反转录病毒产毒细胞系建立实验
建立一个能产生高水平的反转录病毒构建体的细胞系是一个长期的过程。首先，必须将反转录病毒构建体稳定地导入一种适当的包装细胞系中。当产生了稳定的细胞系后，必须对之进行鉴定，从中选出能产生具有正确结构的高滴度的病毒的细胞系。实验材料包装细胞系试剂、试剂盒HEPESCaCl2甘油DMSO仪器、耗材培养皿培养板离心机实验步骤1. 在转染前1天，在10 cm 培养皿中接种包装细胞，接种密度大约相当于10%~20%片的细胞数。2. 将10 μg 含有药物抗性基因的反转录病毒质粒DNA加入0.5 ml HeBS。再加入32 μl 2 mol/l CaCl2并同时轻轻摇晃。用手指轻弹试管外壁约 30 s，然后在室温下温育45 min，直到形成细小的淡蓝色沉淀。3. 移去包装细胞的培养液，吸取HeBS-DNA沉淀轻轻加在培养皿的中央。在组织培养操作橱内让细胞接触DNA 20 min，大约10 min 后，轻轻转动......阅读全文
反转录病毒产毒细胞系建立实验
实验材料 包装细胞系试剂、试剂盒 HEPESCaCl2甘油DMSO仪器、耗材 培养皿培养板离心机实验步骤 1. 在转染前1天，在10 cm 培养皿中接种包装细胞，接种密度大约相当于10%~20%片的细胞数。2. 将10 μg 含有药物抗性基因的反转录病毒质粒DNA加入0.5 ml HeBS。再加
反转录病毒产毒细胞系建立实验
反转录病毒载体导入包装细胞系 测定病毒滴度 培养细胞的Xgal染色 实验材料 包装细胞系
反转录病毒产毒细胞系建立实验
建立一个能产生高水平的反转录病毒构建体的细胞系是一个长期的过程。首先，必须将反转录病毒构建体稳定地导入一种适当的包装细胞系中。当产生了稳定的细胞系后，必须对之进行鉴定，从中选出能产生具有正确结构的高滴度的病毒的细胞系。实验材料包装细胞系试剂、试剂盒HEPESCaCl2甘油DMSO仪器、耗材培养皿培养
反转录病毒产毒细胞系建立实验——测定病毒滴度
实验材料病毒原液试剂、试剂盒G418仪器、耗材离心机培养箱实验步骤1. 感染的前1天按1：10至1：20将靶细胞NIH 3T3分传于6 cm 培养皿中。 2. 进行感染的当天，移去靶细胞的培养液，加入含有病毒原液的培养液。用1~2 ml 含 有0.01 μl~0.1 ml 病毒原液的培养液感染6
反转录病毒产毒细胞系建立实验——培养细胞的Xgal染色
实验材料转染细胞试剂、试剂盒PBS戊二醛低聚甲醛Xgal溶液仪器、耗材培养箱离心机实验步骤1. 弃培荞上清并加固定液，室温下，在通风橱中与2%低聚甲醛共育60 min，或与0.05%戊二醛共育5~15 min。2. 根据实验室化学物弃置规程弃去固定液，室温下用PBS充分洗涤细胞3次，第1次和第3
全国真菌毒素及产毒真菌污染数据库将建立
食品安全是近年来广受公众关注的问题。国家真菌毒素科技创新联盟日前在北京成立。我国将通过该联盟建立实时的全国真菌毒素及产毒真菌污染数据库，搭建联盟信息共享机制，建立和完善真菌毒素科技创新联合实验室、产品研发试验基地等。 国家真菌毒素科技创新联盟理事长、中国农业科学院农产品加工研究所所长戴小枫指出
反转录病毒原液检测实验
实验材料 病毒细胞试剂、试剂盒 polybrene小牛血清DMEM仪器、耗材 培养皿滤膜实验步骤 1. 在开始分析的前1天，按1：50将NIH 3T3细胞分传于3个6 cm 培养皿中。将1个培养皿标记为阳性对照，1个为阴性对照，1个用于待测病毒原液。2. 含有选择标记的待测病毒的制备：加0.01
反转录病毒原液检测实验
实验材料 病毒细胞 试剂、试剂盒 polybrene 小牛血清 DMEM
反转录病毒原液检测实验
辅助病毒是一种有时存在于无复制能力病毒原液中的有复制能力的病毒，辅助病毒的存在在动物的感染及谱系分析中会成为问题。实验材料病毒细胞试剂、试剂盒polybrene小牛血清DMEM仪器、耗材培养皿滤膜实验步骤1. 在开始分析的前1天，按1：50将NIH 3T3细胞分传于3个6 cm 培养皿中。将1个培
实验中建立细胞系的具体要求
实验中建立细胞系的具体要求 什么样的体外培养群可被认可为己鉴定的细胞，视具体情况而定，无统一规定。对于用作原代培养的细胞只要供体均一，取材部位及组织种类等条件稳定即可，如用做长期培养，特别是反复传代的细胞，常需做如下说明： 1、组织来源：细胞供体所属物种，来自人体或者动物；
Honda氏产毒肉汤
成分 水解酪蛋白 20g 酵母浸膏粉 10g 氯化钠 2.5g 磷酸氢二钠 15g 葡萄糖 5g 微量元素 0.5mL 蒸馏水 1000mL pH7.5制法 溶解后校正pH，高压灭菌121℃ 15min，待冷至
反转录病毒载体的制备实验
实验材料二个反转录病毒包装细胞株反转录病毒载体包含选择性标记试剂、试剂盒PBS细胞染色液组织培养皿仪器、耗材完全的 Dulbecco 改良 Eagle 培养基低蛋白质结合的纤维素乙酸盐注射器式滤器克隆形成环实验步骤展开
土豆不放冰箱会产毒？
近来不少人的朋友圈里出现一条“土豆不放冰箱毒素多”的消息，土豆是很多家庭的备用菜品，那么，土豆该如何储存及食用呢？ 中国农业大学食品学院营养与食品安全系副教授范志红指出，土豆天然含有一类微量的含氮甾类生物碱有毒物质，叫做龙葵素，也称龙葵碱或茄碱，通常以糖苷形式存在。对于土豆来说，这种生
霉菌产毒有何特点
霉菌产毒的特点1）霉菌产毒仅限于少数的产毒霉菌，而且产毒菌种中也只有一部分菌株产毒。2）产毒菌株的产毒能力还表现出可变性和易变性，产毒菌株经过多代培养可以完全失去产毒能力，而非产毒菌株在一定条件下可出现产毒能力。因此，在实际工作中应该随时考虑这一问题。3）一种菌种或菌株可以产生几种不同的毒素，而同一
霉菌产毒有何特点
霉菌产毒的特点1）霉菌产毒仅限于少数的产毒霉菌，而且产毒菌种中也只有一部分菌株产毒。2）产毒菌株的产毒能力还表现出可变性和易变性，产毒菌株经过多代培养可以完全失去产毒能力，而非产毒菌株在一定条件下可出现产毒能力。因此，在实际工作中应该随时考虑这一问题。3）一种菌种或菌株可以产生几种不同的毒素，而同一
反转录病毒原液检测实验——反转录酶分析法
实验材料病毒试剂、试剂盒SSC乙醇仪器、耗材滴定板滤纸离心机实验步骤1. 加50 μl RT反应混合物于96-孔微量滴定板的各孔中。每个待测或对照样品占一孔。加10 μl 病毒上淸，盖上平板，置于37℃培养箱中温育1~2 h。2. 将各反应液10 μl 点于一张2.5 cm 直径的圆形DE52或
人胚胎干细胞系:衍生与培养实验—人胚胎干细胞系的建立
实验步骤方 案 2. 6 人 胚 胎 干 细 胞 系 的 建 立试剂与材料无菌或无菌制备□ 5〜6 天的人胚泡，经 H F E A 允许，并且像先前讨论的完全经病人同意。 HFEA所要求的全部细节能够在 H E F A 的网站找到（http//:www.hfea.g0v.uk)。□链霉蛋白酶， 0
建立细胞系或细胞株
各种已被命名和经过细胞生物学鉴定的细胞系或细胞株，都是一些形态比较均一、生长增殖比较稳定的和生物性状清楚的细胞群。因此凡符合上述情况的细胞群也可给以相应的名称，即文献中常称之为已鉴定的细胞（Certified Cells）。已鉴定的细胞可用于各种实验研究和生产生物制品。当前世界上已建的各种细胞系（株
肠毒素产毒培养基
成分 蛋白胨 20g 胰消化酪蛋白 200mg(氨基酸) 氯化钠 5g 磷酸氢二钾 1g 磷酸二氢钾 1g 氯化钙 0.1g 硫酸镁 0.2g
常见的产毒真菌有哪些？
(1)曲霉属(Aspergillus Link):黄曲霉(A.flavus)、寄生曲霉(A.parasiticus)、赭曲霉(A.ochraceus)、杂色曲霉(A.flavus)、烟曲霉(A.fumigatus)、构巢曲霉(A.nidulans clavus)和棒曲霉(A.clavus)等。(2)
细胞系的建立要求是什么？
什么样的体外培养群可被认可为己鉴定的细胞，视具体情况而定，无统一规定。对于用作原代培养的细胞只要供体均一，取材部位及组织种类等条件稳定即可，如用做长期培养，特别是反复传代的细胞，常需做如下说明： 组织来源：细胞供体所属物种，来自人体或者动物；个体性别、年龄；取材的器官或组织。如系肿瘤组织，应说
干细胞有限细胞系的建立目的
目的:建立脑源性神经营养因子基因修饰的人骨髓间充质干细胞系。
细胞系或细胞株的建立
1、细胞系（Cell Line）：原代培养舞经*传代成功即成细胞系，由原先存在于原代培养物中的细胞世系（Lineage of Cells）所组成。 2、细胞株（Cell Strain）：通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物称为细胞株。细胞株的特殊性质或标志必须
细胞系或细胞株的建立
一、概念1、细胞系（Cell Line）：原代培养舞经首次传代成功即成细胞系，由原先存在于原代培养物中的细胞世系（Lineage of Cells）所组成。2、细胞株（Cell Strain）：通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物称为细胞株。细胞株的特殊性质或标志必须
细胞系或细胞株的建立
一、概念1、细胞系（Cell Line）：原代培养舞经首次传代成功即成细胞系，由原先存在于原代培养物中的细胞世系（Lineage of Cells）所组成。2、细胞株（Cell Strain）：通过选择法或克隆形成法从原代培养物或细胞系中获得具有特殊性质或标志物称为细胞株。细胞株的特殊性质或标志必须
假包膜型反转录病毒载体的制备实验
实验材料反转录病毒载体质粒试剂、试剂盒293GP 和 NIH3T3 细胞的培养物仪器、耗材超速离心机细胞培养皿聚丙烯管灭菌无热原的注射器式滤器超干净的离心管宽嘴离心瓶超速离心机G S A 转子实验步骤展开
杆状病毒毒种贮液的制备实验
杆状病毒是一类具有囊膜包裹的双链环状DNA病毒，其基因组大小为80~180 kb，在自然界中以节肢动物作为专一性宿主进行感染和传播。实验材料杆状病毒试剂、试剂盒胎牛血清重组病毒仪器、耗材培养箱培养瓶转子实验步骤从单层培养中制备： 1a. 以毎瓶1.8×107 Sf9细胞的密度，将细胞接种于两个15
日本首次建立癌症干细胞稳定细胞系
近年来，干细胞治疗应用研发成热点■李勤 近日，日本中外制药株式会社（Chugai）在世界上首次成功建立具有结肠癌干细胞性质的稳定细胞系。 该研究由新加坡Pharma Logicals Research公司、日本Forerunner Pharma Research公司与中外制药株式
肠毒素产毒培养基的制备
成分： 蛋白胨 20g 胰消化酪蛋白 200mg(氨基酸) 氯化钠 5g 磷酸氢二钾 1g 磷酸二氢钾 1g 氯化钙 0.1g
大规模制备和浓缩反转录病毒原液实验
实验材料 病毒细胞试剂、试剂盒 小牛血清仪器、耗材 滤器转子实验步骤 1. 将产病毒细胞按1：10或1：20从刚生长汇片的细胞分传至20~50个10 cm 培养皿中，培养细胞至50%~90%汇片。2. 弃去培养液，轻轻加入半量的培养液，注意培养液碱性不要过大，培养2~3天。 3. 收取上清，用